新型鵝細小病毒病診斷及其綜合防治措施

喬丹丹，劉婷雋，陳全剛，胡安康

（徐州醫科大學實驗動物中心，江蘇 徐州 221004）

新型鵝細小病毒（Novel goose parvovirus，NGPV）在鴨群中感染率為10%～30%，死亡率為2%～6%[1]。NGPV 既可通過糞口途徑水平傳播，也可通過種鴨或種蛋垂直傳播，耐過鴨易成為僵鴨或殘鴨，病鴨體重僅為正常鴨體重的50%，淘汰率可達80%，使養殖成本增加、出欄率降低、不易銷售，給我國養禽業造成了巨大經濟損失。本文就NGPV 病的病因分析、流行病特點、臨床癥狀和免疫防控進行綜述，以期為NGPV 病診斷、檢測、綜合防控提供參考依據。

1 病因分析

1.1 病原學特征

NGPV 屬細小病毒科、細小病毒亞科、依賴病毒屬，是鵝細小病毒（GPV）經典株的一個進化分支，與GPV 的核苷酸同源性為92.2%～97.1%。但其感染宿主的類型、致病性、發病特征均有所不同，致病機制已發生較大變化[2]。在2015年至2016年期間，從中國不同地區分離出7 株NGPV 菌株，與經典GPV 相比，在NGPV的7 個分離株中發現5 個共有核苷酸突變，在6個NGPV 分離株中出現2 個核苷酸對缺失，在NGPV 的復制蛋白和衣殼蛋白中分別發現12 個和8 個同步氨基酸變化，這對病毒基因調控、宿主體液免疫反應有很重要的影響[3]。

1.2 電鏡觀察特征

電鏡觀察結果顯示，NGPV 在電鏡下也呈現出直徑約20～25 nm 的病毒粒子，與GPV 類似，皆為球形[4]。

1.3 致病機理

NGPV 是一種無包膜的細小病毒，其DNA基因組為線形單鏈，長度約為5.1 kb，是GPV 的鴨源變異株[5]，包含兩個開放閱讀框（ORF1 和ORF2），其中ORF1 含有1 884 nt，編碼628 aa的NS1 蛋白和452 aa 的NS2 蛋白[6]；ORF2 含有2 199 nt，包含編碼733 aa 的結構蛋白VP1、588 aa 的VP2 和535 aa 的VP3[7]。VP1 包含了VP2 和VP3，VP1、VP2、VP3 公用一個終止密碼子（TAA），但是起始密碼子不同。VP2 和VP3 蛋白是VP1 的mRNA 經過可變拼接產生的。該病毒與MDPV 存在著一定的抗原相關性，它們的共同抗原主要在核衣殼蛋白VP3，而VP1和VP2 蛋白存在抗原性差異[8]。

1.4 病原理化特性

NGPV 對外界環境和消毒劑的抵抗力較強，在酸性、熱性環境下的存活力較強，但對刺激性的消毒劑如氨水比較敏感，對紫外線也較敏感。對其他消毒劑，如0.04%甲醛和乙氧基乙烷有較強的抵抗力[9]。

2 流行特點

2.1 傳播速度快，范圍廣

由 NGPV 引起的鴨短喙與侏儒綜合征（SBDS），于20 世紀70年代首次在法國的騾鴨和番鴨群中被發現報道，隨后于20 世紀90年代在臺灣的騾鴨中被報道[10]。2000年在我國南方福建、臺灣等地的養鴨地區零星發生，然后逐漸擴散。2015年3月，中國北方如山東、江蘇、安徽各省的番鴨群中出現了SBDS。近年來，SBDS的傳播速度非常迅速，在中國的各個鴨產區廣泛存在，包括福建、山東、安徽、上海、河北、浙江、湖南和廣東省[11]。盡管鴨群的發病率在10%～30%之間，死亡率通常低于10%，但是該病導致的患鴨發育不良、短喙、體重減輕、脛骨易骨折等癥狀對中國養鴨業造成了巨大的經濟損失。

2.2 發病具有明顯季節性

每年10月至次年的5月為本病高發期，NGPV 在低溫環境中可存活數月及數年。該病毒對于陽光和溫度敏感，夏季紫外線強，溫度高，不利于NGPV 的存活，導致感染率減少。

2.3 可垂直傳播，危害大

研究發現，NGPV 可以通過垂直傳播感染雛鴨，這大大地增加了該病的危害性[12]。NGPV 能在鴨胚中增殖，并能導致鴨胚出現生長遲緩和胚體出血的癥狀[13]。

2.4 在水禽細小病毒群中譜系獨特

Shilong Chen 研究表明，SBDSV M15 分離株對鵝細小病毒抗原呈陽性，但對番鴨細小病毒抗原不呈陽性。擴增348 bp（2604～2951 nt）的VP1 基因片段，其序列表明該病毒與匈牙利GPV株的親緣關系最為密切，該株也是從患有SBDS疾病的騾鴨中分離出來的。通過給鳥類接種SBDSV M15，也繁殖了類似的疾病[14]。Vilmos Palya 試驗研究表明，只有用從患SBDS 的番鴨上分離的NGPV 毒株，經口服途徑感染1 日齡雛鴨，才能復現SBDS 癥狀。系統發育樹顯示，從騾鴨SBDS 分離的細小病毒屬于鵝細小病毒相關水禽細小病毒群的一個獨特譜系[15]。

2.5 與經典的GPV 存在明顯的差異

陳浩等分離出我國第一株NGPV 全基因組分離株SDLC01 并進行了測序，與經典水禽細小病毒分離株和疫苗株進行了系統發育比較分析。結果顯示，SDLC01 株與GPV、MDPV 分離株都不同，SDLC01 與GPV 分離株具有90.8%～94.6%的核苷酸同一性，與MDPV 分離株具有78.6%～81.6%的核苷酸同一性。SDLC01 與騾鴨分離株（菌株D146/02）高度相似，與歐洲GPV 分離株接近，但與亞洲GPV 分離株不同。與經典GPV和MDPV 分離株相比，SDLC01 在160～176 nt和306～322 nt 位置之間刪除了兩個主要片段。SDLC01 的病毒致病性和基因組特征表明，NGPV 是SBDS 的致病因子，屬于一個獨特的GPV 相關亞群。此外，該研究證明病鴨組織PCR檢測結果陽性，且病毒能在鴨胚和鴨胚成纖維細胞中增殖[16]。除基因組的差異外，還存在宿主嗜性和臨床癥狀的差異，GPV 主要流行于雛鵝和雛番鴨并引起腹瀉和神經癥狀，NGPV 主要流行于雛櫻桃谷鴨、番鴨、北京鴨群并引起SBDS，相比經典的GPV，NGPV 在感染宿主的致病性上存在明顯的差異[17]。

2.6 與鴨圓環病毒共感染情況嚴重

近年來 NGPV 和鴨圓環病毒（ Duck circovirus, DUCV）的共同感染通常發生在SBDS的現場病例中[18]。研究人員建立了一種復合感染模型，并對2 種病毒的復制和致病性進行了評估，發現NGPV 和DUCV 之間存在協同作用。與單感染組相比，合并感染的致病性顯著增強，合并感染對鴨子的生長發育影響更嚴重，并引起更嚴重的臨床癥狀和病理變化。主要病變為肝、腎和十二指腸的變性、壞死、出血、淋巴細胞浸潤，包括脾臟、胸腺、法氏囊在內的免疫器官萎縮，以及這些器官的骨髓和組織細胞損失。DUCV 和GPV 感染的特征性病變出現，但免疫器官的病變更為嚴重。肝臟和腎臟是主要的代謝器官，因此它們的病變更嚴重，病毒載量更高[19]。

3 臨床癥狀

NGPV 可造成跛行、脛骨易折、上下喙萎縮導致舌頭外露，使患鴨采食困難，體重減輕，大大降低患病鴨的經濟價值[20]。最初感染NGPV 的雛鴨無明顯癥狀，一周后出現呆滯、精神沉郁，兩周后開始表現出短喙、生長變慢等特征性癥狀[21]。NGPV 發病癥狀與感染鴨的日齡有一定關聯。

2～4 日齡。肉鴨出現腿軟，站立不穩，走路時雙腿分叉向外，呈八字腳，易摔倒。隨后出現跛行，癱瘓，腹瀉，病鴨仰面著地，掙扎著卻無法站立，翻跟頭，扭脖，不愿走動[22]。

10 日齡。肉鴨出現運動障礙，常見蹲坐式癱瘓，采食不便或無法采食，生長遲緩。

15 日齡。病鴨開始出現上下喙較短，舌頭伸出較大，采食困難，體型消瘦，腿短且無力、羽毛蓬亂稀少，病鴨精神差，表現持續腹瀉，有的形成僵鴨，死淘率加大[23]。

4 病理變化

病原體主要在腸道和舌上皮細胞進行復制。病毒增殖后會破壞病鴨的腸道黏膜，有研究表明，鴨源NGPV 感染會導致腸道屏障受損，免疫功能出現障礙，從而引起鈣磷代謝失衡引起的一系列癥狀[24]。病鴨或死鴨的診斷性病理損傷未發現明顯變化。

5 免疫防控

5.1 疫苗預防

目前 NGPV 還沒有特異的商品化疫苗，Jiewen Zhou 等研制了一種SBDS 的候選滅活疫苗。接種此疫苗可顯著抑制鴨體內NGPV 的復制，且該疫苗與油乳劑佐劑合用時，具有良好的免疫原性，為SBDS 的預防和控制提供了一個潛在的強大工具[25]。

5.2 增強雛鴨的抵抗力

加強環境管理，增強雛鴨的抵抗力[26]。供應清潔飲用水和營養飼料。

5.3 加強飼養管理

在寒冷的冬天，鴨舍須防冷保暖，適度通風，保持適宜濕度，做好養殖場的環境衛生，加強飼料營養，養殖密度不宜過大，減少應激。

5.4 進行無害化處理與及時消毒

出現上下喙萎縮、大舌頭、跛行等特征性癥狀時要及時進行NGPV 的檢測。在引種時做好病原檢測，禁止到發病疫區引種。患病鴨及時處理隔離，可進行無害化處理與及時消毒，避免波及全群。

5.5 及時淘汰凈化

養殖場內可能存在水平和垂直傳播情況，感染鴨的不能留作種用。有條件的飼養場可以進行NGPV 病毒血清篩查，發現抗體陽性的鴨要及時淘汰處理掉。

6 小結

目前尚無針對NGPV 病的特效療法，對該病的防治以小鵝瘟疫苗免疫和預防為主，因此仍迫切需要研制保護率高、免疫性好、成本低、生物安全風險小且副反應少的特異性疫苗，以提供有效的抗體，降低發病率。關于NGPV 的致病性及與經典毒株的差異性已經有許多報道，但是對于NGPV 發病機制及病毒演化變異過程還不清楚，相關研究及治療防控方法還不明確，以后還需更進一步研究。本研究旨在分析NGPV 的發病因素、流行病學診斷、預防措施，以期為今后該病的研究及防控提供技術支撐。