魚膠改善皮膚保濕及抗皺功效的人群試驗(yàn)研究

劉燕清，趙影，郭澤宇，張宇，黃亮，鐘碧鑾

1.廣東官棧營養(yǎng)健康科技有限公司 （廣州 510642）；2.官棧魚膠營養(yǎng)安全研究中心 （廣州510642）

皮膚缺水長皺紋是人體衰老最明顯的表現(xiàn)之一。陽光下的持續(xù)暴曬和快生活方式導(dǎo)致人體內(nèi)的自由基攻擊皮膚表面。隨著年齡的增長和紫外線等外界環(huán)境的刺激，皮膚中的彈性蛋白和膠原蛋白不斷流失，具體表現(xiàn)為角質(zhì)層變薄、皮膚暗沉、缺水干燥、長皺紋、肌膚再生能力減弱。人體在發(fā)生氧化反應(yīng)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生大量自由基，過剩的自由基會(huì)攻擊健康的細(xì)胞，加速細(xì)胞死亡，破壞膠原蛋白、彈性纖維。彈性蛋白顯著下降，會(huì)損害表面彈性，皮膚自身修復(fù)能力減弱，皮膚屏障衰退導(dǎo)致鎖水能力，保濕能力減弱。

花膠即魚膠，是“鮑、參、翅、肚”中的肚，因而其別稱還有魚泡、魚肚、壓胞等，是各類魚鰾的干制品，有著“海洋人參”的美譽(yù)[1]。魚膠富含膠原蛋白、透明質(zhì)酸、彈性蛋白、多糖和不飽和脂肪酸，還有多種微量元素和維生素，有補(bǔ)氣血、美容養(yǎng)顏、補(bǔ)腎益精等作用[2]，屬于低脂肪高蛋白的一種滋補(bǔ)佳品，被世人奉為美容養(yǎng)顏，強(qiáng)身健體的良藥。

魚膠作為一種富含膠原蛋白和透明質(zhì)酸的滋補(bǔ)佳品，在我國被廣泛使用近千年，除了具有修復(fù)皮膚損傷、固精培元外，還具有美容養(yǎng)顏、補(bǔ)充膠原的優(yōu)良功效[3]。皮膚老化主要使皮膚表現(xiàn)為水分流失、皮膚松弛和皺紋等[4]。膠原蛋白流失也是皮膚老化因素之一。膠原蛋白在延緩皮膚衰老中應(yīng)用廣泛，已有研究證明口服膠原蛋白可以修復(fù)衰老皮膚[5]，其作用功效正逐步得到市場認(rèn)可[6]。關(guān)于膠原蛋白和魚膠的大多數(shù)研究停留在單一組分的評價(jià)及多組分的體外評價(jià)，缺乏人群試驗(yàn)研究。因此，通過監(jiān)測60例健康女性受試者在使用測試樣品前后的皮膚角質(zhì)層水分、皮膚厚度，分析皮膚皺紋數(shù)量、體積、面積和長度，驗(yàn)證產(chǎn)品在保濕、抗皺方面的功效。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

魚膠樣品（廣東官棧營養(yǎng)健康科技有限公司提供，蛋白質(zhì)8.00 g/100 g、脂肪2.60 g/100 g、膠原蛋白6.52 g/100 g、透明質(zhì)酸鈉0.91 g/100 g、彈性蛋白0.35 g/100 g）。樣品組食用樣品頻率為每日1次，連續(xù)使用56 d。使用方法有3種，分別是：直接開蓋即食；開蓋后，倒入微波爐加熱10 s左右食用；整瓶放于熱水中加熱1～2 min，熱著食用。對照組除不食用樣品，其余所有條件與樣品組一致，排除受試者的主觀影響。

1.2 受試者信息

受試測試者及對照組均篩選自官棧功效實(shí)驗(yàn)室測試者信息數(shù)據(jù)庫，篩選面部松弛狀態(tài)及身體健康程度相當(dāng)、沒有接受過皮膚治療，美容以及其他可能影響結(jié)果的測試者66人。中途退出6人，最終受試者均為女性，年齡在25～40歲之間，按照年齡層平均隨機(jī)分配樣品組及對照組。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用雙盲隨機(jī)對照的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將符合條件的健康受試者隨機(jī)分組。樣品組和對照組都在試驗(yàn)期間只使用指定的皮膚護(hù)理產(chǎn)品以及不使用任何對結(jié)果有影響的化妝品、藥品和保健品，另外需簽署知情同意書。

樣品組食用樣品頻率為每日1次，連續(xù)使用56 d。使用方法有3種，分別是：直接開蓋即食；開蓋后，倒入微波爐加熱10 s左右食用；整瓶放于熱水中加熱1～2 min，熱著食用。對照組除不食用樣品，其余所有條件與樣品組一致，排除受試者的主觀影響。

1.4 試驗(yàn)方法

整個(gè)測試過程測試環(huán)境條件控制（溫度20～22 ℃，濕度40%～60%）。

1.4.1 試驗(yàn)條件

試驗(yàn)條件見表1。

表1 測量儀器測量參數(shù)表

表2 受試者自我評估評價(jià)指標(biāo)表

表3 測試步驟

1.4.2 受試者自我評估

使用樣品14，28，42和56 d后采用問卷調(diào)查的方式，評價(jià)使用樣品后的感受。

1.4.3 測試步驟

1.5 結(jié)果判定依據(jù)

1.5.1 保濕功效判定指標(biāo)使用樣品后，樣品組皮膚角質(zhì)層水分含量顯著性高于（P＜0.05）對照組，表示樣品有保濕效果。

1.5.2 抗皺功效判定指標(biāo)

使用樣品后，樣品組皮膚皺紋數(shù)量、長度、體積、面積顯著性低于（P＜0.05）對照組，表示樣品有抗皺效果。使用樣品后，樣品組真皮層皮膚厚度顯著性高于（P＜0.05）對照組，表示樣品有抗皺效果。相關(guān)參數(shù)中任一參數(shù)的變化結(jié)果相差顯著（P＜0.05，則認(rèn)定該樣品有對應(yīng)功效。

1.6 數(shù)據(jù)處理

1.6.1 描述性統(tǒng)計(jì)

計(jì)算在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)皮膚各參數(shù)的均值、標(biāo)準(zhǔn)差、最大值、最小值、中值。

1.6.2 正態(tài)分布檢驗(yàn)

對上述均值進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，正態(tài)性檢驗(yàn)漸進(jìn)顯著性（雙側(cè)）數(shù)值＞0.05，則該系列數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布。

1.6.3 差異性分析

前后對比：對上述均值進(jìn)行差異性分析。當(dāng)2組數(shù)據(jù)同時(shí)為正態(tài)分布時(shí)，使用配對T檢驗(yàn)分析2組數(shù)據(jù)間的差異性。當(dāng)2組數(shù)據(jù)不同時(shí)為正態(tài)分布時(shí)，使用秩和檢驗(yàn)分析2組數(shù)據(jù)間的差異性。

1.6.4 評判標(biāo)準(zhǔn)

前后對比：若統(tǒng)計(jì)方法顯著性水平P＜0.05，則提示樣品組使用樣品前與使用樣品后在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異。

若統(tǒng)計(jì)方法顯著性水平P＞0.05，則提示樣品組使用樣品前與使用樣品后在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 皮膚角質(zhì)層水分含量分析

從圖1可知，隨著食用天數(shù)的延長，樣品組和對照組的水分都呈現(xiàn)一定上升趨勢，并且食用樣品組的水分明顯比食用對照組的水分要高，說明樣品對受試者的皮膚角質(zhì)層水分有一定的改善作用。此外，與不使用樣品相比，樣品組的受試者在食用樣品（魚膠）56 d后，臉頰部位皮膚角質(zhì)層水分提升15.37%，有顯著性差異。說明堅(jiān)持食用一定周期魚膠后，皮膚角質(zhì)層水分有顯著性的提升。魚膠含有膠原蛋白，2009年有學(xué)者研究證明，口服膠原蛋白水解產(chǎn)物能改善皮膚中水分的下降并減少膠原蛋白降解[7]。2013年時(shí)Oba等[8]研究證明口服膠原蛋白水解物能顯著增加小鼠皮膚角質(zhì)層水分，皮膚彈性和透明質(zhì)酸含量均有明顯改善，與試驗(yàn)結(jié)果一致。結(jié)合魚膠的主要成分及過往的研究結(jié)論，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其原理可能有三。一是由于魚膠的膠原蛋白具有增加皮膚中透明質(zhì)酸含量。表皮層透明質(zhì)酸是真皮層中重要的保濕因子，有助于保持皮膚中的水分，膠原蛋白能夠刺激透明質(zhì)酸的合成，提升皮膚的持水能力。二是由于膠原蛋白能促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖。成纖維細(xì)胞是真皮層中最重要的細(xì)胞之一，能夠分泌透明質(zhì)酸，細(xì)胞修復(fù)因子等活性成分，有助于維持皮膚的正常結(jié)構(gòu)及皮膚的水分[9]。三是膠原蛋白可以維持表皮細(xì)胞緊密連接。干燥的肌膚往往伴隨著表皮細(xì)胞之間間隙的增加，導(dǎo)致皮膚持水能力下降。而膠原蛋白能夠滋養(yǎng)表皮細(xì)胞，使表皮細(xì)胞連接緊密，減少表皮水分損失（TEWL），具有顯著的鎖水功效[10]。

圖1 各個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)皮膚角質(zhì)層水分（臉頰部位）

2.2 皮膚厚度分析

從圖2可知，與對照組相比，樣品組的真皮層皮膚厚度變化趨勢不斷升高，說明真皮層皮膚越厚，皮膚狀態(tài)越穩(wěn)定。與對照組相比，樣品組在食用樣品28 d后，真皮層皮膚厚度提升8.29%，有顯著性差異。研究證明，在堅(jiān)持食用一定周期的魚膠樣品后，其真皮層的皮膚厚度得到顯著提升（28 d），這與Oba等[8]研究結(jié)果一致。蔣玉[11]的動(dòng)物試驗(yàn)證明，在經(jīng)過中劑量的膠原蛋白喂養(yǎng)后的小鼠，其真皮層皮膚厚度相比對照組顯著增加，皮膚彈性也顯著增加。Kieffer等[12]采用魚膠原蛋白研究其對光損傷皮膚的修復(fù)作用發(fā)現(xiàn)，光損傷患者的真皮層厚度增加，眼部皺紋減少，光損傷屏蔽能力大幅提高，皮膚狀況得到顯著改善。綜上，試驗(yàn)結(jié)果與已報(bào)道研究結(jié)論一致，食用魚膠可以促進(jìn)皮膚的真皮層厚度增加。

圖2 各個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)真皮層皮膚厚度（臉頰部位）

2.3 皮膚皺紋分析

從圖3分析可得，與對照組相比，樣品組受試者的皺紋數(shù)量、皺紋體積、皺紋面積及皺紋長度都較小，說明樣品確實(shí)對皮膚皺紋起到一定改善作用。與對照組相比，樣品組在食用樣品14 d后，眼角部位皮膚皺紋數(shù)量降低33.02%，皮膚皺紋長度降低20.00%，皮膚皺紋體積降低15.24%，皮膚皺紋面積降低16.48%，皮膚皺紋數(shù)量、長度、體積及面積均有顯著性差異。在食用樣品28 d后，眼角部位皮膚皺紋數(shù)量降低35.38%，皮膚皺紋體積降低14.13%，皮膚皺紋面積降低17.70%，皮膚皺紋長度降低22.40%，皮膚皺紋數(shù)量、長度、體積及面積均有顯著性差異。在食用樣品42 d后，眼角部位皮膚皺紋數(shù)量降低34.91%，皮膚皺紋長度降低21.60%，皮膚皺紋面積降低16.76%，皮膚皺紋數(shù)量、長度及面積均有顯著性差異。在使用樣品56 d后，眼角部位皮膚皺紋數(shù)量降低36.32%，皮膚皺紋長度降低21.60%，皮膚皺紋面積降低16.22%，皮膚皺紋數(shù)量、長度及面積均有顯著性差異。研究證明，在堅(jiān)持食用一定周期的魚膠樣品后，可顯著降低眼部皮膚皺紋數(shù)量。Skovgaard等[13]通過對比臨床調(diào)查后發(fā)現(xiàn)，食用含有魚膠原蛋白新型膳食補(bǔ)充劑的試驗(yàn)組皮膚狀態(tài)得到顯著改善，具體表現(xiàn)為亮度提升、斑點(diǎn)變淡、皺紋減少、毛孔變小等。皮膚的衰老主要體現(xiàn)在皮膚中彈性蛋白和膠原蛋白的損失和異常交聯(lián)，對皮膚的支撐能力被破壞。食用魚膠有效改善皮膚狀態(tài)減少皺紋數(shù)量的原因有2個(gè)[14-16]：一是魚膠含有的膠原蛋白進(jìn)入體內(nèi)后會(huì)被分解成膠原蛋白肽，進(jìn)而被吸收利用合成新的膠原蛋白，促進(jìn)膠原蛋白的合成，膠原蛋白肽能夠刺激成纖維細(xì)胞合成分泌膠原蛋白填充皮膚的皺紋，恢復(fù)皮膚彈性；二是膠原蛋白可以抑制基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP），年輕皮膚中，基質(zhì)金屬蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑（TIMP）處于動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)，然而隨著時(shí)間的流失，金屬蛋白酶活性增強(qiáng)，而其抑制劑減少，加速皮膚中彈性蛋白和膠原蛋白的流失，皮膚出現(xiàn)皺紋、變得松弛，膠原蛋白肽能夠抑制基質(zhì)金屬蛋白酶活性，從根源上減少膠原蛋白和彈性蛋白的流失，恢復(fù)皮膚彈性緊致。

圖3 各個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)皮膚皺紋變化圖（眼角部位）

2.4 受試者自我評估

從受試人群的自我評估（表4和表5）可得：試驗(yàn)人群的皮膚水潤度開始顯著改善是在食用魚膠產(chǎn)品28 d后；皮膚粗糙的改善效果主要是在28 d的時(shí)候也開始出現(xiàn)顯著性，但是在42 d時(shí)更為顯著；皮膚干紋細(xì)紋和皺紋深度的改善是在42 d時(shí)效果更為顯著，說明如果需深度修復(fù)，改善皮膚干紋細(xì)紋皺紋效果的則需要延長食用周期到42 d時(shí)可顯著改善。

表5 受試者自評結(jié)果滿意度表 單位：%

2.5 不良反應(yīng)評估

在整個(gè)測試過程中，所有受試者均無不良反應(yīng)發(fā)生。

3 結(jié)論與討論

通過60名受試者周期性試驗(yàn)56 d后得出結(jié)論如下：

組內(nèi)相比，受試者的皮膚角質(zhì)層水分含量隨食用周期的延長不斷增加，在第56天時(shí)最顯著；受試者的真皮層皮膚厚度隨食用周期的延長不斷增加，在第28天開始顯著增加，直至第42天達(dá)到飽和；受試者的皮膚皺紋數(shù)量、長度、體積和面積隨食用周期的延長而不斷降低，第14天開始顯著降低，說明食用魚膠能有效改善皺紋狀態(tài)，需深度修復(fù)，食用時(shí)間越長越有效。

組間相比，與對照組相比，樣品組的皮膚角質(zhì)層水分含量顯著性提升15.37%，有保濕效果；皮膚皺紋數(shù)量顯著性降低36.32%，皮膚皺紋長度顯著性降低21.60%，皮膚皺紋面積顯著性降低16.22%，有抗皺效果。

研究結(jié)果證明富含膠原蛋白、彈性蛋白和透明質(zhì)酸的魚膠可以補(bǔ)充膠原蛋白，促進(jìn)膠原蛋白的合成，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的活性，有顯著保濕抗皺的美容效果，為魚膠及其產(chǎn)品的功效作用提供一定數(shù)據(jù)支持，但具體的機(jī)理和機(jī)制有待深入研究。