幽門螺桿菌毒力基因數字PCR 檢測體系的建立

范宏博 蔡永洪 李月玥 梁志堅 張力玲 馬婷婷 胡松青 胡良勇*

（1.華南理工大學食品科學與工程學院 廣東廣州 510630；2.廣州計量檢測技術研究院）

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幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）是國際癌癥研究機構（IARC）定級的I 類致癌物，被列為“12種最危險的耐藥細菌” 之一，Hp 感染是全世界人民共同面對的一個重要公共衛生問題。據統計，約90%的非賁門部胃癌與Hp 感染有關[1]。在我國，Hp感染率約為50%，且Hp 感染是導致胃癌的主要病因，根除Hp 可有效降低胃癌的發生風險[2]。

Hp 的致病性源于其分泌的多種毒力因子，其中毒力因子細胞毒素相關蛋白A（cagA）和細胞空泡毒素A（vacA）是Hp 存活和致病的最關鍵因素[3]。根據是否含cagA 基因進行分類，Hp 可分為cagA 陽性（I型）和cagA 陰性（II 型）菌株。I 型菌株可比II 型菌株引起更嚴重的胃粘膜損傷和炎癥，以及更高的致癌概率[4]。中國、日本和韓國等東亞國家分離的菌株90%以上含cagA 基因[5]。vacA 基因編碼的空泡毒素能引起細胞空泡化變性，調控細胞的自噬、炎癥和凋亡，還能通過誘導調節性T 細胞的分化使Hp 逃避免疫系統的清除[6]。

我國居民的Hp 感染率很高，但對于Hp 感染者是否都要接受治療仍存在爭議，這主要由于不恰當的治療會增加耐藥性[7]。而對感染者開展Hp cagA和vacA 基因檢測，測定是否含有毒力基因以及毒力基因含量高低，可作為治療的重要指導依據。目前，Hp分型和毒力基因含量檢測的方法主要為qPCR法，但qPCR 法無法檢測微量核酸DNA，不適于復雜樣品或低濃度感染檢驗[8-9]。此外，qPCR 法屬于半定量法，需要依賴標準曲線進行拷貝數定量分析，當不同實驗室間采用參考標準不一致時，qPCR 法檢測結果的可比性和互認性較差。……