EV-A71疫苗接種后手足口病流行及臨床特點

羅鵬燕 王華萍 趙仕勇 祁正紅

手足口病仍是我國發病率最高、死亡例數最多的丙類傳染病，嚴重影響兒童健康［1］。手足口病可由20多種腸道病毒引發，其中EV-71 是引起重癥患兒死亡的優勢病原［2-3］。2015 年由我國自主研制的EV-A71 滅活疫苗（EV-A71 疫苗）在國內上市，為防控EV-A71感染引起的手足口病提供新的方法［4］。杭州市2016 年7 月開始使用EV-A 71 疫苗［5］。本文回顧性分析2018-2021 年EV-A71 疫苗接種史的手足口病流行特點和臨床特征。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2018 年1 月至2021 年12 月杭州市兒童醫院688 例腸道病毒感染手足口病患兒的臨床資料，根據《手足口病診療指南2018 年版》的臨床分類標準［6］。有EV-A71 疫苗接種史手足口病共47 例。

1.2 方法（1）標本采集及資料收集：患兒入院當天由專職醫護人員用采集棉簽，適度用力拭抹咽后壁或兩側扁桃體部位，迅速將棉簽放入采集管中，置于-20℃冰箱保存。所有標本均在24 h 內完成實驗室檢測。同時收集相關的臨床資料。（2）熒光定量PCR 法檢測：病毒核酸提取：取咽拭子標本上清液200 μL 于1.5 mL離心管中，用熒光定量PCR 法檢測腸道病毒通用型核酸，當腸道病毒通用型核酸、EV-A71 病毒核酸檢測陽性，CA16 病毒核酸檢測陰性；且腸道病毒通用型核酸檢測的病毒載量和EV71病毒核酸檢測的病毒載量相當時，則可確定為單純的EV-A71 病毒感染。當腸道病毒通用型核酸檢測陽性。對實驗室確診為非EV-A71、CA16 的其他腸道病毒感染患兒，通過手足口病腸道病毒CA6 和CA10 核酸雙通道檢測。（3）血清抗體檢測方法 ：入院24 h 內采集患兒靜脈血2 mL，置無菌采血管中，靜脈血自凝后分離，ELISA 方法檢測患兒血清EVA71 和CA16 IgM 抗體。采用捕獲法ELISA，用抗人IgM（抗u 鏈）與樣品種的IgM 抗體結合，然后加入抗原試劑與酶標試劑進行測定。

1.3 統計學方法 采用SPSS19.0 統計軟件。計數資料用檢驗，計量資料用t檢驗，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 住院手足口病患兒流行特點 見表1-2。

表1 各類腸道病毒陽性患者性別分析［n（%）］

表2 各類腸道病毒陽性患者的發病年齡段分析［n（%）］

1.2 接種EV-A71 疫苗后手足口病臨床特點 688 例患兒中有疫苗接種史手足口病47 例，其中男28 例，女19 例；年齡8 個月～4 歲。＜1 歲5 例，1～3 歲40 例，3～4 歲1 例。接種1 次EV-A71 疫苗11 例，接種2 次EV-A71 疫苗36 例。臨床表現：47 例均發熱，口、咽、手、足和臀部出疹分別47 例、36 例、33 例、32 例；顏面、頸部 四肢、軀干、肘部等其他部位出皮疹25例。相關神經癥狀13 例（驚厥11 例，驚跳2 例），CVA6 7 例，CV-A16 5 例，其他型1 例。實驗輔助檢查：WBC＜4×109/L 1 例，4～15×109/L 35 例，＞15×109/L 11例，血 清PCT＜0.05μg/L 1 例，0.05～0.5 μg/L 33 例，＞0.5～2 μg/L 12 例，＞2 μg/L 1 例。血清CRP＜10 mg/L 26 例，10～30 mg/L 13 例，＞30 mg/L 8 例。8 例頭部CT均正常。6 例腦脊液檢查：細胞數升高1 例120×109/L，淋巴細胞（L）80%，其他正常；蛋白升高5 例，糖和氯化物均正常。病毒核酸和血清IgM 抗體檢測：疫苗后手足口病47 例，CV-A6 31 例，CV-A16 9 例，其他型7例。無EV-A71 感染。血清EV71 抗體IgM 陽性14 例，其中陽性3 例，弱陽性11 例，接種1 次EV-A71 疫苗6 例，接種2 次EV-A71 疫苗8 例，接種與發病時間最長12 個月。9 例CV-A16 感染者血清EV-A71 IgM陽性6 例（3 例陽性，3 例弱陽性）。血清CV-A16 抗體IgM 陽性5 例，血清EV-A71 和 CV-A16 IgM 抗體雙陽性3 例。

3 討論

EV-A71 從2008 年開始廣泛流行，手足口病的優勢病原可能每間隔4 年左右會出現較大變化，一般為2～3年，呈隔年高發，雙數年份流行增強的特點［7］，CVA6、CV-A10 和CA16 可能循環流行，引起重視。但重癥和死亡患兒病原以EV-71 為主［8］。近年來，EV-A71 相關的手足口病大幅度下降，得益于EV-A71 疫苗推廣，同時手足口病病原學發生較大的變化，近幾年CV-A6、CV-A10 等逐漸增多［9］。臨床研究顯示，疫苗具有良好的免疫原性和保護效力［10-11］。

本資料顯示，688 例患兒絕大多數為非EV-A71，僅7 例EV-A71，而有EV-A71 疫苗接種史后手足口病47 例，31 例CV-A6，9 例CV-A16，其他型7 例。浙江省手足口病輕癥患兒中，EV-A71 所占比例呈較為明顯的下降趨勢，其他腸道病毒呈上升趨勢［12］。表明EVA71 型滅活疫苗接種是非常有效的，另外與循環流行有一定關系。47 例EV-A71 疫苗接種史后手足口病患兒血清EV71 抗體IgM 陽性14 例，占21.2%，6 例接種1次EV-A71 疫苗，8 例接種2 次EV-A71 疫苗，接種與發病時間最長12 個月。EV71 不同基因型和亞型具有交叉保護作用，而對CV-A16 感染手足口病和其他腸道病毒感染手足口病無保護效力［13-14］。另外，9 例CV-A16感染者血清EV-A71 IgM 陽性6 例，EV-A71 和CA16基因水平同源性為77%，EV-A71 IgM 和CA16-IgM 假陽性率分別為31.1%和27.5%［15］，表明EV71-IgM 和CV-A16 IgM 會產生明顯交叉反應。另外，EV-A71 和CV-A16 感染產生EV-A71 IgM 和CV-A16 IgM 持續時間較長，因此，EV71-IgM 和CV-A16IgM 檢測陽性難以區別是近期曾經感染還是急性期感染，還應考慮疫苗因素，對可疑手足口病要綜合判斷還需結合流行病學、EV-A71疫苗史和腸道病毒核酸檢測。本資料顯示，EVA71 疫苗接種后EV-A71 相關的手足口病顯著降低，表明EV-A71疫苗對EV-A71引起的手足口病具有較強的保護性免疫，但對其他血清型無交叉保護作用［16］。

總之，有效預防EV-A71 感染需要全面接種EVA71 疫苗，特別是＜5 歲兒童，但對其他腸道病毒感染預防有限。