營養小肽對黃金鯽生長、血清生化和抗氧化能力的影響

胡 賀，陳 鵬，萬 兵，袁 化

（1.江蘇福潤德科技有限公司，江蘇南京 210036；2.南京農業大學，江蘇南京 210036；3.大連海洋大學，遼寧大連 116023）

黃金鯽（Carassius auratus）是我國傳統淡水鯉鯽魚類的雜交品種，具有較好的雜種優勢。生長速度快、適應性強、飼料轉化率高，是農業農村部向全國推廣養殖的淡水養殖品種。小肽是一類由蛋白質水解，易被生物體消化吸收，具有多種生物活性的小分子物質（SHEN，2019）。隨著動物營養學研究的不斷深入，人們認識到小肽能以完整形式被腸道吸收進入血液循環，用于機體蛋白質的合成，具有促進養殖動物生長，提高抗氧化能力和非特異性免疫功能的作用（敬庭森等，2021；馬良驍，2021；李晨晨等，2018）。本試驗以黃金鯽為試驗動物，探討營養小肽對養殖黃金鯽生長、血清生化和抗氧化能力的影響，以期為完善營養小肽作為飼料添加劑的理論研究提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 基礎飼料 基礎飼料為混養魚配合飼料（鹽城海大生物飼料有限公司），產品符合《魚用配合飼料》標準（Q/320924 YCHO 001-2021）。產品成分分析執行標準為《飼料檢測結果判定的允許誤差》。檢測指標含量：粗蛋白質≥28.0%，粗脂肪≥2.5%，賴氨酸≥1.35%，水分≤12.2%，粗纖維≤11.5%，粗灰分≤15.0%，總磷≥0.7%。

1.1.2 營養小肽 試驗用營養小肽由江蘇福潤德科技有限公司提供，商品名為天樂泰。部分檢測指標含量：粗纖維0.9%，粗脂肪1.5%，粗蛋白質4.3%，酸溶蛋白（占總蛋白）33.5%，水蘇糖和棉子糖均未檢出，活菌數乳桿菌22.6×107CFU/g，酵母1.02×107CFU/g，芽孢桿菌105CFU/g，pH=3.5。

1.1.3 檢測試劑 血清生化檢測儀器和試劑為羅氏cobas C311全自動生化分析儀。抗氧化能力檢測試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 飼養管理 試驗在江蘇省東臺市弶港鎮養殖區進行，試驗A1和A2組為2個平行組，養殖面積為53360 m2和56695 m2。對照組養殖面積57362 m2。放養黃金鯽魚種平均質量為50 g/尾，放養量2000尾/667 m2。魚種放養7 d后開始投喂飼料，對照組飼喂基礎飼料，試驗組飼喂添加2.0%天樂泰的飼料。

每天投餌前用自來水（靜置24 h）將天樂泰充分溶解，在基礎飼料中均勻噴涂，待表面干燥后投喂。投餌量按魚體重2.0%～3.0%計算。每天投餌4次，投喂時間為7：00、10：00、13：30和16：30。養殖期間水溫為26～33℃，溶氧為3.5～8.3 mg/L，pH為8.5～8.8。

1.2.2 生長評估 飼養黃金鯽52、128 d，試驗組和對照組隨機抽樣檢測各10尾，進行體質量和體長檢測。通過增重率（WGR）和特定生長率（SGR）進行生長情況評估。

WGR/%=[（終末體重—初始體重）／初始體重]×100；

SGR/%=[（ln平均末體重-ln平均初體重）／養殖天數]×100。

1.2.3 血清制備 投餌養殖黃金鯽52、128 d時，試驗組和對照組隨機取5尾，一次性注射器尾靜脈取血（無抗凝劑），4℃靜置24 h后2500 r/min，-5℃離心5 min，取上層血清，-20℃保存，備用。

1.2.4 血清生化檢測 對養殖128 d黃金鯽進行血清總蛋白（TP2）、白蛋白（ALB2）和脂肪酶（LIPC）檢測。

1.2.5 血清抗氧化性能檢測 對養殖52 d和128 d黃金鯽進行血清總超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、氧化氫酶（CAT）活力、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活力、總抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量檢測。

1.2.6 數據統計與分析 試驗數據用Excel軟件進行整理，采用GraphPad prism 8.0軟件進行單因素方差分析（one-way ANOVA）和t檢驗（T-test），結果以“平均值±標準差”表示。P＜0.01表示差異極顯著，0.01＜P＜0.05表示差異顯著，P＞0.05表示無顯著差異。

2 結果

2.1 對生長性能的影響 由表1可知，養殖52 d和128 d，試驗組黃金鯽體質量、體長、WGR和SGR檢測結果均大于對照組，且養殖52 d，試驗組間、試驗組與對照組間均無顯著差異（P＞0.05）。養殖128 d，試驗組間無顯著差異（P＞0.05），試驗組與對照組顯著差異（0.01＜P＜0.05）。

表1 營養小肽對黃金鯽生長性能的影響

2.2 對血清生化指標的影響 由表2可知，投喂營養小肽養殖128 d的黃金鯽，試驗組血清總蛋白、白蛋白和脂肪酶均高于對照組，A1組血清總蛋白和白蛋白與對照組差異極顯著（P＜0.01），A2組與對照組相比無顯著差異（P＞0.05），試驗組間無顯著差異（P＞0.05）。試驗組血清脂肪酶與對照組相比無顯著差異，試驗組間也無顯著差異（P＞0.05）。

表2 營養小肽對黃金鯽血液生化指標的影響

2.3 對血清抗氧化指標的影響

2.3.1 對血清T-SOD活力的影響 由表3可知，養殖52 d，對照組血清T-SOD活性高于試驗組。飼養126 d，試驗組T-SOD活性均高于對照組。隨著投喂時間的增加，A1組提高了14.94%，A2組提高了1.50%，對照組降低了13.70%，但均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 營養小肽對黃金鯽血清抗氧化指標的影響

2.3.2 對血清CAT活力的影響 由表3可知，養殖52 d和126 d，對照組血清CAT活力均高于試驗組隨著投喂時間的增加，對照組降低了11.86%，試驗組（A1和A2）分別降低了8.77%和3.43%，但均無顯著差異（P＞0.05）。

2.3.3 對血清GSH-PX活力的影響 由表3可知，養殖52 d，對照組血清GSH-PX活力略高于試驗組。飼養126 d，試驗組GSH-PX活力均高于對照組。隨著投喂時間的增加，對照組提高25.33%，試驗組（A1和A2）分別提高33.94%和30.75%，但均無顯著差異（P＞0.05）。

2.3.4 對血清T-AOC能力的影響 養殖52 d，對照組血清T-AOC能力高于試驗組。飼養126 d，試驗組均高于對照組（表1）。隨著投喂時間的增加，對照組降低了45.71%，試驗組（A1和A2）分別提高了12.5%和4.35%。單因素方差分析和t檢驗顯示，均無顯著差異（P＞0.05）。

2.3.5 對血清MDA含量的影響 由表3可知，飼養52 d，A1組血清MDA含量大于對照組，A2組小于對照組。飼養126 d，試驗組均大于對照組。隨著投喂時間的增加，對照組提高80.85%，試驗組（A1和A2）分別提高了45.19%和56.65%，但均無顯著差異（P＞0.05）。

2.3.6 對血清NO含量的影響 由表3可知，飼養52 d和126 d，對照組血清NO含量均高于試驗組。隨著投喂時間的增加，對照組降低了11.25%，試驗組（A1和A2）分別提高了126.38%和38.91%，且試驗組（A1和A2）與對照組均有極顯著差異（P＜0.01），試驗組間無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 營養小肽對黃金鯽生長的影響 營養小肽具有提高養殖動物餌料轉化率，促進養殖動物生長和提高生產性能等作用（馬良驍，2021；甘暉，2005）。用營養小肽飼養黃金鯽，試驗組體質量、體長、增重率和特定生長率均高于對照組。在飼料中添加2%營養小肽對黃金鯽生長有一定的促進作用。

3.2 營養小肽對黃金鯽血清生化的影響 魚類的血液與營養狀況密切相關，不僅反映魚類的生理代謝狀態，還表現出營養對機體代謝變化的作用機制。血清總蛋白是反映動物營養水平、對蛋白質的消化程度以及健康狀況的指標（黃林等，2009；尾崎久雄，1982）。檢測數據分析，血清總蛋白含量試驗組為（28.26±1.37）g/L和（25.54±3.41）g/L，對照組（25.20±0.92）g/L，均低硬骨魚類血清總蛋白含量30～50 g/L范圍（尾崎久雄，1982）。由于黃金鯽生長速度高于普通鯽2～3倍，基礎飼料28%的粗蛋白質和2%的營養小肽添加量，沒有滿足35%飼料蛋白的需求量（程鎮燕等，2013）。天樂泰作為飼料添加劑，對不同的基礎飼料和養殖魚類的添加量還有待深入研究。脂肪酶的活性與餌料中的脂肪含量呈正相關（李成等，2018；孫翰昌等，2010；李芹等，2009）。試驗組血清脂肪酶略高于與對照組，多重比較無顯著差異（P＞0.05），反映了黃金鯽的脂質代謝狀況良好，處于健康水平。

3.2 營養小肽對黃金鯽抗氧化性能的影響 養殖動物機體的抗氧化能力與健康程度存在密切聯系。大量研究表明，在飼料中添加一定量的營養小肽具有促進養殖水生動物生長，提高抗氧化能力和非特異性免疫的功能（李文成等，2021；Ighodaro，2018；林浩然，1999）。血清T-SOD、CAT和GSH-Px是主要的內源性抗氧化酶，共同作用來保護機體免受氧化應激產生的損傷，對機體的氧化與抗氧化平衡具有重要作用（Halliwell，2012）。

飼料中添加營養小肽，隨著養殖時間的增加，試驗組血清T-SOD和GSH-PX活性提高，反映出機體清除自由基能力和細胞防御能力增強。CAT活力降低，顯示試驗組抗氧化酶活性有一定提高，提高了機體的抗氧化能力。試驗結果與何吉祥等（2012）的研究結果一致。

T-AOC是衡量機體抗氧化功能的綜合性指標，反映了酶促和非酶促兩個防御體系協同防護魚體的抗氧化能力。隨著投喂營養小肽時間的增加，試驗組分別提高了12.5%和4.35%（P＞0.05），對照組降低了45.71%（P＞0.05）。表現出黃金鯽機體抗氧化能力的增強，而且T-AOC能力與細胞抗氧化能力正相關，與機體脂質過氧化負相關。

MDA是體內自由基作用于脂肪發生過氧化反應的氧化終產物，其含量反映了機體細胞中氧自由基含量及受自由基攻擊的嚴重程度（林浩然，1999）。隨著投喂營養小肽時間的增加，試驗組分別提高了45.19%和56.65%（P＞0.05），對照組提高了80.85%（P＞0.05）。MDA含量的升高表明黃金鯽體內產生了過多的氧自由基，生物膜系統受到氧自由基的攻擊是否產生脂質過氧化還有待進一步擴大樣本檢測。

NO具有高度活躍的屬性，能與多種自由基和金屬離子發生反應，在免疫調節等方面具有十分重要的生物學作用。飼養52 d時，對照組高于試驗組，飼養126 d時，試驗組高于對照組（P＜0.01）。對照組降低了11.25%，試驗組分別提高了126.38%和38.91%。營養小肽中富含乳酸桿菌和芽孢桿菌，是影響試驗組血清NO含量顯著升高的主要原因，也是NO對脂質過氧化和組織器官保護作用的表現。朱宏友（2006）報道，NO可以增強水產動物自身抗病能力，減少抗菌藥物的使用。但NO也可影響肝細胞蛋白質合成和能量代謝（鐘慈聲等，1977）。因此，NO對水產動物生理生化及代謝特征影響的研究具有重要的理論研究價值和應用前景。

營養活性小肽進入機體后主要發揮營養功能和生理調節功能。不同的小肽制品其生產工藝和營養成分不同，同時添加量的作用效果與養殖動物對小肽的最適量有關。作為一種新型的綠色營養添加劑應用于水生動物養殖，還需要進一步探討營養小肽的添加劑量、添加周期和添加方式等，使其在魚類不同的生長階段和生理狀態下充分發揮作用。