張明輝,楊 松,郭紅偉,張光輝*
(1.河南農業大學動物醫學院,河南鄭州 450000;2.駐馬店華中正大有限公司,河南駐馬店 463000)
丁酸鈉促進動物腸道益生菌的增殖、增強動物免疫力、調節脂質代謝、提高動物生產性能(侯冬強等,2023;Li等,2022),牛至油具有抗氧化、抑菌、調節免疫力、促生長等作用(韓飛等,2020),兩者聯用對防治動物體內致病菌具有協同增效作用(張桂枝等,2022)。本試驗研究丁酸鈉與牛至油聯合使用對斷奶仔豬生產性能、腹瀉率、腸道微生物菌群和腸道結構的影響,旨在為無抗養殖模式下研發新型綠色飼料添加劑提供應用依據和參考。
1.1 試驗設計與試驗動物 試驗將200頭平均日齡(28±2)d、平均體重(8.03±0.5)kg品種相同、胎次相近的斷奶“杜×長×大”三元雜交仔豬(公豬去勢,公母比例1∶1)隨機分為對照A組(基礎日糧)、對照B組(抗生素組,基礎日糧1000 kg+15%金霉素500 g+桿菌肽鋅250 g)、試驗C組(基礎日糧1000 kg+2 kg丁酸鈉)、試驗D組(基礎日糧1000 kg+1 kg牛至油)、試驗E組(基礎日糧1000 kg+1 kg丁酸鈉+0.5 kg牛至油)5個處理組,每組4個重復,每個重復10頭仔豬,每個重復單圈飼養。
1.2 日糧配制 基礎日糧按《中華人民共和國肥育豬飼養標準(2004)》標準配制,具體見表1。

表1 日糧組成及營養水平(風干基礎)
1.3 試驗藥物與儀器 藥物:金霉素、桿菌肽鋅、丁酸鈉、牛至油。儀器:乳酸桿菌培養基、伊紅美藍培養基和甲醛均購自北京奧博星生物技術有限責任公司,淀粉酶、蛋白酶試劑盒(南京建成生物工程研究所),分析天平(德國賽多利斯公司),BXAW-TS-L厭氧培養箱(上海博迅醫療生物儀器股份有限公司),CKX53熒光生物顯微鏡(Olympus公司)。
1.4 飼養管理 試驗預飼期7 d,正試期28 d,單圈飼養,自由采食和飲水。免疫程序按豬場常規程序進行。每日于上午9:00和下午17:00各飼喂1次,并觀察試驗各組豬的采食、飲水及健康狀況,記錄腹瀉頭數。
1.5 測定指標
1.5.1 生長性能 平均日增重:各處理組間初始體重差異不顯著(P>0.05),試驗當日8:00和結束后當日8:00稱重和記錄試驗各組仔豬體重,計算各組仔豬平均日增重,具體計算公式如下:
平均日增重/g=(試驗各組末重-試驗各組初重)/28。
平均日采食量:每天上午8:00稱重,并記錄試驗各組仔豬料槽內剩余飼料量和采食量,計算試驗各組平均日采食量,具體計算公式如下:
平均日采食量/g=總采食量/(28×試驗豬頭數);
料重比=總飼料消耗量/(末重-初重)×100。
腹瀉率:每天觀察試驗各組仔豬肛門的清潔程度,肛門處若存在水樣糞便污染,判定為仔豬腹瀉,并記錄腹瀉仔豬頭數。
腹瀉率/%=每天記錄的腹瀉頭數/總頭數/28×100。
死淘率:仔豬斷奶小腸絨毛嚴重萎縮變短甚至脫落,吸收能力逐漸下降,造成腸道中的飼料不經消化直接排出體外,引發腹瀉造成死亡。
死淘率/%=死亡頭數/總頭數×100
1.5.2 組織取樣 試驗結束稱重后,試驗各組隨機選擇1頭仔豬進行屠宰。屠宰前前腔靜脈抽取3 mL血樣,肝素鈉抗凝劑抗凝離心、分離血漿備用。屠宰過程中嚴格按照無菌要求剖開腹腔,分離胃、十二指腸、空腸、回腸和盲腸,采集空腸內容物2 g,冷凍保存。
截取7 cm空腸中段樣品置于10%甲醛溶液中固定8~24 h待檢。
1.5.3 腸道健康指標 將1 g空腸內容物放入三角燒瓶中,加入99 mL滅菌生理鹽水振蕩混勻,按照10倍梯度遞進稀釋,將稀釋液接種在乳酸桿菌和伊紅美藍培養基平板上,每個樣品3個重復,分別在37℃厭氧培養箱中培養48 h和24 h菌落計數。
采集試驗各組仔豬1 g空腸內容物采用試劑盒測定淀粉酶、蛋白酶活性(趙偉鑫等,2021)。
1.5.4 空腸組織結構 空腸中段樣品在10%甲醛溶液中固定8~24 h后切片、染色,中性樹膠封存,在熒光生物顯微鏡下觀察,測量絨毛高度、隱窩深度。
1.6 數據統計與分析 試驗數據采用SPSS 24.0軟件進行方差分析,結果以“平均值±標準誤”表示,P<0.05表示組間差異顯著,P<0.01表示組間差異極顯著。
2.1 對斷奶仔豬生長性能的影響 由表2可知,與對照A組相比,試驗B、C、D、E組斷奶仔豬試驗末體重分別顯著增加6.61%、5.10%、5.15%、5.54%(P<0.05),各組之間差異不顯著(P>0.05);與對照A組相比,試驗B、C、D、E組斷奶仔豬日增重和日采食量分別顯著增加10.49%、8.27%、8.37%、8.96%和3.63%、4.25%、2.99%、2.20%(P<0.05),且各組之間差異不顯著(P>0.05);試驗各組料重比、腹瀉率、死淘率差異不顯著(P>0.05)。由此表明,斷奶仔豬聯合牛至油+丁酸鈉使用,其生長性能與抗生素組無差異。

表2 對斷奶仔豬生長性能的影響
2.2 對斷奶仔豬腸道健康的影響 由表3可知,腸道菌落總數E組比A、B、C、D組分別減少2.24%、3.48%、2.24%、3.14%,但差異不顯著(P>0.05),其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。C、D、E組乳酸菌比A、B組分別顯著增加7.68%、7.95%、7.95%和7.82%、8.09%、8.09%(P<0.05),三組之間差異不顯著(P>0.05);B組比A組減少0.13%,但差異不顯著(P>0.05)。B、C、D、E組大腸桿菌比A組顯著減少9.56%、9.39%、8.90%、9.39%(P<0.05),各組之間差異不顯著(P>0.05)。由此表明,丁酸鈉和牛至油可改善腸道pH,兩者聯用更有益于乳酸菌繁殖,從而維護仔豬腸道健康。

表3 不同日糧對仔豬糞樣中微生物菌群及酶活的影響 lg CFU/g
試驗C、D、E組腸道內淀粉酶比A組顯著增加106.14%、99.13%、124.55%(P<0.05),比B組顯著增加40.60%、35.70%、52.%(P<0.05),各組之間差異不顯著(P>0.05)。C、E組蛋白酶比A、B組顯著增加7.27%、16.81%和9.21%、16.81%(P<0.05);E組比C組增加0.94%(P>0.05),比D組顯著增加8.89%(P<0.05),由此表明,丁酸鈉和牛至油均顯著提高兩種消化酶活性,兩者聯用更有利于促進機體對營養物質的消化吸收,從而提高其生長性能。
2.3 對斷奶仔豬空腸組織結構的影響 由表4可知,C、D、E組絨毛高度比A組顯著增加4.56%、2.45%、3.46%(P<0.05),比B組顯著增加4.29%、2.19%、3.19%(P<0.05);D、E組比C組顯著減少2.06%、1.07%(P<0.05);E組比D組增加0.98%,差異不顯著(P>0.05)。D、E組隱窩深度比B組顯著減少0.55%、0.82%(P<0.05),其他各組無顯著差異(P>0.05)。絨毛高度/隱窩深度值各組無顯著差異(P>0.05),在使用牛至油與丁酸鈉后比值有升高趨勢。由此說明,牛至油+丁酸鈉具有改善腸道組織形態的功能,效果比抗生素更佳。

表4 對仔豬空腸組織結構的影響
在斷奶仔豬基礎日糧中添加丁酸鈉、牛至油和兩者聯合使用均可顯著提高日采食量、日增重和末體重,不同程度地降低料重比、腹瀉率和死淘率,能更好地提高仔豬生長性能,減少因疾病造成的仔豬死亡。在斷奶仔豬基礎日糧中添加丁酸鈉、牛至油和兩者聯合使用,與添加金霉素和桿菌肽鋅相比較,無論在提高日采食量、日增重和末體重上還是在料重比、腹瀉率和死淘率上均無顯著差異,同樣具有顯著的經濟效益。
與飼喂基礎日糧的仔豬相比,在斷奶仔豬基礎日糧中添加丁酸鈉、牛至油和兩者聯合使用,腸道大腸桿菌數量和腸道內菌落總數明顯減少,可有效降低腸道菌群感染的機會,提高豬群健康水平。顯著增加乳酸菌數量,提高有益菌數量,有利于提高仔豬腸道健康。促進乳酸菌的生存和繁殖,創造健康的腸道內環境,通過調節腸道菌群平衡,維護仔豬腸道內環境(Wu等,2018),從而提高仔豬抵抗力。丁酸鈉、牛至油和兩者聯合使用與添加抗生素金霉素和桿菌肽鋅的效果一樣,仔豬腸道內的大腸桿菌數量和腸道內菌落總數變化不大,增加了一定量的乳酸菌,顯著增加淀粉酶和蛋白酶數量,說明使用丁酸鈉、牛至油和兩者聯合比抗生素的效能更好,可完全替代抗生素,保障無公害食品的安全。
與正常飼喂基礎日糧、添加抗生素的試驗組相比,在斷奶仔豬日糧中添加丁酸鈉、牛至油和兩者聯合使用后,仔豬腸道中的小腸絨毛高度增加,隱窩深度降低,絨毛高度與隱窩深度的比值提高(許璐等,2020;張皓然等,2018),有利于保護腸道黏膜屏障,維持仔豬腸道內微生態的穩定,有利于食物在小腸內的消化、吸收和利用,提高食物的消化利用率和仔豬的生產性能。
在基礎日糧中添加丁酸鈉、牛至油及其聯合使用可調節腸道菌群平衡,改善腸道健康狀況,顯著提高斷奶仔豬的生長性能。