嚴 麗,管湘玉
南京中醫藥大學附屬張家港醫院檢驗科,江蘇蘇州 215600
血流感染是一種與高發病率和病死率相關的嚴重疾病,醫院獲得性血流感染病死率為26.8%,普通住院患者血流感染的病死率為20.7%[1],社區獲得性感染的年發病率較高[2-4]。血流感染易誘發患者感染性休克,嚴重者可出現多重器官衰竭、彌散性血管內凝血,甚至死亡,早期及時采用抗菌藥物治療可降低病死率[5-8]。若能從血液中分離出致病菌,則可更直觀地根據藥敏試驗情況指導臨床用藥。因此,定期對醫院血流感染病原菌構成及耐藥性進行分析,有助于臨床早期診斷和合理治療,對降低病死率、合理選擇抗菌藥物具有積極意義。
1.1一般資料 收集本院2016-2020年門診及住院患者的血培養標本共5 540份,其來源科室主要為肺病科697份(12.6%),脾胃病科686份(12.4%),新生兒科547份(9.9%),腎病科404份(7.3%),糖尿病風濕科393份(7.1%),兒科353份(6.4%),外科330份(6.0%),重癥監護病房(ICU)284份(5.1%),急診室279份(5.0%),產科265份(4.8%),腫瘤科264份(4.8%),血液病科242份(4.4%)。
1.2儀器與試劑 Bact/Alert 3D 120全自動血培養儀及配套血培養瓶購自法國生物梅里埃公司;VITEK-2 Compact全自動細菌鑒定及藥敏分析系統及配套鑒定卡和藥敏卡均購自法國生物梅里埃公司;哥倫比亞血瓊脂平板、麥康凱平板、巧克力平板均購自鄭州安圖生物工程股份有限公司。
1.3質控菌株 金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)、大腸埃希菌(ATCC 25922)、銅綠假單胞菌(ATCC 27853)和肺炎鏈球菌(ATCC 49619),質控菌株均購自美國菌株保藏中心。
1.4方法 按照最新版《臨床微生物室血培養操作規范》進行血培養標本的采集和培養,分離出病原菌采用VITEK2 Compact全自動分析儀進行鑒定及藥敏試驗,藥敏試驗結果判定參考美國臨床和實驗室標準協會最新判讀標準M100。
2.1血培養陽性率分析 2016-2020年血培養標本共分離出病原菌462株,剔除同一患者分離的重復菌株,陽性率為8.3%(462/5 540),462株病原菌中革蘭陰性菌占63.2%(292/462),革蘭陽性菌占34.8%(161/462),真菌占1.9%(9/462)。
2.2病原菌分類 462株病原菌中革蘭陰性菌292株,其構成分別為大腸埃希菌165株(35.7%),肺炎克雷伯菌56株(12.1%),陰溝腸桿菌14株(3.0%),銅綠假單胞菌12株(2.6%),產氣腸桿菌6株(1.3%),嗜麥芽寡養單胞菌5株(1.1%),洋蔥伯克霍爾德菌4株(0.9%),產酸克雷伯菌4株(0.9%),鮑曼不動桿菌3株(0.6%),其他23株(5.0%);革蘭陽性菌161株,其構成分別為凝固酶陰性葡萄球菌62株(13.4%),金黃色葡萄球菌26株(5.6%),屎腸球菌13株(2.8%),糞腸球菌9株(1.9%),肺炎鏈球菌8株(1.7%),其他43株(9.3%);真菌9株,其構成比為1.9%。
2.3病原菌科室分布 血培養排前3位的科室分別為脾胃病科、血液病科、ICU,構成比分別為20.1%、11.5%、11.3%,其次依次為腎病科(10.8%)、糖尿病風濕科(8.9%)、外科(7.6%)、肺病科(7.1%)、新生兒科(3.9%)、兒科(3.5%)、血管介入科(3.0%),其他科室構成比為(12.3%)。
2.4藥敏試驗
2.4.1主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥性 大腸埃希菌耐藥率排前3位的分別是氨芐西林(79.4%)、氨芐西林/舒巴坦(65.5%)、復方磺胺甲噁唑(54.5%);肺炎克雷伯菌耐藥率排前3位的分別是氨芐西林(100.0%)、氨芐西林/舒巴坦(28.6%)、頭孢唑啉(23.2%)。革蘭陰性菌對阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、亞胺培南、厄他培南的耐藥率均低于10.0%。見表1。

表1 主要革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥情況[n(%)]
2.4.2主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥性 金黃色葡萄球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率占34.6%(9/26),凝固酶陰性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)檢出率占74.2%(46/62)。MRSA耐藥率排前4位的分別是青霉素(100.0%)、苯唑西林(100.0%)、紅霉素(77.8%)、氯潔霉素(77.8%);MRCNS耐藥率排前5位的分別是青霉素(100.0%)、苯唑西林(100.0%)、紅霉素(78.3%)、氯潔霉素(60.9%)、左氧氟沙星(60.9%)。葡萄球菌屬對萬古霉素、替考拉寧、奎奴普丁/達福普汀、替加環素、利奈唑胺均保持敏感,未檢出耐藥菌株。見表2。糞腸球菌和屎腸球菌對萬古霉素、替考拉寧和利奈唑胺敏感率均為100.0%。

表2 主要革蘭陽性菌對常用抗菌藥物的耐藥情況[n(%)]
本研究中血培養陽性率低于國內多家醫院[9-11],可能與臨床送檢血培養量、送檢科室及中醫醫院收治患者多為慢性病有關。對病原菌分析發現,革蘭陰性菌構成比明顯高于革蘭陽性菌,且以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主,與孟敬弼等[12]和王娜等[13]研究結論一致。也與送檢科室特點相符,脾胃病科血培養構成比明顯高于其他科室,其原因可能為該病區患者多有胃腸鏡和消化道手術治療史等侵入性操作,腸道中細菌易通過破損黏膜進入血液循環,經腸系膜靜脈回流引起血流感染,也可能與長期消化系統疾病史引起腸道中菌群異位有關。血液病科分離的多為腸桿菌科細菌,則提示該病區患者由于多使用免疫抑制劑或自身免疫力低下,條件致病菌易侵入機體誘發感染,更應該向患者宣教環境消毒及個人衛生,有條件的可以對患者預先進行直腸拭子細菌培養,提早篩選出耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌,進行早期干預治療,以降低耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌血流感染發生率[14-16]。ICU中凝固酶陰性葡萄球菌分離率高,可能與患者存在插管、留置導管等一系列侵入性操作,增加了皮膚正常菌群進入血液循環的可能性有關,因此,ICU醫護人員更應該注意手衛生及無菌操作。
本研究藥敏試驗結果顯示,葡萄球菌屬對大環內酯類和青霉素類抗菌藥物耐藥率均較高,未發現利奈唑胺和萬古霉素耐藥菌株。近年來,MRSA作為最常見的多重耐藥菌,其感染會提高病死率及延長住院時間,是醫院感染防控的重點。本院近年來MRSA占比較高,可能與中醫醫院慢性病患者居多、既往使用過廣譜抗菌藥物有關,臨床需警惕抗菌藥物濫用。本院腸桿菌科細菌對碳青霉烯類藥物耐藥率低于10.0%。耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌感染流行作為威脅全球健康的問題不容小覷[17],易產生產超廣譜β-內酰胺酶,對β-內酰胺類抗菌藥物耐藥。本研究結果顯示,大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對亞胺培南的耐藥率分別為2.4%、8.9%,較鐘一梅等[18]和丘丹萍等[19]研究結果稍高,較孫靜靜等[20]研究結果低。我國目前推薦血培養臨床三級報告制度,臨床醫生也可參考微生物實驗室提供的病原菌種類和藥敏試驗結果,合理使用抗菌藥物[21]。
血流感染是發生在臨床的一種嚴重的感染性疾病,病情嚴重時可造成膿毒血癥、休克、多器官衰竭等,病死率較高。血培養作為臨床微生物學實驗室最重要的檢查之一,是診斷血流感染、菌血癥的金標準,可為臨床醫生對感染的診斷和治療提供依據。
綜上所述,本院2016-2020年血培養分離的病原菌種類多樣,主要病原菌對臨床常用抗菌藥物的耐藥率較高,需進一步提高對血流感染的重視。其次,可綜合降鈣素原和C反應蛋白及實驗檢查等指征對血流感染進行早期預測[22-25]。檢驗工作人員應定期對醫院血流感染病原菌的構成及耐藥性進行分析,臨床醫生應重視血流感染的發生,并提高有效的血培養送檢率。