血清TK1、DKK1的表達與晚期非小細胞肺癌患者預后的關系

吳福紅,詹其林,周 敏

1.上海市第六人民醫院金山分院血液腫瘤科,上海 201599;2.上海市公共衛生臨床中心血液腫瘤科,上海 201588;3.上海市第六人民醫院金山分院呼吸科,上海 201599

非小細胞肺癌(NSCLC)惡性程度高,早期缺乏典型癥狀,多數患者確診時已錯失最佳手術時機,故化療成為主要治療手段[1-2]。化療聯合免疫治療是晚期肺癌比較常用的治療方法,相比單純化療能夠提高腫瘤臨床控制率,延長患者生存時間,但其預后仍較差[3-4]。目前,NSCLC預后預測指標有血清腫瘤標志物、腫瘤病理參數,但因惡性腫瘤生物學行為復雜,血清腫瘤標志物應用受限,而各病理參數需要實施有創檢查才能明確,應用也受限。胸苷激酶1(TK1)是一種磷酸轉移酶,是細胞增殖的重要標志物,其活性與腫瘤細胞增殖有關[5]。分泌型蛋白Dikkopf-1(DKK1)可通過相關信號通路促進腫瘤細胞生長及侵犯,其在肝癌、肺癌等多種惡性腫瘤中呈高表達,與腫瘤預后有一定關系[6]。基于以上背景,本研究將分析血清TK1、DKK1與NSCLC患者治療預后的關系,希望為改善晚期NSCLC患者預后提供參考建議。現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 納入2020年1月至2021年6月上海市第六人民醫院金山分院收治的91例晚期NSCLC化療患者為研究對象,其中男53例,女38例;年齡51～72歲,平均(63.66±2.16)歲;體質量指數17～26 kg/m2,平均(22.36±1.46)kg/m2;收縮壓93～158 mmHg,平均(120.49±7.52)mmHg;舒張壓65～101 mmHg,平均(78.93±6.58)mmHg;入院時癌胚抗原(CEA)水平2.7～10.1 ng/mL,平均(3.71±1.02)ng/mL;疾病類型:鱗癌71例,腺癌20例;合并基礎疾病:高血壓16例,糖尿病10例。本研究采用前瞻性隊列研究方法,研究的實施獲得上海市第六人民醫院金山分院倫理委員會批準[倫審2020第(12)號]。

1.2入選標準

1.2.1納入標準 (1)符合《中華醫學會肺癌臨床診療指南(2019版)》[7]中NSCLC診斷標準;(2)年齡>40歲;(3)腫瘤TNM分期Ⅳ期[8];(4)接受免疫治療聯合含鉑兩藥化療,預計生存期>3個月;(5)首次接受本研究中治療方案;(6)知曉研究內容,簽訂知情同意書;(7)接受基因狀態檢測,基因檢測第2代測序結果顯示EGFR、ALK、ERBB2、BRAF、ROS1、RET、MET、KRAS均未見突變。

1.2.2排除標準 (1)繼發性肺部腫瘤;(2)合并其他惡性腫瘤;(3)合并重要臟器病變;(4)凝血功能異常;(5)合并全身感染性疾病或免疫系統異常。

1.2.3剔除標準 (1)治療期間全因死亡;(2)任何原因沒有完成全部療程;(3)嚴重化療毒性需要停止用藥;(4)中途退出研究。

1.3方法

1.3.1預后評估 參照文獻[9]評估患者預后,病灶完全消失,且持續1個月以上無新病灶出現為完全緩解;腫瘤最大直徑與最大垂直直徑之和縮小≥50%,且至少維持1個月為部分緩解;腫瘤最長徑之和縮小<50%,或增加<25%,且持續1個月以上為病變穩定;腫瘤最長徑之和增加≥25%,或出現新病灶為病變進展。將完全緩解、部分緩解患者作為預后良好組,將病變穩定、進展患者作為預后不良組。

1.3.2實驗室指標檢測方法 采集患者入院當天空腹靜脈血3 mL,離心(轉速3 000 r/min)15 min(安徽嘉文公司醫用離心機,JW-1024),分離血清,放于-20 ℃環境下待檢;采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清TK1、CEA、DKK1水平(北京福瑞生物工程公司酶聯免疫吸附試劑盒,S10910071)。

2 結 果

2.1晚期NSCLC化療患者短期預后情況 91例晚期NSCLC化療患者評估結果顯示,部分緩解率為63.74%(58/91),病變穩定率為30.77%(28/91),病變進展率為5.49%(5/91),無完全緩解病例;預后良好組有58例(63.74%),預后不良組有33例(36.26%)。

2.2兩組患者基線資料比較 預后不良組血清CEA、TK1、DKK1水平均高于預后良好組(P<0.05);兩組性別、疾病類型、分化程度、KPS評分、合并基礎疾病、年齡比較差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.3晚期NSCLC患者治療預后的多元Logistic回歸分析結果 將晚期NSCLC患者治療預后情況作為狀態變量(預后不良=1,預后良好=0),將血清CEA、TK1、DKK1作為自變量,經多元Logistic回歸分析,結果顯示,血清TK1、DKK1高水平為晚期NSCLC患者治療預后不良的影響因素(OR>1,P<0.05)。見表2。

2.4血清TK1、DKK1預測晚期NSCLC患者治療預后的價值分析 使用并聯診斷試驗的方法,繪制ROC曲線圖。結果顯示,當血清TK1、DKK1的最佳截斷值分別取6.840 pmol/L、5.410 ng/mL時,提示晚期NSCLC患者預后不良高風險,且血清TK1、DKK1單獨及聯合預測患者預后不良的AUC均>0.700,具有一定預測價值,其中聯合預測價值最高。見表3、圖1。

表1 兩組患者基線資料比較[n(%)或

表2 晚期NSCLC患者治療預后的多元Logistic回歸分析結果

表3 血清TK1、DKK1預測晚期NSCLC患者治療預后的價值分析

圖1 血清TK1、DKK1單獨及聯合預測晚期NSCLC化療患者臨床預后ROC曲線

3 討 論

有研究報道,NSCLC的5年生存率僅為10%～12%,多數患者在明確診斷時已經發展為晚期,需接受化療為主的治療方案以延長生命[10-11]。目前,培美曲塞+順鉑及吉西他濱+順鉑化療方案是治療NSCLC的主要化療方案,并且聯合免疫治療能強化機體抗腫瘤能力,從而提高疾病控制率,在一定程度上延長患者生存時間,但仍有部分患者化療效果不佳,預后較差[12]。本研究91例經化療的晚期NSCLC患者中,33例患者預后不良,占36.26%,可見,晚期NSCLC患者治療預后仍有待改善,尋求可早期預測NSCLC患者治療預后的指標十分必要。

一直以來,血清腫瘤標志物被視為評估腫瘤復發及轉移的重要指標,可反映腫瘤發生及發展狀況,血清腫瘤標志物水平的異常升高與NSCLC患者預后存在一定聯系[13]。CEA存在于正常組織及腫瘤異常組織中,是重要的腫瘤標志物,其血清水平異常升高多見于胃癌、結腸癌及肝癌等惡性腫瘤疾病中,據報道,血清CEA水平異常升高對NSCLC患者病情監測及預后判斷也有一定價值[14-15]。本研究通過對比預后良好組與預后不良組血清CEA水平發現其存在明顯差異,但建立多元Logistic回歸模型后發現,血清CEA高水平并不是NSCLC患者預后不良的風險因素,提示血清CEA可能參與NSCLC發生及發展,但因肺癌腫瘤生物學行為復雜,CEA可能易受其他因素影響,靈敏度及特異度均不佳,具體結論仍有待證實。可見,血清腫瘤標志物在NSCLC中的應用也有局限,還需要探討其他可能與疾病預后有關的指標。

TK1是嘧啶補救過程中的關鍵酶,參與細胞周期中DNA合成,在細胞快速分裂過程中有較高活性,且在胸苷激酶中占據主導地位,可作為衡量細胞增殖活性的重要指標,對腫瘤細胞生長、分化等具有一定影響[16]。TK1可催化產生脫氧胸苷酸,脫氧胸苷酸是DNA合成和修復的必需產物,可促進腫瘤細胞增殖、分化;TK1過表達可促進脫氧胸苷酸合成,大量脫氧胸苷酸的生成與釋放可促進腫瘤生長、轉移,進而影響治療效果,增加治療無效風險,甚至疾病進展。TK1還可被腫瘤細胞核分解代謝,在分解代謝后將直接進入血液循環,增加周圍黏膜細胞病變風險,為腫瘤細胞復制提供條件,繼而影響化療效果,導致預后不良的發生[11]。健康人群中血清TK1水平較低,TK1水平變化主要依賴細胞增殖,在腫瘤患者中,血清TK1水平異常升高,可反映腫瘤細胞增殖動力,且在腫瘤早期診斷及預后評估中有較高靈敏度[16-18]。血清TK1水平越高提示腫瘤分化速度快,這類患者治療難度大。羅莉等[19]的研究中,食管鱗癌患者中血清TK1高表達的患者放療后生存時間明顯減少,并且Cox分析結果提示血清TK1是食管鱗癌放療預后不良的危險因素。本研究中,血清TK1高是晚期NSCLC治療預后不良的影響因素,與上述研究結果基本一致,證明血清TK1高表達會增加晚期NSCLC患者的治療難度,影響患者預后。

DKK1屬于分泌性糖蛋白,作為Wnt/β-catenin信號通路拮抗劑,能結合細胞膜上Wnt受體及DKK1共受體,形成內吞小體,對Wnt信號通路產生阻斷,抑制Wnt信號通路,而Wnt信號通路是介導細胞增殖、分化、存活及凋亡等的關鍵信號通路之一,該信號通路調節失控常導致腫瘤形成[20]。DKK1可通過促進血管生成相關因子表達,進而誘導腫瘤血管生成,對細胞侵襲及轉移產生重要影響[21]。DKK1參與了諸多惡性腫瘤疾病的發生、發展,其被證實參與了食管鱗癌的發生發展,并增強了腫瘤的侵襲與轉移能力,是惡性腫瘤疾病發生與細胞轉移的主要推動因子[22]。另外,趙建強等[23]研究顯示,血清DKK1在多發性骨髓瘤患者中表達顯著上調,DKK1通過促進炎癥因子釋放,加重腫瘤微炎癥狀態,促進骨髓瘤細胞增殖,從而影響FVAD方案的化療效果。因此,有理由認為,DKK1表達上調將增加腫瘤的惡性程度,推動腫瘤的進展并可能促進轉移,直接增加治療難度,進而導致不良預后的發生。本研究中,血清DKK1高表達是晚期NSCLC患者預后不良的影響因素,進一步證明了血清DKK1在晚期NSCLC患者中的臨床意義。最后繪制ROC曲線發現,血清TK1、DKK1預測晚期NSCLC患者化療預后有一定價值,且當二者最佳截斷值分別取6.840 pmol/L、5.410 ng/mL時,可獲得最佳預測效能,提示血清TK1、DKK1可作為預測晚期NSCLC化療患者臨床預后的重要指標。臨床可密切關注晚期NSCLC患者血清TK1、DKK1水平情況,來預測晚期NSCLC化療患者預后情況,同時可以TK1、DKK1為治療靶點,針對二者水平異常升高的患者及時采取相關處理措施,以改善患者預后。但值得注意的是,以往與血清TK1、DKK1在晚期NSCLC患者中表達的相關研究并不多,關于二者與腫瘤治療效果關系的研究更少,因此TK1、DKK1與晚期NSCLC患者治療預后關系之間的機制尚不能明確,具體的結論仍需要進一步證實。

綜上所述,血清TK1、DKK1水平異常升高可能提示晚期NSCLC患者預后不良高風險,早期監測患者血清TK1、DKK1水平,對預測、評估患者治療預后有一定積極意義。