振幅整合腦電圖評分聯(lián)合微小RNA-422a檢測晚期早產(chǎn)兒腦損傷情況的臨床研究

歐陽福連

【摘要】 目的 分析振幅整合腦電圖（amplitude-integrated electroencephalography，aEEG）評分聯(lián)合微小RNA（miRNA，miR）-422a檢測晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效果。方法 回顧性分析2020年1月—2021年7月贛州市人民醫(yī)院南院收治的100例晚期早產(chǎn)兒的臨床資料，按照腦損傷情況將所有患兒分為腦損傷組45例與無腦損傷組55例，統(tǒng)計對比2組aEEG評分、miR-422a與新生兒20項(xiàng)行為神經(jīng)評分法（neonatal behavioral neuroiogical assessment，NBNA）評分的差異；以Pearson相關(guān)性分析法分析aEEG評分、miR-422a與NBNA評分間的相關(guān)性；另繪制受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC），分析aEEG評分、miR-422a二者單獨(dú)或聯(lián)合檢測診斷晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能。結(jié)果 腦損傷組的aEEG評分為（7.04±1.21）分、miR-422a為（1.69±0.45）分、NBNA評分為（30.22±2.09）分，低于對照組的（9.16±1.56）分、（3.41±0.63）分、（35.69±1.89）分，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；Pearson相關(guān)性分析顯示，aEEG評分、miR-422a與NBNA評分呈正相關(guān)（P<0.05）；ROC結(jié)果顯示，aEEG評分、miR-422a聯(lián)合檢測的曲線下面積（area under curve，AUC）為0.927（95%CI為0.878～0.976），高于二者單獨(dú)檢測的0.864（95%CI為0.792～0.936）、0.871（95%CI為0.801～0.940）。結(jié)論 aEEG評分、miR-422a聯(lián)合可有效診斷出晚期早產(chǎn)兒腦損傷，臨床應(yīng)用價值較高，可推廣。

【關(guān)鍵詞】 晚期早產(chǎn)兒；腦損傷；振幅整合腦電圖評分；微小RNA-422a；診斷效能

中圖分類號：R444；R446.1? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1672-1721（2023）34-0101-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.34.033

晚期早產(chǎn)兒是指胎齡在34～36+6周出生的新生兒，雖然其體型、身高等各方面均與足月兒較為相似，但實(shí)際上其生長發(fā)育與足月兒間仍存在較大差異[1-2]。與足月兒相比，晚期早產(chǎn)兒的腦損傷發(fā)生率較高，如果未對患兒施以及時的診斷與治療，將會導(dǎo)致認(rèn)知、運(yùn)動障礙等與神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險增大，病情嚴(yán)重者甚至還會危及生命[3-4]。磁共振成像為現(xiàn)階段臨床診斷新生兒腦損傷的重要影像學(xué)措施，通過對患兒頂枕葉等皮質(zhì)損傷情況來診斷腦損傷情況。但該檢查對于設(shè)備的要求較高且新生兒配合度差，導(dǎo)致其臨床應(yīng)用較為受限。aEEG是運(yùn)用腦電波振幅分析腦功能的手段，現(xiàn)如今已在新生兒重癥監(jiān)護(hù)室內(nèi)大范圍使用。然而因少數(shù)晚期早產(chǎn)兒需采用呼吸機(jī)等輔助設(shè)備行生命支持，此類儀器會在一定程度上影響aEEG的檢測結(jié)果，繼而出現(xiàn)誤診、漏診現(xiàn)象，故有必要聯(lián)合其他診斷措施以提高檢查準(zhǔn)確度。微小RNA（miR）-422a為腦源性微小核糖核酸，在腦組織缺血與缺氧的狀態(tài)下可有效抑制腦組織損傷[5]。本研究回顧性分析100例晚期早產(chǎn)兒的臨床資料，探討aEEG評分、miR-422a診斷晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能，以期為臨床診斷提供可靠的依據(jù)，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年1月—2021年7月贛州市人民醫(yī)院南院收治的100例晚期早產(chǎn)兒的臨床資料，按照腦損傷情況將所有患兒分為腦損傷組45例與無腦損傷組55例，無腦損傷組中男性34例，女性21例；孕周34～36+6周，平均孕周（35.33±0.16）周；分娩方式，31例順產(chǎn)，24例剖宮產(chǎn)。腦損傷組中男性26例，女性19例；孕周34～36+6周，平均孕周（35.28±0.21）周；分娩方式，28例順產(chǎn)，17例剖宮產(chǎn)。2組基線資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒臨床資料完整；孕周在34～36+6周出生的活產(chǎn)新生兒；均為單胎。

排除標(biāo)準(zhǔn)：遺傳代謝性疾病者；存有神經(jīng)系統(tǒng)先天性畸形者；存有低血糖腦損傷、膽紅素腦損傷者。

1.2 方法 aEEG檢測。以Neurofax EEG-1200腦電圖儀進(jìn)行檢查，檢測前清洗患兒電極放置部位，按國際10～20標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)聯(lián)法于患兒雙側(cè)額葉（Fp1—Fp2）、中央（C3—C4）與顳葉（T3—T4）分別放置記錄電極；在電極內(nèi)注入導(dǎo)電膏，電極與頭皮間電阻控制于20 kΩ，靈敏度為70 μV/cm，濾波頻率0.5～35 Hz；收集腦電信號后以半對數(shù)的方式存儲，并記錄常規(guī)腦電波（electroencephalogram，EEG）；全部患兒均于出生后的12 h內(nèi)統(tǒng)計，每次持續(xù)時間均需>6 h。參照Burdjalov提出的aEEG評分系統(tǒng)[6]分別從連續(xù)性（0～2分）、下邊界振幅（0～2分）、睡眠-覺醒周期（0～5分）、帶寬（0～4分）方面評估，總分共13分，分?jǐn)?shù)越高腦發(fā)育越成熟，功能越好。miR-422a，于患兒出生后24 h內(nèi)采集其2 mL靜脈血，以Trizol法提取其總核糖核酸（ribonucleic acid，RNA），獲取RNA后以反轉(zhuǎn)錄試劑盒將總RNA合成cDNA。之后制備反應(yīng)體系，在37 ℃環(huán)境下行實(shí)時逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)15 min，在85 ℃條件下保持15 s后終止；以逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA作為模板行qPCR反應(yīng)，以磷酸甘油脫氫酶（GAPDH）的表達(dá)量作為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法計算miR-422a表達(dá)量。新生兒20項(xiàng)行為神經(jīng)評分法（NBNA）[7]評分系統(tǒng)包括被動肌張力（4個條目）、新生兒行為能力（6個條目）、主動肌張力（4個條目）、原始反射（3個條目）、一般評估（3個條目），各項(xiàng)為0～2分，總分0～40分，分?jǐn)?shù)越高神經(jīng)功能越好。

腦損傷判斷標(biāo)準(zhǔn)：（1）原始反射出現(xiàn)活躍、減弱或消失等變化；（2）呼吸困難；（3）出生后48 h內(nèi)出現(xiàn)肌張力下降或上升，或存在癇性發(fā)作；（4）出現(xiàn)興奮、嗜睡或昏迷等意識改變；（5）結(jié)合CT、磁共振成像等檢查對患兒顱內(nèi)出血、腦白質(zhì)損傷等情況行診斷，依據(jù)判斷結(jié)果將患兒分為腦損傷組與無腦損傷組。

1.3 觀察指標(biāo) （1）2組aEEG評分、miR-422a、NBNA評分的差異。統(tǒng)計對比2組的aEEG評分、miR-422a、NBNA評分。（2）aEEG評分、miR-422a與NBNA評分的相關(guān)性。（3）aEEG評分、miR-422a檢測晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能。繪制ROC曲線，分析aEEG評分、miR-422a 二者單獨(dú)或聯(lián)合檢測診斷晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以百分比表達(dá)，行χ2檢驗(yàn)；計量資料以x±s表示，行t檢驗(yàn)；相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson分析；以ROC曲線下面積（AUC）評價診斷效能，AUC≤0.5提示無診斷價值；0.50.9則提示診斷價值較高；P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組aEEG評分、miR-422a、NBNA評分對比 腦損傷組的aEEG評分、miR-422a、NBNA評分均低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 aEEG評分、miR-422a與NBNA評分的相關(guān)性 Pearson相關(guān)性顯示，aEEG評分、miR-422a與NBNA評分呈正相關(guān)（P<0.05），見表2。

2.3 aEEG評分、miR-422a檢測晚期早產(chǎn)兒腦損傷的效能 ROC結(jié)果顯示，aEEG評分、miR-422a聯(lián)合檢測的AUC高于二者單獨(dú)檢測，見表3、圖1。

3 討論

近些年因妊娠期糖尿病等而引發(fā)妊娠并發(fā)癥的患病人數(shù)增加，早產(chǎn)兒特別是晚期早產(chǎn)兒的出生率持續(xù)上漲[8]。晚期早產(chǎn)兒腦組織對缺氧、感染等耐受力較足月兒顯著降低，故極易出現(xiàn)腦損傷。腦損傷指的是產(chǎn)前、產(chǎn)時、出生后的不同病理因素造成早產(chǎn)兒不同程度的腦缺血或缺血性損傷，可出現(xiàn)對應(yīng)的癥狀與體征，對于病情嚴(yán)重者還將構(gòu)成程度不一的神經(jīng)系統(tǒng)損害[9-10]。因而如何早期診斷、及時治療晚期早產(chǎn)兒腦損傷，降低其神經(jīng)系統(tǒng)不良預(yù)后發(fā)生率，一直是臨床的研究重點(diǎn)。

現(xiàn)如今，臨床對于晚期早產(chǎn)兒腦損傷多是按照患兒臨床表現(xiàn)與影像學(xué)檢查進(jìn)行診斷，但部分患兒缺乏典型臨床表現(xiàn)，且患兒的配合度較低，故易出現(xiàn)漏診、誤診等現(xiàn)象。aEEG屬于腦電監(jiān)測技術(shù)，具有無創(chuàng)、操作便利、圖形直觀、可床邊監(jiān)測、連續(xù)性監(jiān)測等優(yōu)勢，且可反映腦電背景活動的變化，故在監(jiān)測晚期早產(chǎn)兒腦損傷方面意義重大[11-12]。雖然aEEG較常規(guī)的腦電圖信號干擾極大程度的降低，但對于少數(shù)患兒而言，在行腦電圖采集時需要使用呼吸機(jī)等輔助治療設(shè)備，而此類設(shè)備在一定程度上會干擾腦電波，進(jìn)而產(chǎn)生較實(shí)際振幅更大的aEEG圖像，最終導(dǎo)致誤判。NBNA評分能夠有效反映新生兒體格發(fā)育與視聽感等神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育情況，但易受到評估者臨床經(jīng)驗(yàn)的影響，具有一定的主觀性。而miR-422a屬于腦源性微小核糖核酸，如果腦組織處于缺血、缺氧狀況，該因子將會抑制腦組織的損傷。本研究結(jié)果顯示，腦損傷組的aEEG評分、miR-422a、NBNA評分低于對照組，且Pearson相關(guān)性顯示，aEEG評分、miR-422a與NBNA評分呈正相關(guān)，表明對于出現(xiàn)腦損傷的晚期早產(chǎn)兒患兒，其aEEG評分、miR-422a與NBNA評分均較低。本研究ROC結(jié)果顯示，aEEG評分、miR-422a聯(lián)合檢測的AUC為0.927（95%CI為0.878～0.976），高于二者單獨(dú)檢測的0.864（95%CI為0.792～0.936）、0.871（95%CI為0.801～0.940）。由此提示，aEEG評分、miR-422a二者聯(lián)合可有效提升診斷準(zhǔn)確度。這可能與血清miR-422a檢查受呼吸機(jī)等輔助治療設(shè)備的影響較小，有利于減小因輔助治療對診斷結(jié)果所造成的干擾有關(guān)，從而提升檢查準(zhǔn)確度[13]。

綜上所述，aEEG評分、miR-422a二者聯(lián)合可提高晚期早產(chǎn)兒腦損傷的檢出準(zhǔn)確度，具有較高的臨床應(yīng)用價值，可大力推行。

參考文獻(xiàn)

[1] TIAN Q Y，PAN Y Z，ZHANG Z，et al.Predictive value of early amplitude integrated electroencephalogram （aEEG） in sleep related problems in children with perinatal hypoxic-ischemia（HIE）[J].BMC Pediatr，2021，21（1）：410.

[2] 申璐，陶名玉，史雨璇，等.振幅整合腦電圖聯(lián)合頭顱磁共振定量指標(biāo)對中晚期早產(chǎn)兒近期神經(jīng)發(fā)育預(yù)測價值的前瞻性研究[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2021，23（10）：987-993.

[3] SUN H，GONZALEZ F，MCQUILLEN P S.Caffeine restores background EEG activity independent of infarct reduction after neonatal hypoxic ischemic brain injury[J].Dev Neurosci，2020，42（1）：72-82.

[4] GARG P M，PASCHAL J L，ZHANG M，et al.Brain injury in preterm infants with surgical necrotizing enterocolitis：clinical and bowel pathological correlates[J].Pediatr Res，2022，91（5）：1182-1195.

[5] 張鑫宇，趙鑫，張重陽，等.振幅整合腦電圖聯(lián)合微小RNA-422a監(jiān)測對急性腦梗死亞低溫治療的預(yù)后評估[J].中華老年心腦血管病雜志，2021，23（1）：55-58.

[6] 劉慧蘋，蔣峰原，宋忠瑞，等.振幅整合腦電圖評分、血清血紅素氧化酶-1水平對早產(chǎn)兒腦損傷的早期預(yù)測價值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2020，17（22）：3256-3259.

[7] 席艷麗，王瑞珠，高峰，等.足月缺氧缺血性腦病患兒氫質(zhì)子磁共振波譜與新生兒行為神經(jīng)測定評分的相關(guān)性[J].中國醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志，2022，30（11）：1102-1107，1112.

[8] 張博，衛(wèi)文峰，劉彩娥，等.振幅整合腦電圖在早產(chǎn)兒腦損傷評估及神經(jīng)發(fā)育預(yù)后預(yù)測中的作用分析[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2021，33（11）：85-88.

[9] DE WEL O，VAN HUFFEL S，LAVANGA M，et al.Relationship between early functional and structural brain developments and brain injury in preterm infants[J].Cerebellum，2021，20（4）：556-568.

[10] 馮會敏，冀京雷，馮彩麗，等.改良振幅整合腦電圖評分聯(lián)合生化標(biāo)記物對高危新生兒腦損傷早期診斷價值研究[J].中國兒童保健雜志，2020，28（12）：1317-1321.

[11] 王艷蕊，王桂芳.振幅整合腦電圖聯(lián)合血清NSE、S100-β水平在早產(chǎn)兒腦損傷診斷中的應(yīng)用[J].中國兒童保健雜志，2020，28（11）：1290-1293.

[12] 汪微，陳燕.振幅整合腦電圖聯(lián)合超敏C-反應(yīng)蛋白水平在早產(chǎn)兒腦損傷診斷中的應(yīng)用價值[J].臨床與病理雜志，2020，40（6）：1414-1419.

[13] 趙大龍，田金靈.創(chuàng)傷性顱腦損傷患者血清miR-422amiR-212-5p表達(dá)水平與病情和預(yù)后的相關(guān)性研究[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2022，37（1）：67-71.

（收稿日期：2023-10-8）