牛羊布魯氏菌病流行病學調查試驗報告

為了進一步掌握青海省湟中區牛羊布魯氏桿菌病的發生流產情況，于2019年到2021年連續三年選擇使用琥紅平板凝集試驗以及試管凝集試驗進行初次篩查和復檢的方法，對青海省湟中區6個鄉鎮的牛羊養殖場開展了布魯氏桿菌病流行病學調查。三年間共有采集了牛羊血清分別為2390份和4223份，陽性血清有173份和223份，陽性率分別為7.24%和5.52%，三年間牛羊布魯氏桿菌病的陽性率呈現出逐漸下降的態勢。各個鄉鎮牛羊布魯氏桿菌病的感染率會存在一定的差異性，從牛羊的年齡結構來看2～6歲的羊群最容易受到該種疾病的感染。盡管近年來湟中區牛羊布魯氏桿菌病的發生流行率呈現逐漸下降的態勢，但仍然需要當地防疫部門加強疾病監測要規范牛羊的引種行為，規范養殖戶的養殖行為，認真做好牛羊的檢疫檢驗和撲殺無害化處理，加強牛羊群的有效凈化，防范該種疾病大范圍的傳播流行，造成更為嚴重的危害。

一、試驗材料與方法

1、試驗材料選取

2019年到2021年，在青海省湟中區的6個鄉鎮（魯沙爾鎮、西堡鎮、上新莊鎮、田家寨鎮、甘河灘鎮、共和鎮），開展了牛羊布魯氏桿菌病調查采集新鮮血液樣本，共采集了牛羊血清樣本2390份和4223份。魯沙爾鎮、西堡鎮、上新莊鎮、田家寨鎮、甘河灘鎮、共和鎮6個鄉鎮牛血清樣本分別采集了382份，383份，391份，401份，381份和462份。羊血清樣本分別采集了703份，713份，702份，700份，703份和702份。從0～2歲、2～3歲、3～6歲和6歲以上4個維度對采集的牛羊進行研究劃分，分別采集了上述牛血清樣本563份，921份522份和484份。分別采集了羊血清樣本763份，1423份，1123份和914份。將養殖場采集到的血液常規方法分離得到血清分別進行邊際登記，年齡掌握養殖場的來源，在零下20℃冷凍條件下保存，等待檢驗。

2、試驗方法

本次試驗選擇使用牛羊布魯氏桿菌病虎紅平板凝集抗原檢測試驗法和血管凝集檢測試驗法。第1種方法主要用于篩選陽性血清，第2種方法主要用于確診陽性血清。在試驗過程中需要準備布魯氏桿菌虎紅平板凝集抗原、布魯氏桿菌試管凝集抗原、布魯氏桿菌標準陰性血型標準陽性血清，上述幾種試驗材料均來自于中國獸醫藥品監察所。

3、試驗操作

將采集到的牛羊血清先使用虎紅平板凝集抗原進行初次篩檢，將采集到的新鮮血清滴加到玻璃板上，然后滴加一滴虎紅平板凝集抗原，在陰性對照組和陽性對照組成立的情況下，如果受檢測的血清在4分鐘當中出現了肉眼可以觀察到的凝集現象可以判定為陽性，凝集呈現粉紅色，不凝集的血型判定為陰性。將篩選出來的疑似陽性血清選擇使用試管凝集試驗進行再一次的最終診斷。試驗的陰性對照組和陽性對照組成立的情況下，牛按照1∶100血清稀釋度陽按照1∶50稀釋度，如果出現了“++”以上凝集的可以判定為陽性。牛1∶50的血清稀釋度，羊1∶25的血清稀釋度出現了“++”以上凝集可以判定為可疑。對于試驗結果可疑的，對應加數應該在試驗結束后30天重新采集血樣進行檢測，如果仍為可疑，可以判定牛羊為陽性。

二、結果

1、 2019年到2021年湟中區牛羊布魯氏桿菌病檢測結果

2019年到2021年湟中區牛羊布魯氏桿菌病檢測結果如下：2019年檢測牛797頭，陽性83頭，陽性率為10.41%；檢測羊1400只，陽性103只，陽性率為7.36%；2020年檢測牛800頭，陽性62頭，陽性率為7.75%；檢測羊1410只，陽性87只，陽性率為6.17%；2021年檢測牛793頭，陽性28頭，陽性率為3.53%；檢測羊1413只，陽性33只，陽性率為2.34%。根據以上數據可以看出三年共檢測出牛羊陽性血清分別為173分和223份，陽性率分別為7.24%和5.52%。2019年到2021年三年間分別檢測出牛羊陽性血清為83份、62份、28份和103份、87份、33份，陽性率分別為10.41%，7.75%，3.53%，7.24%和7.36%，6.17%，2.34%，5.52%。從三年間的牛羊布魯氏桿菌病的陽性率來看，整體感染率呈現逐漸下降的態勢，但總體上所在地區的牛羊布魯氏桿菌病的陽性率仍然相對較高，需要我們提高重視程度，繼續加強疾病的有效防范，確保早發現早處理，在短時間內控制病情。

2、不同地區牛羊布魯氏桿菌病的檢測結果

湟中區不同鄉鎮牛羊布魯氏桿菌病的檢測結果如表1所示，根據表1數據可以得知各個地區牛羊布魯氏桿菌病的感染率會存在一定的差異性。牛羊布魯氏桿菌病的陽性率差異性主要與當地的牛羊養殖習慣，養殖規模，以及對外引種頻率密切相關。有些養殖戶存在不規范的引種行為，對外引種過程中沒有加強有效的流行病學調查，從而造成了外來疫病傳入本地區，再加上很多農牧民群眾的主動防御意識相對較為薄弱，導致了牛羊布魯氏桿菌病的發生流行率呈現逐漸增加的態勢。詳細情況如表1所示。

3、不同年齡牛羊布魯氏桿菌病的檢測結果

不同年齡牛羊布魯氏桿菌病的陽性率如表2所示，結合表3數據可以看出不同年齡下對布魯氏桿菌的易感性會存在較大的差異性。從0～2歲、2～3歲、3～6歲和6歲以上4個維度對采集的牛羊進行研究劃分，分別采集了上述牛血清樣本563份，921份522份和484份，分別采集了羊血清樣本763份，1423份，1123份和914份，上述4個年齡層次牛和羊陽性血清分別為13分46分，52分10分和21分，89分，86分，27分，陽勝率分別為2.31%，4.99%，9.96%，2.07%和2.75%，6.25%，7.66%，2.95%，其中2～6歲階段的牛羊對布魯氏桿菌的易感受最強，在今后疾病防控過程中，應該持續加強該年齡階段的牛群監測，并加強疾病的有效防范，確保早發現早處理，在短時間內控制病情。詳細情況如表2所示。

三、討論

1、牛羊布魯氏桿菌病毒感染情況調查

本次調查過程中首先選擇使用虎紅平板凝集試驗對待檢血清進行初步篩選，檢測為陽性的血型再使用試管凝集試驗進行進一步的診斷，通過各種方法能夠及時識別假陽血清，提高檢測的精確性和準確性。在進行牛羊流行病學調查過程中，建議將兩種方法綜合應用最大限度地提高檢測的準確性。通常情況下琥紅平板凝集試驗是一種高度靈敏性的檢測方法，可以很容易的在現場條件下進行篩選，而試管凝集方法具有高度的特異性和敏感性，通常是在布魯氏桿菌病診斷過程中做布魯氏桿菌抗體確診試驗。通過本次的流行病學調查，能夠得知連續三年見湟中區牛羊布魯氏桿菌病的陽性率分別為7.24%和5.52%，三年前的陽性率呈現逐漸下降的態勢，但在養殖場當中仍然能夠檢測到陽性的布魯氏桿菌，仍需我們提高重視程度，加強對戰略疾病的有效防范，確保早發現早處理，在短時間內控制病情

不同鄉鎮牛羊布魯氏桿菌病的流行率也存在著較大的不同，這可能與牧區養殖模式相關，從現階段的牛羊養殖業發展現狀來看，集約化規模化養殖已經成為一種大勢所需，但是很多養殖戶仍然堅持傳統范圍養殖管理方式，家庭式養殖與牧區中的牲畜聚集在一起，大部分農戶以放牧養殖為主，公共草場面積較大并且較為廣泛，種類的牲畜不同來源，不同性別的牲畜往往在同一個草草當中混合養殖，相互接觸造成了疫情的傳播，特別是在母牛母羊流產之后，沒有及時清理好流產物，患病的母牛母羊和其他牲畜群頻繁接觸，再加上牧區之間的遷徙，都有可能會增加不同地區牲畜接觸不流感菌的感染率。此外有不少養殖戶在進行養殖規模擴大過程中都存在不規范對外引種的行為，尤其是大量未經檢疫的外來牲畜進入到本地區，造成了布魯氏桿菌病的傳播蔓延。

全球動物產品貿易的不斷增加也是造成牛羊布魯氏桿菌病傳播蔓延的一個重要原因。現階段我國關于牛羊布魯氏桿菌病的防治主要采用檢測和撲殺、無害化處理的政策，以根據放牧地區的牛羊布魯氏桿菌病，有效降低布魯氏桿菌病的發生流行率。但是從實際的應用情況來看，由于養殖戶的不規范養殖行為，難以實現布魯氏桿菌病的有效診斷和有效處置，無法控制牧場動物的遷徙，以及養殖戶對外購買牲畜產品。再加上很多養殖戶不注重做好檢疫、檢驗，部分農牧民群眾對布魯氏桿菌病的認知不到位，缺乏針對性的宣傳教育，均造成該種疾病在牧區周期性的傳播流行，不能夠徹底根除該類疾病。

針對當前牛羊布魯氏桿菌病的發生流行現狀，仍需當地的防御部門提高重視程度，加強對布魯氏桿菌病的有效檢疫檢驗，同時在進行牛羊布魯氏桿菌病防控過程中，需要轉變傳統的防治理念。每年要定期對轄區范圍內的牛羊養殖戶進行針對性的檢測篩查，一旦發現患病動物應該立即進行撲殺、焚燒等無害化處理，避免造成不必要的傳播蔓延。并且對于發病養殖場應該持續加強布魯氏桿菌病的有效性化處理，將牛羊養殖場劃定為感染區，并對養殖場內部的羊群進行進一步的分群養殖，將牛羊劃分成疑似患病牛羊、假定健康牛羊群并做好持續性的監測和疫苗免疫接種，對于多次檢測為陰性的羊群，可以作為假證健康羊群，直到連續三次檢測不出帶菌牛羊表示凈化完全，在羊群當中檢測出大群羊應該將整個羊群作為疑似患病羊群再次進行凈化處理，直到徹底根除病情，防范布魯氏桿菌病的傳播蔓延，避免造成更為嚴重的危害。

2、牛羊布魯氏桿菌病的防控措施

通過三年間的流行病學調查，可以得知湟中區牛羊布魯氏桿菌病的陽性率呈現逐漸下降的態勢，但在不同鄉鎮不同年齡的牛羊群當中，布魯氏桿菌的陽性率仍然相對較高，未來除了繼續加強流行病學調查和檢測工作之外，需要構建綜合性的防控措施，加強對牛羊布魯氏桿菌病的有效防范，確保早發現早處理，將布魯氏桿菌調造成的危害降低到最小程度。

①提高工作人員和養殖人員疫情防護認知

牛羊布魯氏桿菌病是一種典型的人畜共患傳染性疾病，不僅會在牛羊群體當中傳播蔓延，具有極強的傳染性和破壞性，而且還可以通過多種間接途徑傳播給人類，給人類生命健康構成嚴重的威脅，甚至會造成急性死亡，使整個農牧區處于不安定的狀態。近些年，隨著當地政府部門和防疫部門對牛羊布魯氏桿菌病的防控重視程度逐漸增強，整體的發生流行率相對較低，病情在可控范圍當中，但仍需當地的防疫工作人員和養殖工作人員提高對該種疾病的重視程度。相關部門應該持續加強牛羊布魯氏桿菌病的宣傳教育，從整體上提高養殖人員和畜牧獸醫人員的正確認知，提升相關工作人員的自我防范意識，降低人畜傳染性疾病向人類傳播蔓延的可能，尤其是在養殖比較集中的農戶群體當中，需要定時向他們傳授布魯氏桿菌病的相關防治經驗和簡單有效的診斷方法，提前采取措施做好布魯氏桿菌病的有效方法。

②加強防疫

近年來，雖然地方畜牧獸醫部門高度重視牛羊檢疫檢驗工作，積極對防疫工作進行落實，但由于牧區養殖較為廣泛，很多農牧民群眾一直堅持傳統的放牧養殖管理方式，各項防疫工作并不能夠嚴格落實到位，這就造成了布魯氏桿菌病的大范圍傳播蔓延，疫情得不到有效的控制，為此就要求當地的防疫部門加快構建更加完善的防疫計劃，定期進入到養殖群體當中進行有效的牛羊疫病檢疫，逐門逐戶地進行動物身體健康檢查和疫情排查。另外防疫人員在日常工作中也不能夠放松警惕，要明確布魯氏桿菌病的傳播流行源頭要嚴格按照相關標準對牛羊群進行有效的檢疫，及時發現患病牛羊及時撲殺患病牛羊，如此才能夠將疫情有效控制。牛羊布魯氏桿菌病具有多發性流行性，具有很長的潛伏周期，這造成了該種疫病的防控凈化難度大，所以防控牛羊布魯氏桿菌貴在堅持。工作人員應該定期按照相關規定進行有效的牛羊檢疫檢驗，即便是上一次檢測為陰性的牛羊群，也需要定期進行檢疫檢驗，一旦檢測出陽性群體，立即撲殺，防范疫情的傳播蔓延。同時還應該進一步規范養殖戶的飼養管理行為，引導廣大農牧民群眾轉變傳統的放牧養殖管理方式，盡量避免在公共草場放牧，減少不同種類不同來源牲畜相互接觸的幾率。通過發展舍飼養殖，實現集中養殖集中管理。減少羊群戶外活動接觸病原的幾率，另外要堅持針對性的養殖管理方案，避免隨意從外地引進羊群，引進的羊群要保證來源可溯，群體健康，不存在帶病情況，并落實嚴格的隔離觀察制度。根據牛羊群的生長發育特征，做到科學配置飼料，合理調控飼料，保證飼料營養價值全面，提高牛羊群的身體抵抗能力，并在此基礎上加強環境的有效清理，嚴格落實定期消毒制度，殺滅環境當中散落的病原微生物，切斷病原的傳播途徑。在此基礎上，要持續做好牛羊布魯氏桿菌病等重大傳染性疾病人畜共患傳染性疾病的宣傳教育，提升養殖戶的自我防范意識，真正實現科學養殖，落實衛生消毒控制布魯氏桿菌必要的發生蔓延。

綜上所述，牛羊布魯氏桿菌病屬于人畜共患的傳染性疾病，目前該種疾病沒有針對性的治療藥物，由于該類疾病造成的危害較為嚴重，會對繁殖母畜和種公畜造成嚴重的威脅，導致母畜流產，種公畜睪丸腫大，乏力，不能正常配種。獸醫人員和養殖人員頻繁的接觸患病羊或者流產物，也很容易受到病原的入侵，導致人類出現波浪熱、關節疼痛，甚至會喪失生育能力。布魯氏桿菌具有隱性感染、隱性傳播的特征，一旦發現將會周期性的在羊群當中反復傳播蔓延，凈化難度相對較大。近年來，隨著牧區牛羊養殖業的不斷向前發展，養殖戶對外引種頻率顯著增加，引種不當所造成的外來傳染性疾病傳入風險大大增強，需要我們進一步加強重視程度，注重做好牛羊布魯氏桿菌病的流行病學調查，及時發現及時處置，將牛羊布魯氏桿菌病的發生流行率降低到最小程度，避免造成更為嚴重的經濟損失。

（作者單位：810000青海省西寧市湟中區攔隆口鎮畜牧獸醫站）