同仁牛羊衣原體病的血清學調(diào)查結果分析

衣原體病是由鸚鵡熱衣原體感染引發(fā)的一種多種類牲畜共患的廣泛傳播的人畜共患傳染性疾病，牛羊受到衣原體感染之后，會因為其繁殖階段的不同，而表現(xiàn)出差異性的臨床癥狀，尤其是初次妊娠的母牛和母羊極容易出現(xiàn)流產(chǎn)，在妊娠后期會出現(xiàn)早產(chǎn)、產(chǎn)死胎、高熱癥狀，并引發(fā)多發(fā)性的關節(jié)炎、腦脊髓炎。牛羊衣原體病的發(fā)生流行不會存在典型的季節(jié)性，但在吸血昆蟲繁殖生長的旺盛期會進入到發(fā)病高峰期。如果放牧場所或者養(yǎng)殖環(huán)境當中有大量的吸血昆蟲活動，通過叮咬皮膚就可以傳播牛羊衣原體病，這也是造成該種疾病在養(yǎng)殖場中周期性傳播流行的一個重要原因。為了更好的掌握青海省同仁縣牛羊衣原體病的流行現(xiàn)狀于2017年到2021年連續(xù)5年間對同仁縣的藏羊牦牛養(yǎng)殖場開展衣原體病流行病學調(diào)查。根據(jù)調(diào)查結果，能夠看出5年間牛羊衣原體病的感染率呈現(xiàn)出先下降，再升高再下降的趨勢，但整體的陽性率較高。通過明確衣原體病的血清學調(diào)查結果，能夠更加高效地開展疫源追蹤，及時發(fā)現(xiàn)陽性的牛羊群，及時進行淘汰處理，并構建針對性的免疫接種方案將該類疾病的發(fā)生流行率控制在萌芽階段，避免造成更為嚴重的危害。

一、試驗材料與方法

1、試驗材料選取

本次研究所選擇的待檢血清來自于青海省同仁縣的牦牛藏羊養(yǎng)殖場，2017年到2021年共產(chǎn)及牛羊血清樣本1700份和2460份，5年前牛血清樣本分別是400份，400份，300份，300份，300份，羊血清樣本分別為400份，500份，550份，510份和500份。樣本由各個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的畜牧獸醫(yī)站采集，將采集到的牛羊新鮮血液常規(guī)方法分離得到血清，然后放置在采樣袋當中，詳細的標準采樣來源、采樣人員，保證各項信息登記齊全。診斷試劑主要包括了衣原體標準抗原、標準陰性血清、標準陽性血清，上述診斷試劑均來自于青海省動物預防控制中心。試驗操作過程中涉及到的儀器設備主要包括了96孔的110度微型血凝板，微量震蕩器，恒溫培養(yǎng)箱，以及微量加樣器等。

2、試驗方法

在試驗操作過程中先將96孔110℃的微型血凝板平放到操作臺上，每個孔道中加入標準的稀釋液75mL。用另一只微量加樣器吸取牛羊待檢血清25μL加入到第1排的第1個孔，并將塑膠嘴插入到底部，右手拇指輕輕的抬壓彈簧1～2次，確保溶液能夠混合均勻，避免產(chǎn)生過多的氣泡，然后從該孔當中取出25μL移入到第2個孔道中，混合均勻之后取出25μL轉移到第3個孔當中混合均勻后從第3個孔狀中取出25μL，將其舍棄。此時第1排的第1個孔第3個孔的待檢血清的稀釋度能夠依次為1∶4、1∶8和1∶16。并且在試驗操作過程中設計標準陰性血清標準陽性血清，并按照上述方法進行均勻稀釋處理。在各待檢血清的孔中和陰性對照組陽性對照組的空當中依次加入衣原體標準凝集抗原充分混合均勻之后，保證底部不存在血清沉淀，每個孔當中加入25μL。然后將血凝板放置在微量震蕩期當中，震蕩1～2分鐘，將血凝板放置在白紙上，觀察各孔的血清是否存在混合均勻，不出現(xiàn)血清沉淀表現(xiàn)為混合均勻。蓋上玻璃板，在37℃的恒溫培養(yǎng)箱當中培養(yǎng)1～2小時判定結果。

3、結果判定

試驗操作過程中陽性對照組的各個稀釋度能夠完成凝集以及陰性對照組空白對照組不產(chǎn)生凝集的情況下表示試驗成立，在對照組成立的情況下，如果被減血清1∶16孔出現(xiàn)了“++”則表示為陽性，1∶4孔出現(xiàn)了“+”表示為陰性，1∶4孔出現(xiàn)了“++”表示為可疑，1∶16孔出現(xiàn)了“+”表示為可疑。對于可疑的待檢血清應該再次進行試驗操作，檢測結果仍為可疑的，可以將其納入到陽性血清。

二、結果

2017年到2021年5年間同仁縣牛羊衣原體病的血清學調(diào)查結果如表1所示。結合表1數(shù)據(jù)可以看出2017年到2021年5年間牛羊衣原體病的血清陽性率分別為2.50%、5.00%、18.00%、11.00%、4.00%和4.25%、13.60%、16.91%、15.10%、2.60%。從檢測結果來看，當?shù)氐囊略w病陽性率呈現(xiàn)出先下降再升高再下降的趨勢，5年間整體的陽性率相對較高，牛羊的血清陽性率分別為7.65%和10.77%。結合上述診斷結果可以判定同仁縣的牛羊衣原體病的陽性率較高，在今后疾病防控過程中，應該注重加強防治工作經(jīng)驗的有效總結，一方面要明確牛羊衣原體病的臨床特征、流行特點和典型的病理變化，然后構建綜合性的防控措施，確保短時間內(nèi)將病情控制。詳細情況如表1所示。

三、討論

1、牛羊衣原體病陽性率分析

結合本次流行病學調(diào)查，能夠得知同仁縣連續(xù)5年間牛羊衣原體片的陽性率相對較高，總的陽性率分別為7.65%和10.77%，以羊的陽性率較高。從各個年份牛羊衣原體病的陽性率來看，陽性率呈現(xiàn)出先升高后下降的趨勢。出現(xiàn)這種情況，可能與當?shù)胤酪卟块T流行病學調(diào)查以及廣大養(yǎng)殖戶對衣原體病的危害性認知加大密切相關。通過進行有效的流行病學調(diào)查和疫情處置，能夠及時檢測出陽性患病的牛羊，及時淘汰陽性患病的牛羊，并對污染的棚舍環(huán)境進行嚴格的衛(wèi)生消毒，能夠有效的控制該類疾病的發(fā)生流行。當然從總體情況來看，當?shù)嘏Ｑ蛞略w病的陽性率仍然較高，出現(xiàn)這種情況主要是因為隨著市場交易的日漸頻繁，牲畜的流動日益加大，縣與縣之間村與村落之間的牲畜交易，導致了病原從外輸出的幾率大大增強。很多養(yǎng)殖戶在調(diào)運和引種過程中并沒有構建完善的檢測制度，導致陽性動物引入到本地區(qū)，從而造成了該種疾病在養(yǎng)殖場當中持續(xù)性的發(fā)生流行，難以徹底根除。在進行牛羊衣原體病流行病學調(diào)查的基礎上，也需要更好的指導養(yǎng)殖戶能夠掌握牛羊衣原體病的流行病學臨床特征和病理特變化，加強相關疾病診斷知識的有效學習，并在此基礎上構建針對性的防控方案，確保早發(fā)現(xiàn)早處理。

2、明確牛羊衣原體病的診斷方法

①流行特點

牛羊衣原體病是由鸚鵡熱衣原體感染引發(fā)的一種牛羊等多種動物共患的傳染性疾病，典型的病理特征是流產(chǎn)、肺炎、腸炎多、發(fā)生關節(jié)炎、腦炎。衣原體革蘭氏陰性染色是，專性細胞內(nèi)寄生的病原微生物，能夠在雞胚和易感動物的脊髓細胞當中繁殖生長，并且在自然界當中廣泛存在，病原主要通過直接接觸傳播。牛原衣原體在很多地區(qū)呈現(xiàn)出地方流行的態(tài)勢，發(fā)生流行不存在典型的季節(jié)性，但在夏秋季節(jié)會進入到發(fā)病高峰期。如果養(yǎng)殖場溫度調(diào)控不大，連續(xù)陰雨天氣，或者寒流入侵導致牛羊受到冷應激刺激，身體抵抗能力下降時，也會造成衣原體病的發(fā)生流行。衣原體對外界環(huán)境具有一定的適應能力，耐熱性能相對較強，常溫或者略高常溫的環(huán)境中能夠長時間存在，持續(xù)的自然光照以及室溫環(huán)境作用較長的時間，才能夠將其滅活處理，但在100℃高溫條件下15分鐘就會失去活性。衣原體對紫外線和射線比較敏感，能夠迅速被滅活處理，所以規(guī)模化養(yǎng)殖場的牛羊只有休養(yǎng)期達到半年以上，才能夠有效消除環(huán)境當中殘余的衣原體。該種病原對常規(guī)的消毒劑，例如乙醚、乙酶、木瓜蛋白酶具有較強的抵抗能力，但是對碘酸鹽較為敏感，并且各種病原具有補體結合特征。當前已知敏感的消毒劑主要包括了2%來蘇爾溶液、0.1%的福爾馬林溶液、2%的氫氧化鈉溶液、1%的鹽酸和75%的酒精。在進行消毒處理過程中應該選擇最敏感的消毒劑。從這些年牛羊衣原體病的發(fā)生流行情況來看，該類疾病能夠感染不同年齡不同品種的牛羊，但是不同年齡的牛羊感染衣原體之后，所表現(xiàn)出來的臨床癥狀會存在較大差異。衣原體有多種宿主，幾乎所有的家禽家畜都可以受到病原的入侵，混合養(yǎng)殖、隨意串場將很容易造成外來疫病的傳播。患病牛羊隱性感染的個體以及攜帶有該種病原的中間傳播媒介都是病原的傳染源，患病牛羊的流產(chǎn)物，排泄物，分泌物當中都會夾雜有大量的衣原體成為潛在的危險源。病原傳播途徑十分廣泛，主要經(jīng)消化道，呼吸道以及吸血昆蟲叮咬，皮膚損傷的皮膚黏膜入侵。此外，該類疾病的發(fā)生流行與養(yǎng)殖管理條件環(huán)境有著密切的聯(lián)系，養(yǎng)殖水平相對較差，飲用水供給不足，養(yǎng)分調(diào)控不到位，機體免疫能力下降，濫用抗生素，疫苗使用不合理，產(chǎn)生的毒副作用損傷了臟器組織，均會促使會加重該種疾病的發(fā)生流行。

②臨床癥狀

牛羊受到衣原體病感染之后流產(chǎn)是最常見也是危害最為嚴重的一種類型，除了出現(xiàn)嚴重的流產(chǎn)之外，其他年齡階段的羊群也會出現(xiàn)差異性的臨床特征。常見的主要包括了流產(chǎn)、腸炎、結膜炎、角膜炎以及關節(jié)炎。腸炎型主要發(fā)生在6月齡左右的羔羊和犢牛群體當中，潛伏周期通常在2～10天，患病牛羊主要表現(xiàn)為精神狀態(tài)逐漸變差，出現(xiàn)嚴重的腹瀉現(xiàn)象，鼻腔當中流出大量粘液性的分泌物，流淚，體溫升高到40℃以上，有時會出現(xiàn)咳嗽和支氣管肺炎。患病牛羊的臨床癥狀嚴重不一，有的呈急性發(fā)病經(jīng)過，有的呈慢性發(fā)病經(jīng)過，有的呈現(xiàn)隱性發(fā)病經(jīng)過。流產(chǎn)型主要發(fā)生在初次妊娠的牛羊群體當中，潛伏周期較長能夠達到50～90天，臨床上表現(xiàn)為流產(chǎn)，產(chǎn)下死胎、僵尸胎或者產(chǎn)下弱胎。流產(chǎn)大多發(fā)生在妊娠的最后一個月，流產(chǎn)之后患病的牛羊會從陰道當中持續(xù)排出膿性分泌物，排毒時間能夠達到一周以上，胎衣常常滯留在子宮當中，引發(fā)胎衣腐爛變質。流產(chǎn)階段患病羊表現(xiàn)為高熱癥狀，體溫升高到39℃，最高升高到42℃，有些母牛和母羊因為繼發(fā)感染細菌導致子宮內(nèi)膜炎死亡。第1次爆發(fā)流行該種疾病之后養(yǎng)殖場的流產(chǎn)率能夠達到20%～30%以后，每年的流產(chǎn)率在5%左右，流產(chǎn)的高低與養(yǎng)殖場初產(chǎn)母羊母牛的數(shù)量密切相關，一般流產(chǎn)過一次的母牛和母羊不會再次流產(chǎn)。結膜炎型大多發(fā)生在綿羊群體和育成牛羊群體當中，發(fā)病過程通常在2～4周，衣原體入侵眼結膜之后，導致結膜上皮細胞角質空泡化，形成了初體和原生小體，從而引發(fā)一系列的結膜病變，此時患病牛羊害怕強光照射，羞明流淚，眼結膜潮紅充血，但整體造成的死亡率相對較低。關節(jié)炎型大多發(fā)生在羔羊群體當中，初期階段，體溫升高到40℃，最高升高到41℃，不能正常采食，利群獨居，全身肌肉僵硬，行走時一瘸一拐，觸摸關節(jié)囊夠感覺到疼痛，隨著病情的進一步發(fā)展，患病羊的跛行癥狀逐漸加重，不能夠正常站立或者長時間臥地不起。

③病理特征

通過對不同種類的羊群進行進一步的解剖處理，可以發(fā)現(xiàn)大多數(shù)羊群會表現(xiàn)出差異性的病理特征，有些羊群表現(xiàn)為十二指腸黏膜充血出血，部分回腸黏膜會存在大量的出血點或者潰瘍，病灶長期薄淋巴結會出現(xiàn)腫大的現(xiàn)象，胸膜、心外膜、脾臟和膀胱黏膜表面會存在點狀出血。流產(chǎn)的妊娠母羊和母牛主要表現(xiàn)為乳腺一葉或者雙葉較為堅硬并表現(xiàn)出不同程度的乳房炎，胎兒胎膜表面會出現(xiàn)不同程度的充血水腫現(xiàn)象，體表皮膚表面會存在大量的出血點，內(nèi)臟器官黏膜存在淤血點。通過將病死羊到關節(jié)切開之后，可以發(fā)現(xiàn)關節(jié)囊壁會存在結締組織增生的現(xiàn)象，并且有漿液性的內(nèi)容物，關節(jié)腔當中會存在纖維素性或者膿性的滲出物，滑液囊、腱鞘也會出現(xiàn)不同程度的炎癥病變。

3、綜合防治

對于牛羊衣原體病，除了進行流行病學調(diào)查，掌握該種疾病在養(yǎng)殖場的發(fā)生流行情況之后，也需要構建綜合性的防控措施，切斷病源的傳播渠道，確保養(yǎng)殖安全。防控牛羊衣原體病應該從以下幾個方面入手：

①加強養(yǎng)殖管理

注重做好羊群牛群的針對性管理工作，嚴格控制圈舍當中的養(yǎng)殖密度，維持合理的溫度和濕度，確保圈舍通風良好。根據(jù)牛羊不同生長發(fā)育階段，做到科學配制飼料，消除和減少環(huán)境當中的多種應激刺激。另外養(yǎng)殖場需要堅持自繁自育，全進全出的養(yǎng)殖管理方式，避免在養(yǎng)殖場當中養(yǎng)殖其他牲畜類動物，做好鳥類的管理，防止鳥類和牛群羊群頻繁接觸，杜絕外來動物進入到養(yǎng)殖場當中。此外日常要做好環(huán)境的清理和衛(wèi)生消毒，殺滅環(huán)境當中的吸血昆蟲。及時清除圈舍當中的糞便，堆積發(fā)酵，減少環(huán)境病原數(shù)量。

②強化疫苗免疫接種

在持續(xù)做好牛羊衣原體病流行病學調(diào)查的基礎上，對于受感染的牛群和羊群應該每年的4月和10月份對羊群進行一次全面的篩選，檢測為陽性的牛羊應該及時進行清理處理，對原有的牛羊群做出有效的凈化，并落實衛(wèi)生消毒制度，及時清理牛群羊群的排泄物以及胎衣碎片，防范疫情的傳播蔓延。在衣原體病流行的地區(qū)，應該選擇使用牛羊衣原體油佐劑卵黃滅活疫苗，對公羊母羊公牛母牛進行針對性的免疫接種，這樣能夠產(chǎn)生較好的免疫保護力，起到預防的效果在，此基礎上還需要加強抗體水平監(jiān)測和病原有效篩選，要保證牛羊群的抗體水平能夠維持在70%以上，當抗體水平不足時，要及時進行補充免疫接種，發(fā)現(xiàn)患病牛羊應該及時將其淘汰處理，從而達到逐步凈化牛羊群的目的。

③嚴格落實消毒制度

日常要加強環(huán)境的有效清理，落實衛(wèi)生消毒制度，保障養(yǎng)殖環(huán)境清潔健康，所有的出入口應該設置專用的消毒通道，在衣原體病發(fā)生流行的高發(fā)期和易發(fā)階段，應該定期使用2%的來蘇爾溶液，1%的氫氧化鈉溶液，0.1%的高錳酸鉀溶液，以及0.1%的福爾馬林溶液對圈舍運動場以及養(yǎng)殖管理用具進行徹底的消毒，并保證輪換交替使用消毒劑，消滅養(yǎng)殖場的傳染源，降低該種疾病發(fā)生流行幾率。

綜上所述，衣原體病是一種危害較為嚴重的人畜共患傳染性疾病，能夠在多種牲畜群體當中廣泛傳播蔓延，引發(fā)不同種類動物的多樣癥候群。牛羊感染因原體之后大多表現(xiàn)為流產(chǎn)早產(chǎn)，產(chǎn)下死胎，并表現(xiàn)出關節(jié)炎、肺炎、腦脊髓炎和嚴重的腹瀉，總公羊、種牛會導致睪丸炎癥病變。為了將牛羊衣原體病的發(fā)生流行率降低到最小程度，就需要飼養(yǎng)管理人員注重做好流行病學調(diào)查工作，明確各種疾病的流行特點，流行趨勢，并結合最終的流行病學調(diào)查結果來追蹤疫情，及時采取措施進行有效的防控，構建綜合性的防治措施，確保早發(fā)現(xiàn)早處理，在短時間內(nèi)控制病情，避免造成更為嚴重的經(jīng)濟損失。

（作者單位：811399青海省黃南藏族自治州同仁市雙朋西鄉(xiāng)農(nóng)牧業(yè)技術服務站）