基于氣相色譜法的帕瑞昔布鈉中殘留溶劑測定分析

盧桂清,吳姍娜

(廈門大學附屬第一醫院,福建 廈門 361000)

帕瑞昔布鈉是屬于特異性的環氧合酶-2 (COX-2)抑制劑屬于特異性抑制劑的一種,該藥物應用于慢性、急性疼痛鎮痛治療中,通過抑制COX-2使得患者的前列腺素生成被抑制,起到明顯鎮痛效果。帕瑞昔布鈉作為非甾體抗炎藥的一種,主要給藥方式為靜脈滴注、肌肉注射,臨床應用率較高[1-2]。帕瑞昔布鈉制作需要使用白色粉末,可溶于水,268℃熔點。該藥物合成中需要使用有機溶液二氯甲烷、甲醇、乙醇、環己烷等,根據《中華人民共和國藥典》相關要求,需要對該藥物有機溶液殘留量進行控制,以有效確保藥物品質。在帕瑞昔布鈉質控過程中,頂空進樣毛細管氣相色譜法測定準確性較高,建立該種檢驗方法實用意義較高[3-4]。本文研究對殘留溶劑測定(帕瑞昔布鈉)進行分析,探究氣相色譜法應用可行性,報告如下。

1 儀器及材料

1.1 實驗儀器

Agilent DB-624毛細管柱(30 m×0.32 mm,1.8μm)、電子分析天平(BS124S;德國Sartorius股份有限公司)、頂空進樣器(7697A)、氫空一體機(HA-300;北京中惠普分析技術研究所)等。

1.2 材料

帕瑞昔布鈉(成都克萊蒙醫藥科技有限公司)、N,N-二甲基甲酰胺(HPLC級;上海星可高純溶劑有限公司)、正己烷(HPLC級;上海星可高純溶劑有限公司)、無水乙醇(HPLC級;上海星可高純溶劑有限公司)、二氯甲烷(HPLC級;成都科龍化工試劑廠)、乙酸乙酯(HPLC級;天津科密歐化學試劑有限公司)、三乙胺(HPLC級;天津科密歐化學試劑有限公司);4-二甲氨基吡啶(HPLC級;上海易勢化工有限公司)。

1.3 測試樣品配置

混合對照溶液:選取適量二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺,制成要求(0.55 mg乙醇+0.06 mg二氯甲烷+0.029 mg正己烷+0.032 mg三乙胺+0.5 mg乙酸乙酯+0.5mg 4-二甲氨基吡啶)/mL,20mL頂空瓶中放置,密封。

對照溶液:二甲基亞砜+實驗溶劑(包括二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺),分別進行配置,100mL量瓶中放置,稀釋定容至刻度。

供試溶液:帕瑞昔布鈉原料藥約100mg,頂空瓶中防治,精密量取1.0mL二甲基亞砜溶解,密封。

2 結果

2.1 色譜條件分析

經過試驗測定發現,條件B進行二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺測定條件,上述殘留溶劑測定分離度更為理想,詳見表1。

表1 色譜條件

2.2 檢測限情況

使用精密測量儀器,選取適量二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺增加到對照溶液中,放置于不同量瓶中,采用逐級稀釋法,獲得一系列不同濃度溶液,將獲得不同濃度的溶液放置于頂空瓶中密封待測。使用選擇條件B對不同濃度溶液進行測定,記錄色譜圖,以信噪比10:1為檢測限,以信噪比3:1為定量限度,結果見表2。

表2 檢測限情況(μg)

2.3 標準曲線分析

使用精密測量儀器,選取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺0.1mL、0.2mL、0.5mL、0.8mL、1.2mL、1.5mL放置于對照溶液中,分置于10mL量瓶中,按照要求稀釋至要求刻度。使用精密測量儀器,取上述配制溶液1.0mL,放置于20mL頂空瓶中密封,搖勻后獲得標準曲線溶液。對標準缺陷溶液按照“2.1”中條件B進行氣相色譜法測定,各殘留溶劑的質量濃度ρ(單位:mg/L)為橫坐標,峰面積A為縱坐標,進行線性回歸分析,結果顯示二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺在各自的質量濃度內線性關系良好,詳見表3。

表3 線性回歸方程、相關系數

2.4 精密度、穩定性情況

使用精密測量儀器,選取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷混合對照溶液1.2mL放置于頂空瓶內,共計選取8份,密封處理。按照“2.1”條件B進行氣相色譜法測定,記錄色譜圖上二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷色譜峰面積,進行RSD計算,結果顯示二氯甲烷RSD 1.14%、乙醇RSD 1.12%、乙酸乙酯RSD 1.03%、4-二甲氨基吡啶RSD 2.18%、正己烷RSD 2.18%、三乙胺RSD 2.16%,結果表明色譜系統精密度較為理想。選取同一批次帕瑞昔布鈉供試溶液,按照“2.1”條件B進行氣相色譜法測定,結果顯示測定微量乙醇,RSD 1.27%。

使用精密測量儀器,選取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷混合對照溶液,1.2mL放置于頂空瓶內,共計選取8份,密封處理。放置于室溫環境,每間隔1h取溶液,按照“2.1”條件B進行氣相色譜法測定,記錄各個殘留溶劑的峰面積。計算結果顯示二氯甲烷RSD 1.34%、乙醇RSD 1.82%、乙酸乙酯RSD 2.04%、4-二甲氨基吡啶RSD 2.57%、正己烷RSD 2.36%、三乙胺RSD 2.49%,結果表明混合對照溶液在室溫條件下24 h內穩定。

3 討論

帕瑞昔布鈉作為臨床上有效鎮痛的非甾體藥物,可快速鎮痛,改善患者軀體不適感,確保藥物品質可使得藥物效用充分發揮。受藥物制作工藝限制,目前該藥物在制作期間,需要使用乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、三乙胺、4-二甲氨基吡啶等物質,可能存在有機溶液殘留情況,建立一種科學、準確測定方法,對于控制帕瑞昔布鈉質量具有積極意義[5-6]。

氣相色譜法可以進行藥物相關殘留成分、雜質等測定,是目前藥品質量控制中較為常用的技術之一[7]。采用氣相色譜法測定時,根據帕瑞昔布鈉可能存在的乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、三乙胺、4-二甲氨基吡啶等物質特點,選擇相應色譜條件,確保測定結果穩定、準確。因本品需要檢測的有機溶劑的極性應與色譜柱的極性相似,所以采用中極性的6%氰丙基苯基、94%二甲基聚硅氧烷、交聯聚乙二醇為固定相的毛細管柱為色譜柱進行測定。同時測定中,選擇采取頂空進樣的方式,減少色譜系統出現污染情況,進一步提高測定結果的準確性、穩定性。氣相色譜法分析中,尤其考慮到三乙胺、4-二甲氨基吡啶物質的特殊性,在選擇色譜條件時,單獨進行設計,確保測定結果準確可靠[8]。此次研究結果顯示6種殘留溶劑在各自的質量濃度內線性關系良好;氣相色譜法測定帕瑞昔布鈉中殘留溶劑的精密度、穩定性情況理想。

綜上所述,氣相色譜法測定帕瑞昔布鈉中殘留溶劑的精密度、穩定性情況理想。