2021 年某院細菌培養陽性病原菌分布及耐藥性分析*

褚培培，孫潔凡，王紅英，華 軍，孔令軍，2△

（1.江蘇省蘇州市吳江區兒童醫院·蘇州大學附屬兒童醫院吳江院區，江蘇 蘇州 225200； 2.蘇州大學附屬兒童醫院，江蘇 蘇州 225200）

隨著生活方式的改變，感染性疾病的發病率呈逐年升高趨勢。目前，臨床檢測病原菌的常用方法為細菌培養，最常采用的培養標本為血液、糞便、尿液、痰液等。隨著廣譜抗菌藥物的廣泛應用，有關細菌耐藥問題的日漸凸顯，甚至發展成為國際關注的公共問題［1-2］。有研究顯示，我國住院患者抗菌藥物的使用率遠高于國際水平，部分細菌的耐藥率明顯高于發達國家［3］。因此，了解細菌培養陽性病原菌的分布及其耐藥性，可指導臨床用藥。本研究中對2021 年在蘇州大學附屬兒童醫院及吳江院區（以下稱為醫院）就診患兒的病原體及藥物敏感性試驗（簡稱藥敏試驗）報告進行回顧性分析，了解患兒感染病原菌的分布及耐藥率，為兒童臨床感染性疾病的診治提供參考。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

菌株來源：收集醫院2021 年1 月至12 月收治的年齡不超過16 歲患兒的細菌培養報告37 976 份，所有送檢細菌培養的患兒所取標本出具的報告均納入研究范圍，共檢出病原菌3 980株。

儀器：VITKE MS 型質譜分析儀，VITKE 2 Compact型全自動微生物鑒定儀藥敏分析系統，均購自法國生物梅里埃公司。

質控菌種：金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單鮑菌ATCC27853、大腸埃希菌ATCC25922、白假絲酵母菌ATCC90028、鼠傷寒沙門菌ATCC14028，均購自國家衛生健康委員會臨床檢驗中心。

1.2 方法

鑒定與藥敏試驗：各類標本送至細菌室后，嚴格按《全國臨床檢驗操作規程（第4版）》進行操作，采用質譜分析儀進行細菌鑒定，采用全自動微生物鑒定儀藥敏分析系統進行藥敏試驗。

判讀標準：參照美國臨床和實驗室標準化協會（CLSI）抗菌藥物藥敏試驗執行標準判定檢測結果。

1.3 統計學處理

采用SPSS 21.0 統計學軟件分析，計數資料以率（%）表示。

2 結果

2.1 標本來源與分布

2021 年1 月至12 月，共收到送檢標本37 976 份，主要來源于血液（49.19%）、痰液（19.83%）、糞便（14.81%）、中段尿液（13.00%）。詳見圖1。

A.數量 B.構成比圖1 2021年1月至12月送檢標本來源與分布A.Quantity B.Composition ratioFig.1 Source and distribution of submitted samples from January to December 2021

2.2 病原菌來源與分布

標本來源分布：2021 年1 月至12 月，共分離出可能致病菌3 980 株，標本來源于血液、痰液、糞便、中段尿液、耳朵分泌物、膿性分泌物、腦脊液、其他的陽性檢出率分別為2.04%，23.94%，13.14%，10.90%，50.48%，80.57%，8.77%，21.30%。詳見圖2。

A.數量 B.構成比圖2 2021年1月至12月病原菌檢出標本來源與分布A.Quantity B.Composition ratioFig.2 Source and distribution of pathogenic bacteria detected samples from January to December 2021

科室分布：3 980株分離菌中，主要分布于加強監護病房（5.68%）、血液科（4.10%）、新生兒科（2.74%）。詳見表1。

表1 病原菌排前3位的科室分布（n=3 980）Tab.1 Distribution of departments with top 3 pathogenic bacteria（n = 3 980）

菌種分布：3 980株分離菌中，有革蘭陽性菌1 842株（46.28%）、革蘭陰性菌2 053 株（51.58%）、真菌85 株（2.14%）；革蘭陽性菌中，排前3 位的為肺炎鏈球菌（604株）、金黃色葡萄球菌（581株）、屎腸球菌（261株）；革蘭陰性菌中，排前3位的分別為沙門菌屬（726株）、大腸埃希菌（312株）、流感嗜血桿菌（271株）。詳見圖3。

A.病原菌 B.革蘭陽性菌 C.革蘭陰性菌圖3 2021年1月至12月病原菌檢出情況A.Pathogenic bacteria B.Gram - positive bacteria C.Gram -negative bacteriaFig.3 Detection of pathogenic bacteria from January to December 2021

2.3 細菌耐藥性分析

肺炎鏈球菌：未發現對萬古霉素、利奈唑胺耐藥的菌株，對亞胺培南、頭孢哌酮舒巴坦、頭孢曲松、頭孢呋辛的耐藥率分別為19.70%，3.31%，44.04%，48.01%。詳見表2。

表2 革蘭陽性菌與革蘭陰性菌對常用抗菌藥物的耐藥率Tab.2 Resistance rates of Gram - positive and Gram - negative bacteria to commonly used antibiotics

金黃色葡萄球菌：未發現對利奈唑胺、萬古霉素、替考拉寧耐藥的菌株，對青霉素、頭孢西丁、氨芐西林的耐藥率分別為89.85%，100.00%，100.00%。詳見表2。

沙門菌屬：對慶大霉素、阿米卡星、頭孢唑林、亞胺培南、美羅培南、氨芐西林、哌拉西林、哌拉西林他唑巴坦的耐藥率分別為100.00%，100.00%，100.00%，4.41%，4.41%，75.62%，75.62%，5.92%。詳見表2。

大腸埃希菌：未發現對頭孢哌酮舒巴坦耐藥的菌株，對亞胺培南、美羅培南、氨芐西林的耐藥率分別為14.10%，14.42%，85.58%。詳見表2。

3 討論

3.1 標本來源分析

研究顯示，長期感染會嚴重影響患兒的生長發育［4］，故積極控制感染尤為重要。目前，通常采用細菌培養進行病原菌查找。本研究中通過對2021 年在醫院就診患兒的細菌培養陽性的病原菌分布及其耐藥性進行分析，以科學指導臨床用藥，減少細菌耐藥性。

2021 年，醫院共有37 976 份標本送細菌培養，其中血培養標本18 681 份（49.19%），但陽性檢出率僅2.04%，提示細菌血培養陽性檢出率低；檢出率最高的為膿性分泌物標本，陽性檢出率為80.57%，這與王孟麗［5］、郝春艷等［6］的檢測結果一致。血培養陽性檢出率低受多重因素影響，包括血液標本的采集時間，標本量、血液中病原菌的數量等。膿性分泌物因標本量少，且膿液分泌較集中，故陽性檢出率相對較高。

3.2 病原菌來源分析

本研究中分離的病原菌以革蘭陰性菌為主（51.58%），與文獻［7 - 9］的研究結果一致。革蘭陰性菌中排前3位的菌屬分別為沙門菌屬（35.36%）、大腸埃希菌（15.20%）、流感嗜血桿菌（13.20%）。分析原因，可能與革蘭陰性菌多寄生在皮膚黏膜，當機體免疫力較低或皮膚黏膜受損時，能通過黏膜沿破損皮膚感染相關。曹慧軍等［10］研究發現，革蘭陽性菌占比較高，占比較高的菌屬分別為凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌屬。而本研究中共分離出革蘭陽性菌1 842 株，排前3 位的菌屬分別為肺炎鏈球菌（32.79%）、金黃色葡萄球菌（31.54%）、屎腸球菌（14.17%）。可見，血流感染的主要微生物種類在不同醫院存在差異，故應強調個體化用藥的重要性。本研究中共分離出真菌85 株（2.14%），低于方盼盼等［11］的2.99%。目前，醫院內真菌檢測的陽性率低、檢測周期長，故應改變真菌檢測手段。下一代測序（NGS）是一種高通量測序技術，為真菌的檢測提供了新的檢測手段［12］，但其檢測費用高，在臨床尚未普遍應用。

3.3 耐藥性分析

在藥敏試驗結果方面，醫院2021年分離出排前4位的細菌分別為沙門菌屬（35.36%）、金黃色葡萄球菌（32.79%）、肺炎鏈球菌（31.54%）、大腸埃希菌（15.20%），其中沙門菌屬和大腸埃希菌屬革蘭陰性菌，金黃色葡萄球菌和肺炎鏈球菌屬革蘭陽性菌。沙門菌屬廣泛存在于自然界，可通過污染食物或水源經口感染，是引起感染性腹瀉和食物中毒的重要病原菌［13］，是目前醫院糞便和血液標本中最常見的類型，對頭孢唑林、阿米卡星、慶大霉素完全耐藥，對美羅培南、亞胺培南的耐藥率為4.41%，對氨芐西林、哌拉西林的耐藥率為75.62%，這與羅璇等［14］的研究結果一致。但沙門菌屬對其合成用藥哌拉西林他唑巴坦的耐藥率為5.92%，對頭孢他啶、頭孢噻肟等第3 代頭孢的效果較好，且相對安全，可作為首選藥物。王晶等［15］研究發現，大腸埃希菌在血流感染中可占首位。

由于超廣譜β-內酰胺（ESBLs）大腸埃希菌的出現，給臨床帶來極大困擾。PETTY 等［16］利用基因組測序發現，攜帶ESBLs 基因的質粒常同時攜帶多種耐藥基因。因此，ESBLs 大腸埃希菌常為多重耐藥菌，對其藥物敏感度的研究對臨床院感的防控與治療具有積極意義。本研究中大腸埃希菌對亞胺培南、美羅培南、哌拉西林他唑巴坦的耐藥率約為15.00%，對氨芐西林的耐藥率為85.58%，對臨床常用的β-內酰胺類抗菌藥物頭孢噻肟及頭孢呋辛的耐藥率約為50.00%，對頭孢西丁、頭孢他啶、頭孢比肟的耐藥率約為20.00%，可優先選擇。

金黃色葡萄球菌是一種能引起人和動物發生多種疾病的革蘭陽性菌，可通過免疫逃逸的方式導致宿主持續性感染及誘導細胞死亡，引起心包炎、腦膜炎、敗血癥、膿毒血癥等嚴重感染性疾病［17-18］。本研究中金黃色葡萄球菌對替考拉寧、萬古霉素、利奈唑胺完全敏感，對青霉素的耐藥率為89.85%，對頭孢西丁及氨芐西林完全耐藥，對左氧氟沙星、四環素、環丙沙星的耐藥率均低于10%，可能由于此類藥物副作用大，在兒童中應用較少相關。因此，萬古霉素、替考拉寧等可作為首選藥物。

肺炎鏈球菌在正常人群中可在鼻咽部定植，是細菌感染性疾病的主要致病菌，在2 歲以下幼兒中多見［19］。支氣管肺炎是5歲以下患兒死亡的主要原因［20］，而肺炎鏈球菌就是引起呼吸道疾病的常見病原菌［21］。本研究中未發現對萬古霉素、利奈唑胺耐藥的菌株，對頭孢噻肟、頭孢呋辛的耐藥率約為50.00%，對頭孢哌酮舒巴坦的耐藥率為3.31%，這與劉長鵬等［19］的研究結果基本一致。綜合考慮，頭孢哌酮舒巴坦、萬古霉素、利奈唑胺可作為首選藥物。

3.4 小結

通過對醫院2021年病原菌分布及耐藥性的分析可知，醫院就診患兒的病原菌主要為革蘭陰性菌，可為感染性疾病臨床經驗使用抗菌藥物提供依據。對于革蘭陰性菌，根據經驗優先選擇β- 內酰胺類抗菌藥物，根據感染程度可選擇亞胺培南、美羅培南等；對于革蘭陽性菌，首選萬古霉素、利奈唑胺等。據報道，美羅培南是革蘭陰性菌的首選用藥，但目前在大腸埃希菌中的耐藥率高達14.42%［22-23］。提示隨著抗菌藥物的廣泛應用，其耐藥問題日趨嚴峻，甚至最近幾年關于萬古霉素耐藥性的報道也愈來愈多。故科學、合理選擇抗菌藥物至關重要，應根據耐藥性試驗結果進行個體化用藥，以減少耐藥性，提高治療的準確性。