不同供應商十八醇對鹽酸嗎啡緩釋片關鍵質量屬性的影響*

董澤民，余春梅，熊莉平，徐 潔，羅立駿，曾令高△

（1.西南藥業股份有限公司，重慶 400038； 2.重慶市食品藥品檢驗檢測研究院·國家藥品監督管理局麻醉精神藥品質量監測重點實驗室，重慶 401121）

癌性疼痛臨床治療主要采用三階梯療法，嗎啡為第三階梯代表藥物，主要用于治療中度或重度癌性疼痛，但近年來有報道其可用于治療急性心肌梗死并急性肺水腫［1］。目前，國內上市的嗎啡緩釋片僅有硫酸嗎啡緩釋片（商品名美施康定，萌蒂< 中國> 制藥有限公司）和鹽酸嗎啡緩釋片（商品名美菲康，西南藥業股份有限公司）。鹽酸嗎啡緩釋片以十八醇為緩釋骨架材料，通過熔融法制粒壓片包衣，產品在體內外均具有12 h 緩慢釋放的特征，臨床療效顯著［2-5］，可克服嗎啡生物半衰期短、需頻繁給藥的缺點。十八醇作為鹽酸嗎啡緩釋片的釋藥控制型輔料，其來源變化可能會對產品關鍵質量屬性造成影響。根據《已上市化學藥品藥學變更研究技術指導原則（試行）》［6］，口服緩釋制劑處方中釋藥控制性輔料的供應商變更屬于微小變更，變更后樣品應符合質量標準規定，藥物溶出曲線應與變更前一致，應對變更后生產的樣品進行穩定性考察。本研究中采用不同供應商的十八醇制備鹽酸嗎啡緩釋片，考察其對制劑晶型、硬度、脆碎度、含量、有關物質、溶出曲線等關鍵質量屬性的影響及制劑的穩定性。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LD3100-1 型電子天平（沈陽龍騰電子有限公司，精度為十分之一）；DF-101S型集熱式恒溫加熱攪拌器（鄭州科豐儀器設備有限公司）；YK - 160 型搖擺式顆粒機（常州市振力干燥設備有限公司）；ZP10A型旋轉式壓片機（北京新龍立科技有限公司）；BG1-5 型高效包衣機（中國航空工業集團公司北京航空制造工程研究所）；SHH-500SD型藥品穩定性試驗箱，SHH-300GD-2 型藥品強光照射試驗箱，均購自重慶市永生實驗儀器廠；SY-3型片劑多用測定儀（上海黃海藥檢儀器有限公司）；ME203E型電子天平（梅特勒-托利多儀器<上海> 有限公司，精度為千分之一）；FADT-1202RC型自動溶出度儀（上海富科思分析儀器有限公司）；1260VWD型高效液相色譜儀（Agilent 科技有限公司）；XRD-700010300型X射線粉末衍射儀（日本Shimadzu公司）。

1.2 試藥

鹽酸嗎啡原料藥（青海制藥廠有限公司，批號為20171004）；十八醇（供應商A，湖南爾康制藥股份有限公司，批號為105220170602；供應商B，江西阿爾法高科藥業有限公司，批號為20180101）；羥丙甲纖維素（陶氏化學公司，批號為D011F3CL01）；硬脂酸鎂（湖州展望藥業有限公司，批號為20170115）；胃溶型薄膜包衣預混劑（上海卡樂康包衣技術有限公司，批號為SH599531）；水為純化水；嗎啡對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為043-9209，含量為100.0%）；雜質A（可待因）對照品（批號為170317，含量為94.2%），雜質B（偽嗎啡）對照品（批號為170720，含量為97.9%），雜質C（東罌粟堿）對照品（批號為170718，含量為95.1%），雜質D（10 - 羥基嗎啡）對照品（批號為170914，含量為95.9%），雜質E（嗎啡酮）對照品（批號為170520，含量為92.3%）；雜質F（N-氧嗎啡）對照品（批號為170523，含量為94.3%），購于上海醫藥工業研究總院。

2 方法與結果

2.1 原輔料相容性試驗

按《化學藥物制劑研究基本技術指導原則》［7］中的相關要求進行原輔料相容性試驗。將鹽酸嗎啡、鹽酸嗎啡分別與供應商A 和B 的十八醇混合物在強光照射條件［照度（5 000 ± 500）lx，紫外100 μW/ cm2）和高溫高濕條件［60 ℃，相對濕度（RH）75%］下考察30 d，分別于第5，10，30 天取樣，比較性狀、有關物質的變化及吸濕增重等項目。

吸濕增重測定：照2020 年版《中國藥典（四部）》中通則9103 藥物引濕性試驗指導原則［8］485測定。取干燥的具塞玻璃稱量瓶，于試驗前1 d 置高溫高濕箱（溫度60 ℃，RH 75%）內，精密稱定質量（m1）；取原料或原輔料混合物適量，平鋪于稱量瓶中，厚度約1 mm，精密稱定質量（m2）。將稱量瓶敞口，并與瓶蓋同置上述高溫高濕條件下5，10，30 d，蓋好稱量瓶蓋，精密稱定質量（m3）。吸濕增重（%）=（m3-m2）/（m2-m1）×100%。

有關物質測定：照2020 年版《中國藥典（四部）》通則0512 高效液相色譜（HPLC）法［8］61測定。取原料或原輔料混合物適量（約相當于鹽酸嗎啡60 mg），置50 mL容量瓶中，加溶劑（1%醋酸溶液，下同）40 mL，振搖、超聲使鹽酸嗎啡溶解，加溶劑定容，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液；精密量取1 mL，加溶劑稀釋至鹽酸嗎啡質量濃度為2.4 μg/mL，作為對照品溶液；另取雜質A、雜質B、雜質C、雜質D、雜質E、雜質F、嗎啡對照品各適量，加溶劑溶解，制成每1 mL 含雜質A，B，C，D，E，F 各6 μg及嗎啡24 μg的溶液，作為系統適用性試驗與雜質峰定位溶液。填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相為庚烷磺酸鈉溶液（A，取庚烷磺酸鈉1.01 g，加水1 000 mL使溶解，用磷酸調pH 至2.6）-甲醇（B），梯度洗脫；檢測波長為230 nm；柱溫為35 ℃；流速為1.5 mL/min。取系統適用性試驗與雜質峰定位溶液20 μL注入液相色譜儀，各色譜峰間的分離度均符合要求，嗎啡色譜峰保留時間約為17 min。精密量取對照品溶液與供試品溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀。供試品溶液色譜圖中，如有與系統適用性試驗溶液中雜質保留時間一致的色譜峰，則按加校正因子的主成分自身對照法以峰面積計算各雜質的含量。

性狀：由于十八醇的熔點為57～60 ℃，故高溫高濕條件下鹽酸嗎啡和十八醇混合物會熔融形成塊狀。2 個供應商的十八醇與鹽酸嗎啡混合物在強光照射及高溫高濕條件下放置30 d 與0 d 相比有關物質無變化，表明2 個供應商的十八醇與鹽酸嗎啡相容性良好，兩者無相互作用。結果見表1。

2.2 鹽酸嗎啡緩釋片制備

鹽酸嗎啡熔點較高且對熱穩定，故采用熔融制粒法制備鹽酸嗎啡緩釋片。將鹽酸嗎啡、羥丙甲纖維素進行預混，加熱十八醇，根據物料狀態可適當攪拌至其完全熔化，加入鹽酸嗎啡、羥丙甲纖維素預混物，不斷攪拌至原輔料混勻，倒出物料，不斷攪拌使其散熱均勻，冷卻至半固體狀時用搖擺制粒機制粒，將顆粒整粒后加入硬脂酸鎂進行總混，使用旋轉壓片機將總混顆粒壓成素片，最后采用胃溶型薄膜包衣預混劑制備包衣液進行包衣。

2.3 十八醇對鹽酸嗎啡緩釋片關鍵質量屬性的影響

晶型：使用X 射線粉末衍射儀檢測鹽酸嗎啡、十八醇及鹽酸嗎啡緩釋片的晶型。測試條件為銅靶，管電流為40 mA，管電壓為40 kV，步長為0.013°，掃描范圍為3°～45°。將樣品均勻置塑料盤中壓平，放入樣品臺操作。結果2 個供應商的十八醇晶型相同，其制備的鹽酸嗎啡緩釋片晶型也相同；鹽酸嗎啡緩釋片的主要晶型特征峰與十八醇相似，且十八醇在片劑制備前后的晶型特征峰完全保留，表明鹽酸嗎啡在片劑制備過程中被十八醇包裹，兩者無相互作用。詳見圖1。

A - B.鹽酸嗎啡緩釋片（輔料十八醇分別源于供應商B和A）C - D.十八醇（分別為供應商B和A） E.鹽酸嗎啡圖1 X射線粉末衍射圖A - B.Morphine Hydrochloride Sustained - Release Tablets（prepared by stearyl alcohol from suppliers B and A respectively） C - D.Stearyl alcohol（suppliers B and A respectively） E.Morphine hydrochlorideFig.1 X - ray powder diffraction pattern

硬度：取供應商A 和B的十八醇所制備鹽酸嗎啡緩釋片素片各10片，使用片劑多用測定儀測定樣品硬度。結果2 種片劑的平均硬度分別為5.80，5.87 kg，RSD分別為3.65%，3.24%（n=10），表明2 個供應商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的硬度無顯著差異。

脆碎度：照2020 年版《中國藥典（四部）》通則0923片劑脆碎度檢查法［8］131檢查，取供應商A 和B 的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片素片各6.5 g，精密稱定初始質量，置片劑多用測定儀圓筒中，轉動（轉速為25 r/min）4 min，取出，吹去粉末，精密稱定質量，計算減失質量，觀察有無斷裂、龜裂及粉碎的片。結果2 種片劑的減失質量分別為0.17%，0.15%，無顯著差異，且均無裂片與碎片，表明2個供應商十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的脆碎度無顯著差異。

含量：照（2020 年版《中國藥典（四部）》通則0512 HPLC 法［8］61測定。填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相為甲醇-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液（1∶4，V/V）；檢測波長為280 nm。取供應商A和B的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片各10片，精密稱定，瑪瑙乳缽研細，取適量（約相當于鹽酸嗎啡35 mg），精密稱定，置250 mL容量瓶中，加水適量，充分振搖使溶解，用水定容，搖勻，用0.45 μm濾膜濾過，精密量取續濾液20 μL，注入液相色譜儀測定，記錄色譜圖；另取嗎啡對照品適量，精密稱定，加流動相溶解并定量稀釋成每1 mL 含0.1 mg 的溶液，按擬訂色譜條件進樣測定，按外標法以峰面積計算含量，結果乘以1.317，即得供試品中的鹽酸嗎啡含量。結果見表2，表明2 個供應商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的含量無顯著差異。

表2 2個供應商的十八醇所制備片劑的含量、有關物質測定結果（%）Tab.2 Determination results of the content and related substance of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers（%）

有關物質：按2.1 項下有關物質測定方法測定。結果見表2，表明2 個供應商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片的有關物質無顯著差異。

溶出曲線：取2個供應商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片，照2020 年版《中國藥典（四部）》通則0931）溶出度與釋放度測定法［8］132測定，以水、pH 1.2 鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液各500 mL為溶出介質，轉速為50 r/ min，依法操作，分別于1，2，3，4，5，6 h 時取續濾液1.5～5.0 mL（自動取樣，取樣口加裝10 μm 過濾頭）作為供試品溶液，并及時在溶出杯中補充相同溫度的溶出介質1.0～5.0 mL。另精密量取含量測定的對照品溶液適量，分別加流動相稀釋成每1 mL 含0.05 mg 的對照品溶液，取適量，并進行含量測定，計算樣品在不同時間的溶出量。采用非依賴模型的相似因子（f2）衡量2 條溶出曲線的相似度，按公式（1）計算。f2值越接近100，認為2 條曲線越相似。一般情況下，f2值高于50，可認為2條曲線具有相似性。

供應商B 的十八醇所制備的片劑在各介質中的溶出速率均略快于供應商A 的十八醇制備的片劑；2種片劑在各溶出介質中溶出曲線的f2均大于50，表明2種片劑在各溶出介質中溶出曲線均相似。詳見圖2。

A.水（f2 = 85） B.pH 1.2鹽酸溶液（f2 = 69） C.pH 4.5醋酸鹽緩沖液（f2 = 67） D.pH 6.8磷酸鹽緩沖液（f2 = 70）圖2 2個供應商的十八醇所制備片劑在不同溶出介質中的溶出曲線A.Water（f2 = 85） B.pH 1.2 hydrochloric acid solution（f2 = 69）C.pH 4.5 acetate buffer（f2 = 67） D.pH 6.8 phosphate buffer（f2 = 70）Fig.2 Dissolution profiles of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers in different media

2.4 穩定性考察

取2個供應商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片，照2020 年版《中國藥典（四部）》指導原則9001 原料藥物與制劑穩定性試驗指導原則［8］457，在溫度（40±2）℃、RH（75± 5）%條件下考察0，3，6 個月。在上述條件下，2個供應商的十八醇所制備片劑均為薄膜衣片，除去包衣后顯類白色；有關物質、溶出度、含量均未見顯著變化。2 種片劑在各時間點的關鍵質量屬性無顯著差異，詳見表3。

表3 2個供應商的十八醇所制備片劑的穩定性考察結果Tab.3 Results of the stability test of tablets prepared by stearyl alcohol from two suppliers

3 討論

我國制藥企業過去存在“重原料，輕輔料”的現象，企業為降低成本而采用劣質輔料曾導致“毒膠囊事件”［9］，甚至出現因替換輔料導致患者用藥后死亡的“齊二藥事件”。國家藥品監督管理局2012 年發布《加強藥用輔料監督管理有關規定》［10］，2016 年發布《關于藥包材藥用輔料與藥品關聯審評審批有關事項的公告》［11］。一系列政策加強了藥用輔料生產企業、藥品制劑生產企業及藥品監督管理部門對藥用輔料的管理與質量保證。近年來，隨著進口藥用輔料在國內的推廣應用及仿制藥質量與療效一致性評價的全面開展［12］，制藥企業越來越重視輔料對制劑關鍵質量屬性的影響。藥用輔料功能性相關指標原則［8］539也被納入《中國藥典》，指導制藥企業選擇與應用輔料。

不同供應商的十八醇雖均符合《中國藥典》規定，但其制備工藝或功能性指標的差異可能對制劑產品質量造成影響，故在進行供應商更換前必須進行產品關鍵質量屬性的對比研究。國家藥品監督管理局藥品審評中心的藥用輔料登記數據顯示，國內僅4家企業具有十八醇的批準文號且登記狀態標識為“A”，其中湖南爾康制藥股份有限公司的十八醇于2008 年獲得批準文號，早于其他企業，且該企業為國內藥用輔料優秀企業之一；江西阿爾法高科藥業有限公司的十八醇具有多種粒徑，還有專供緩釋制劑的定制產品，產品競爭力較強。故本研究中采用供應商A和B的十八醇所制備鹽酸嗎啡緩釋片進行關鍵質量屬性的對比研究。結果顯示，2 個供應商的十八醇制備的產品關鍵質量屬性無顯著差異，且穩定性良好，符合變更制劑處方中輔料供應商相關技術要求［6］。故2 個供應商的十八醇可相互替換，均能保證鹽酸嗎啡緩釋片的質量穩定、可控。

鹽酸嗎啡緩釋片為蠟質類骨架緩釋片，十八醇在處方中作為蠟質緩釋骨架材料，本身不溶解，但在胃腸道環境下可逐漸溶蝕，鹽酸嗎啡可通過孔道擴散和骨架溶蝕相結合的機制而釋放。在釋藥過程中，由于骨架的釋藥面積隨時間而不斷變化，故難以維持零級釋放速率，呈一級速率釋藥［13］。本研究中的2 個供應商的十八醇所制備的鹽酸嗎啡緩釋片在各溶出介質中的溶出曲線相似，但供應商B 的十八醇所制備片劑釋放略快，這可能與十八醇溶解度、熔點等功能性指標相關，需作進一步研究，考察輔料功能性指標與制劑產品溶出速率的相關性，更好地控制制劑質量。