雙歧桿菌與無(wú)癥狀高尿酸血癥的鐵蛋白水平相關(guān)性分析

龔化蘭 何佳 蔣銀淼 任晴葉 高海女

長(zhǎng)期高尿酸血癥會(huì)誘發(fā)痛風(fēng)發(fā)作，未發(fā)生過(guò)痛風(fēng)的高尿酸人群為無(wú)癥狀高尿酸血癥（asymptomatic hyperuricemia，AH）［1］。AH是多種代謝疾病的危險(xiǎn)因素［2］。AH對(duì)機(jī)體的典型損害機(jī)制包括氧化應(yīng)激、促炎因子［3］。其中氧化應(yīng)激是肥胖、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的重要致病因素［4］。鐵蛋白對(duì)體內(nèi)鐵穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要［5］。氧化應(yīng)激水平升高會(huì)上調(diào)鐵蛋白的表達(dá)［6］。研究已證實(shí)鐵蛋白可用于預(yù)測(cè)體內(nèi)氧化應(yīng)激狀況［7］。腸道菌群影響代謝的機(jī)制也包含氧化應(yīng)激［8］。高尿酸血癥患者的腸道菌群失調(diào)主要表現(xiàn)為雙歧桿菌［9］、乳酸桿菌、普拉梭菌的豐度異常［10］。大約25%的尿酸通過(guò)腸道代謝［11］，腸道菌群對(duì)血尿酸水平至關(guān)重要。本研究探討AH的6種腸道菌群與鐵蛋白的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 研究設(shè)計(jì)與對(duì)象 本研究是基于2018年3月至2021年12月本院VIP體檢中心的數(shù)據(jù)進(jìn)行的回顧性研究。采用qPCR方法檢測(cè)10種腸道細(xì)菌來(lái)評(píng)估客戶(hù)的腸道狀況。客戶(hù)在體檢前填的健康調(diào)查表包含關(guān)節(jié)疼痛、痛風(fēng)發(fā)作等病史。其它臨床數(shù)據(jù)包括鐵蛋白、C反應(yīng)蛋白（CRP），總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、空腹血糖（FBS）從體檢結(jié)果中收集。此研究得到了醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，并按照1964年《赫爾辛基宣言》及后來(lái)的修正案中規(guī)定的倫理標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) 所有檢測(cè)了6種腸道菌群（雙歧桿菌、乳酸桿菌、普拉梭菌、丁酸梭菌，柔嫩梭菌、腸桿菌）、鐵蛋白、CRP，且年齡＞18歲的患者是初步研究人群。排除有痛風(fēng)發(fā)作史、近1個(gè)月有急性感染病史、近3個(gè)月內(nèi)有高嘌呤飲食、近3個(gè)月內(nèi)服用抗生素和益生菌者。排除有肝腎功能不全、腫瘤標(biāo)志物水平高、肝炎病毒感染者。排除孕期或哺乳期婦女。

1.3 分組的定義 根據(jù)血尿酸水平分為AH組和健康對(duì)照組。成人高尿酸血癥（HUA）的診斷標(biāo)準(zhǔn)：在正常飲食條件下，空腹血尿酸水平男性≥420 μmol/L，女性≥360 μmol/L［12］。AH的標(biāo)準(zhǔn)為血尿酸水平達(dá)到高尿酸血癥標(biāo)準(zhǔn)，但無(wú)急性關(guān)節(jié)炎癥狀［13］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0軟件。正態(tài)分布的連續(xù)變量以（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以［M（P25，P75）］表示，組間比較采用Mann-Whitney秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以n或%表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。應(yīng)用Logistic回歸分析評(píng)估AH的危險(xiǎn)因素。采用相關(guān)性分析評(píng)估腸道菌群、鐵蛋白、尿酸三者之間的相關(guān)性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床和代謝指標(biāo)的比較 共有708例患者同時(shí)檢測(cè)了六種腸道細(xì)菌、鐵蛋白和CRP。其中31例有明確的痛風(fēng)發(fā)作史，45例因明顯肝功能異常、乙肝病毒感染、腫瘤標(biāo)志物水平高被排除。最后共632例納入研究，其中AH組189例、健康對(duì)照組443例。見(jiàn)表1。

表1 兩組人群的臨床和代謝特征

2.2 兩組腸道細(xì)菌計(jì)數(shù)的比較 這六種腸道細(xì)菌（雙歧桿菌、乳酸桿菌、普拉梭菌、丁酸梭菌，柔嫩梭菌、腸桿菌）的計(jì)數(shù)在AH組均下降，但只有雙歧桿菌的計(jì)數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。雙歧桿菌在AH組的中位數(shù)為7.34×104copies/g，健康對(duì)照組為1.91×105copies/g，P=0.025。見(jiàn)表2。

表2 兩組腸道細(xì)菌計(jì)數(shù)的比較

2.3 Logistic回歸及相關(guān)分析 將雙歧桿菌、性別、年齡、鐵蛋白、BMI、TC、TG、LDL、HDL納入回歸模型。結(jié)果顯示鐵蛋白和BMI均是AH的危險(xiǎn)因素（鐵蛋白：OR=1.002，95%CI：1.000～1.003；BMI：OR=1.156，95%CI：1.034～1.292）。采用Pearson相關(guān)分析比較鐵蛋白分別與尿酸、BMI的相關(guān)程度，結(jié)果顯示鐵蛋白與尿酸的相關(guān)程度（r=0.523，P＜0.001）高于鐵蛋白與BMI（r=0.313，P＜0.001）。進(jìn)一步采用Sperman相關(guān)分析評(píng)估雙歧桿菌與鐵蛋白的相關(guān)性，結(jié)果顯示雙歧桿菌與鐵蛋白呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.134，P=0.001）。

3 討論

尿酸不僅是抗氧化劑［14］也是促氧化劑［15］。尿酸在細(xì)胞內(nèi)可通過(guò)NADPH氧化酶促進(jìn)細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng)和活性氧（ROS）的生成［16］。鐵蛋白是主要的鐵儲(chǔ)存蛋白，其可緩沖Fe3+對(duì)細(xì)胞的氧化損傷［5］。ROS可增加細(xì)胞內(nèi)鐵離子水平，上調(diào)鐵蛋白的表達(dá)［17］。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平增加時(shí)，轉(zhuǎn)錄因子Nrf2與ARE結(jié)合也可上調(diào)鐵蛋白的轉(zhuǎn)錄［18］。鐵蛋白在急性炎癥時(shí)會(huì)升高［19］。本研究通過(guò)選擇無(wú)關(guān)節(jié)炎發(fā)作的AH和比較兩組CRP的水平排除了急性炎癥對(duì)鐵蛋白的影響。盡管鐵蛋白與BMI存在相關(guān)性，但鐵蛋白與UA的相關(guān)性更強(qiáng)。既往的研究也發(fā)現(xiàn)UA可以劑量依賴(lài)的方式刺激鐵蛋白的表達(dá)，而且此作用能被苯溴馬隆所抑制［20］。

體內(nèi)大約25%的尿酸通過(guò)腸道代謝排出［11］，腸道菌群對(duì)血尿酸水平至關(guān)重要［9-10］。本研究也發(fā)現(xiàn)AH組的雙歧桿菌明顯下降。雙歧桿菌是益生菌，可直接用于緩解高尿酸血癥［21］。富含益生元的飲食也可通過(guò)增加雙歧桿菌的豐度來(lái)降低血尿酸的水平［22］。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)雙歧桿菌因含有Sir2基因家族而直接具有抗氧化活性［23］?？诜p歧桿菌可顯著抑制皮膚細(xì)胞內(nèi)紫外線(xiàn)誘導(dǎo)的ROS水平及黃嘌呤氧化酶活性［24］。雙歧桿菌還可通過(guò)調(diào)節(jié)鐵信號(hào)來(lái)抑制TLR4/NF-kB通路相關(guān)的炎癥標(biāo)志物［25］。總之，雙歧桿菌不僅可通過(guò)降尿酸來(lái)影響鐵蛋白，還可直接因其具有的抗氧化活性來(lái)影響鐵蛋白水平。雙歧桿菌可被推廣成為降低AH對(duì)機(jī)體氧化應(yīng)激損害的新方法。