外周血miR-200C、miR-101和CA-724聯合檢測對胃癌的診斷價值

邱天竹,徐同鵬,張皓

(南京醫科大學第一附屬醫院腫瘤科,江蘇 南京 210000)

胃癌通常起源于胃黏膜上皮細胞,早期可能出現的上腹不適、噯氣等癥狀與胃慢性疾病相似,通常見于40～70歲人群,且多見于男性,發病率在我國存在地域性差異[1-2]。研究[3]證實,早期胃癌患者的5年生存率高于晚期胃癌患者。因此,盡早診斷胃癌,采取切實有效的治療方案,是延長胃癌患者生存期的必要條件。胃鏡檢查屬于侵入性檢查,部分患者存在排斥心理,故探尋其他患者易于接受的檢測方法對提升早期胃癌檢出率有重要意義。與傳統診斷方法相比,血清中的腫瘤分子標志物具備操作簡單、易重復的優勢,又因單一指標檢測存在特異度或敏感度較低的問題,故臨床多采用多指標聯合檢測予以診斷。微小RNA(microRNA,miRNA)屬于小分子RNA,可通過與靶mRNA結合來調控mRNA的翻譯或降解來調控特定靶基因的表達[4]。研究[5-6]證實,miRNA的失調與腫瘤細胞發展有關,且不同miRNA的表達可能存在差異。糖類抗原-724(carbohydrate antigen-724,CA-724)是一類高分子量的黏蛋白,可作為輔助診斷、鑒別消化道腫瘤的癌胚抗原[7]。本研究旨在探討miR-200C、miR-101和CA-724聯合檢測對胃癌的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2022年5月南京醫科大學第一附屬醫院收治的112例高度疑似胃癌的患者為研究對象,根據病理檢查結果分為胃癌組(n=69)和良性組(n=43)。胃癌組中男性45例,女性24例;年齡(58.6±5.3)歲。良性組中男性24例,女性19例;年齡(57.7±5.9)歲。本研究經院倫理委員會審核批準,患者及家屬知情同意,兩組患者性別、年齡等一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05)。納入標準:(1)胃癌組患者經病理檢查,符合胃癌診斷標準[8];(2)良性組經病理診斷非胃癌;(3)臨床資料完整者。排除標準:(1)合并其他惡性腫瘤者;(2)存在放化療治療史者;(3)近3個月內存在激素、非甾體抗生素治療史者;(4)合并血液系統疾病、全身感染性疾病、嚴重心肝腎疾病者;(5)合并胃底靜脈曲張、腸道系統疾病者。

1.2 方法

1.2.1 miR-200C、miR-101、CA-724水平檢測 采集患者清晨空腹靜脈外周血6 mL,離心分離血清;采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(RT-qPCR)檢測外周血miR-200C、miR-101表達水平;采用電化學發光法檢測外周血CA-724水平,使用儀器為電化學發光分析儀及配套試劑盒。

1.2.2 胃癌組分組 根據胃癌組患者腫瘤TMN分期、淋巴結轉移情況進行分組。將分期為Ⅰ、Ⅱ期的患者納入早期組(n=28),分期為Ⅲ、Ⅳ期的患者納入晚期組(n=41);將無轉移的患者納入無轉移組(n=26),將存在淋巴結轉移的患者納入轉移組(n=43)。

1.3 觀察指標

(1)胃癌組與良性組、早期組和晚期組、無轉移組和轉移組患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平;(2)miR-200C、miR-101、CA-724對胃癌的診斷價值。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 胃癌組與良性組患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比較

胃癌組患者血清miR-200C、miR-101水平低于良性組,CA-724水平高于良性組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 胃癌組與良性組患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比較

2.2 不同腫瘤分期胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比較

胃癌早期組患者外周血miR-200C、miR-101水平高于胃癌晚期組,CA-724水平低于胃癌晚期組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同腫瘤分期胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比較

2.3 不同淋巴結轉移情況胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比較

胃癌未轉移組患者外周血miR-200C、miR-101水平高于轉移組,CA-724水平低于轉移組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同淋巴結轉移情況胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比較

2.4 外周血miR-200C、miR-101、CA-724對胃癌的診斷價值

ROC曲線分析顯示,外周血miR-200C、miR-101、CA-724單獨及三者聯合診斷胃癌曲線下面積(AUC)分別為0.903、0.889、0.965、0.990,三者聯合檢測診斷的價值高于各指標單獨檢測(P<0.05)。見表4及圖1。

表4 外周血miR-200C、miR-101、CA-724對胃癌的診斷價值

3 討論

隨著我國居民生活水平的提升及生活習慣的改變,吸煙、飲酒、肥胖、高鹽飲食等越來越常見,導致我國胃癌發病呈現年輕化趨勢[9]。由于胃癌早期癥狀不顯著及我國尚未普及胃鏡作為常規檢查,且屬于侵入性,患者通常難以接受,故導致多數患者確診時已進展至晚期。隨著現代分子生物學的進步,血清腫瘤標志物的檢測逐漸運用于提升胃癌的早期診斷率中[10]。由于使用單一的腫瘤標志物檢測存在特異度或敏感度較低的問題,故臨床通常使用多指標聯合檢查來進行胃癌的輔助診斷。

miRNA廣泛存在于人類細胞中,其種類繁多、功能復雜,具備保守性、時序性、穩定性、組織特異性的特質,在腫瘤發生、發展過程中擁有癌基因、抑癌基因的作用,進而影響機體腫瘤細胞的增殖、凋亡過程[11]。miR-200C作為miR-200家族的一員,具備抑癌基因的作用,能通過多個靶標抑制腫瘤細胞的增殖、侵襲[12-13]。miR-101同樣屬于抑癌基因,能通過抑制多個靶基因表達以達到抑制腫瘤細胞的增殖[14]。CA-724是存在于絕大多數胃、肺、胰腺、結腸等惡性腫瘤中的癌胚抗原,屬于構成腫瘤細胞骨架的基本成分之一,在消化道腫瘤中異常升高,對檢測胃癌具備較高的特異度[15]。本研究結果顯示,胃癌組與良性組患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平存在差異(P<0.05),且經ROC曲線分析,外周血miR-200C、miR-101、CA-724聯合診斷的敏感度、特異度均得到提升,表明上述三指標聯合診斷對提升胃癌的診斷效能有一定幫助,推測原因可能在于miR-200C、miR-101均作為抑癌基因,具備抑制癌細胞的增長、擴散的作用,故其低表達會使抑癌作用降低,進而導致腫瘤發生、發展;CA-724的表達上調提示腫瘤細胞大量增殖。既往有研究[16]證實,miR-200C可被用于診斷胃癌,本研究結果佐證了這一觀點。黃光墉等[17]研究同樣認為,miR-101在胃癌患者中表達異常,本研究結果與之一致。

在上皮間質化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)過程中,上皮細胞會逐漸喪失細胞間的鏈接,向周圍浸潤或通過血管轉移。本研究顯示,早期胃癌患者外周血miR-200C、miR-101水平高于晚期患者(P<0.05),CA-724水平低于晚期患者(P<0.05),而未轉移患者外周血miR-200C、miR-101水平與轉移患者比較,水平更高(P<0.05),且CA-724水平更低(P<0.05),推測原因在于胃癌患者隨TNM分期增加、淋巴結轉移使外周血miR-200C、miR-101水平降低,而使CA-724水平上升;miR-200C、miR-101均可抑制腫瘤細胞的EMT過程,能抑制腫瘤細胞擴散、轉移,其水平降低則會促進胃癌的進展及轉移;CA-724在胃癌早期并未大量進入體循環,隨著胃癌患者淋巴結被侵襲,最終使外周血CA-724顯著上升。Kerche等[18]研究也顯示,miR-200C與腫瘤轉移相關,與本研究結果與之相近。

綜上,胃癌患者的外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平與良性病變患者相比存在差異,三指標的聯合檢測對胃癌診斷有重要意義,能有效彌補單項指標檢測存在的缺陷,且外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平與胃癌患者臨床分期、淋巴結轉移有關。