肺腺癌患者EGFR、ALK基因突變與預后的關系*

顧 文,趙曉春,楊麗華,劉 芳,李玲玉,肖 鳳,高紹滿

上海市東方醫院吉安醫院病理科,江西吉安 343000

肺癌是起源于支氣管黏膜或腺體的惡性腫瘤,其中肺腺癌是其重要的組織亞型之一,發病率及病死率均處于較高水平,然而病因目前尚未完全明確,多認為與大氣污染、遺傳因素、吸煙等密切相關[1]。目前臨床以手術、化療、放療、靶向治療等治療方式為主,但手術及放化療為非特異性治療,在取得一定效果的同時導致較多不良反應,且對于部分肺腺癌患者,放化療存在平臺期,療效難以進一步提升,導致患者生存期無法繼續延長。隨著對肺腺癌發生機制研究不斷深入,靶向治療在肺腺癌治療中取得顯著進展。表皮生長因子受體(EGFR)具有酪氨酸激酶活性,可與表皮生長因子(EGF)結合,啟動細胞核內有關基因,促進細胞分裂增殖,EGFR基因突變在腺癌、亞裔、女性、非吸煙者中多見,常見突變點位包含18～21號外顯子。目前表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKIs)靶向治療已成為臨床治療肺癌的重要方法[2-3]。間變性淋巴瘤激酶(ALK)基因是肺腺癌重要的基因,有學者發現,2%～5%的非小細胞肺癌患者都存在ALK基因突變,針對ALK基因突變的靶向小分子抑制劑研究受到高度重視[4-5]。有研究分析了EGFR、ALK基因突變情況與肺腺癌患者病理特征的相關性,以及EGFR、ALK基因突變高風險人群[6]。本研究分析了EGFR、ALK基因突變與肺腺癌患者預后的相關性,以期為臨床靶向治療方案制訂提供依據,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2017年1月至2020年12月于本院實施手術切除肺腺癌的200例患者,隨訪至2022年12月,其中失訪94例。納入標準:(1)符合肺腺癌相關診斷標準[7];(2)未進行過化療且保存有完整石蠟包埋腫瘤標本;(3)均接受靶向治療。排除標準:(1)不符合手術條件者[8];(2)術前出現腫瘤遠處轉移者;(3)言語溝通障礙者。收集患者臨床資料,根據患者2年內肺腺癌復發轉移情況將其分為預后良好組(80例,肺腺癌未復發轉移)與預后不良組(26例,肺腺癌復發轉移)。本研究經醫院醫學倫理委員會審核通過。

1.2方法 (1)標本獲取:通過手術切除獲取原發腫瘤組織標本,石蠟包埋標本進行病理切片并標記腫瘤組織區域,經二甲苯脫蠟、無水乙醇清洗后,嚴格遵循石蠟組織DNA提取試劑盒(德國QIAGEN公司)說明書進行DNA提取。(2)EGFR基因突變采用EGFR基因突變試劑盒(廈門艾德生物醫藥科技有限公司)進行檢測,ALK基因突變采用ALK基因突變檢測試劑盒(廈門艾德生物醫藥科技有限公司)進行檢測。檢測步驟嚴格遵循試劑盒說明書進行,應用實時熒光定量PCR基因擴增儀(BIO-RAD CFX-96)進行分析,觀察樣本與對照孔是否存在突變信號,并觀察突變信號位點Ct值,若無突變信號或Ct值≥29則判定為基因突變陰性。(3)靶向治療:對存在EGFR基因突變的患者實施EGFR-TKIs靶向治療;存在ALK基因突變患者實施氨基砒啶類或二氨基嘧啶類ALK抑制劑治療。患者預后、生存期、無瘤生存率等指標均在靶向治療后比較。

1.3觀察指標 比較兩組肺腺癌患者一般資料和EGFR、ALK基因突變情況;應用COX回歸分析預后的影響因素;分別比較不同EGFR、ALK基因突變情況患者無瘤生存率。

2 結 果

2.1兩組患者基線資料比較 兩組年齡構成、吸煙情況、病理類型、病理分期、EGFR及ALK基因突變情況比較,差異均有統計學意義(P<0.05),而性別、術式比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組患者基線資料比較[n(%)]

2.2肺腺癌患者預后的影響因素分析 COX回歸分析顯示,肺腺癌患者年齡、吸煙情況、病理類型、病理分期、EGFR及ALK基因突變是預后的影響因素(P<0.05)。見表2、3。

表2 變量賦值

表3 肺腺癌患者預后的影響因素分析

2.3不同EGFR基因突變情況患者生存情況比較 EGFR基因突變陽性患者平均無瘤生存期為23.386(95%CI=22.949～23.823)個月,EGFR基因突變陰性患者平均無瘤生存期為21.853(95%CI=20.973～22.732)個月。EGFR基因突變陽性患者無瘤生存率顯著高于陰性患者(Log-Rankχ2=9.806,P=0.002)。見圖1。

圖1 不同EGFR基因突變情況患者無瘤生存曲線

2.4不同ALK基因突變情況患者生存情況比較 ALK基因突變陽性患者平均無瘤生存期為23.362(95%CI=22.930～23.793)個月,ALK基因突變陰性患者平均無瘤生存期為21.802(95%CI=20.857～22.746)個月。ALK基因突變陽性患者無瘤生存率顯著高于陰性患者(Log-Rankχ2=9.370,P=0.002)。見圖2。

圖2 不同ALK基因突變情況患者無瘤生存曲線

3 討 論

精準醫學將基因研究引入臨床癌癥治療中,通過精準檢測、精準診斷提供更針對、更有效的精準治療,減少患者痛苦。隨著人們對肺癌的研究深入,肺癌的診斷已從組織病理檢查深入至分子、基因水平,基因靶向治療為臨床治療肺癌患者的重要方式,但其方案制訂與肺癌患者基因密切相關,需了解患者靶向基因狀態,方可制訂針對性靶向治療方案。其中EGFR屬于跨膜糖蛋白,為上皮生長因子細胞增殖及信號傳導的受體,且具備酪氨酸激酶活性[9],當發生二聚作用后其激酶通路被激活,可通過自磷酸化引導下游磷酸化,導致轉錄信號、應激活化蛋白激酶信號通路等被激活并依次促發基因轉錄、激活與細胞分化、增殖有關的通路,進而誘導細胞增殖[10]。EGFR基因突變為EGFR-TKIs敏感性突變,在亞裔女性、既往無/少量吸煙患者中突變率較高,且使用EGFR-TKIs治療的敏感性也較高,治療效果優于化療[11]。本研究結果發現:預后不良組與預后良好組患者EGFR基因突變率比較,差異有統計學意義(P<0.05),且COX回歸分析顯示,肺腺癌患者EGFR基因突變為預后的影響因素(P<0.05);EGFR基因突變陽性患者生存率顯著高于陰性患者,提示對EGFR基因突變肺腺癌患者實施靶向治療可明顯延長其生存期。原因在于,EGFR基因突變陽性肺腺癌患者可針對性選擇基因靶向治療方案進行治療,EGFR基因突變大多為21號外顯子突變、19號外顯子缺失,可刺激酪氨酸激酶結構域活化,為EGFR-TKIs療效及預后的最佳預測因子。臨床對EGFR基因突變陽性患者可實施基因靶向治療,更精準、高效治療癌癥,并可通過定期觀察EGFR基因狀態評估靶向治療效果、預測患者預后,有利于臨床及時調整治療方案,延長患者生存期[12]。

ALK基因是位于人類2號染色體p23上的基因片段,經基因倒位融合后,通過絲裂原活化蛋白激酶等途徑導致肺腺癌發生。ALK基因突變是非小細胞肺癌中最常見的活化和過表達機制,而ALK基因突變靶向治療為ALK絡氨酸激酶抑制劑在ALK絡氨酸激酶區內進行競爭性結合,從而切斷ALK下游信號傳導通路,以達到理想治療效果[13]。本研究結果中,預后不良組與預后良好組ALK基因突變率比較,差異有統計學意義(P<0.05),且COX回歸分析顯示,肺腺癌患者ALK基因突變為預后的影響因素(P<0.05);ALK基因突變陽性患者無瘤生存率顯著高于陰性患者,提示ALK基因突變肺腺癌患者預后情況、生存期均優于未突變患者。究其原因,臨床實施靶向治療前,需對肺癌驅動基因類型予以檢測,檢出具體驅動基因后,實施針對性靶向治療,在檢測出ALK基因突變后,臨床治療開始時即可進行靶向治療,并通過檢測基因突變狀態,判斷治療效果。而ALK突變陰性患者,仍需使用放化療、手術等治療方案,不良反應較多且治療效果存在平臺期,需進一步尋找新的治療靶點,可能導致臨床部分患者錯失腫瘤最佳控制時間,降低其生存率[14-15]。

發生EGFR、ALK基因突變的肺腺癌患者可實施靶向治療來提高療效、延長生存期,但本研究納入例數較少,ALK基因突變率較低,且缺少分析EGFR、ALK基因突變點位與預后的相關性分析,臨床可進一步擴大樣本量,進行深入分析。

綜上所述,EGFR、ALK基因突變在肺腺癌患者靶向治療中均與預后有關,EGFR、ALK基因突變陽性患者生存期均長于陰性患者。