乙型肝炎血清標志物與HBV-DNA定量檢測對診斷乙型肝炎的臨床價值研究

張秋燕

【摘要】? 目的? ? 探討乙型肝炎血清標志物與乙型肝炎病毒基因（HBV-DNA）定量檢測對診斷乙型肝炎的臨床價值。方法? ? 選取疑似乙型肝炎患者160例，均接受乙型肝炎血清標志物與HBV-DNA定量檢測，分析其對乙型肝炎的診斷效果。結果? ? 本組患者HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性82例，HBsAg、HBcAb與HBeAb均為陽性60例，其他異常結果18例；82例HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性的患者HBV-DNA陽性率最高，差異有統計學意義（P<0.05）；HBV-DNA陽性患者中HBeAg陽性率高于HBsAg陽性率，差異有統計學意義（P<0.05）。結論? ? 乙型肝炎血清標志物與HBV-DNA定量檢測對乙型肝炎均具有較高的診斷價值。

【關鍵詞】? 乙型肝炎；血清標志物；陽性肝炎病毒基因；定量檢測；診斷

中圖分類號：R446.11+1? ? ? ? 文獻標識碼：A

文章編號：1672-1721（2023）08-0065-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.08.022

乙型肝炎屬于常見的傳染性疾病，患者可出現乏力、惡心、嘔吐等癥狀，若治療不及時或效果不佳，則會對其身心造成嚴重損傷，甚至可能發展為肝硬化或肝癌，對生命產生威脅[1]。隨著乙肝疫苗的普及，我國居民乙型肝炎病毒感染率明顯降低，但乙型肝炎發病率仍居全球前列，因此做好乙型肝炎診治工作，對于防控疾病，改善患者預后具有積極作用。目前臨床上在對乙型肝炎進行診斷時，乙型肝炎血清標志物與乙型肝炎病毒基因（HBV-DNA）定量檢測均屬于常用方法，乙型肝炎血清標志物是對機體HBV感染以及免疫應答反應予以反映的重要指標，其在臨床上的應用已經十分成熟。當HBV對機體造成感染后，會導致肝臟發生炎癥反應，若未能得到及時治療可能造成多器官損傷。HBV感染評估應用的血清標志物主要為HBsAg，若血清HBsAg呈現為陽性，則表明機體受到HBV感染。HBeAb是對機體是否出現HBsAg刺激后發生免疫應答的標志物，可對HBV感染后病毒復制處在相對靜止的狀態予以反映，若HBeAb為陽性，則表明患者的病情暫時未出現進一步的發展；HBeAg是HBV感染的主要標志物[2]。HBV病毒具備部分雙鏈DNA，在DNA片段上記載有遺傳信息，可通過DNA片段來實現病毒復制和增殖。HBV-DNA屬于裸露DNA，其并未被蛋白包裹，可對宿主產生單獨的侵襲，在進入到宿主體內可形成完整DNA顆粒。HBV-DNA可對乙型肝炎的傳染性與病毒復制量予以反映，在疾病治療中可起到有效的參考作用。目前對于乙型肝炎血清標志物與HBV-DNA定量檢測的具體應用效果仍需開展進一步研究[3]。本文選取疑似乙型肝炎患者160例，探討乙型肝炎血清標志物與HBV-DNA定量檢測對診斷乙型肝炎的臨床價值，報告如下。

1? ? 資料與方法

1.1? ? 一般資料? ? 選取2019年3月—2020年6月莆田學院附屬醫院收治的疑似乙型肝炎患者160例，男105例，女55例，年齡32～72歲，平均年齡（45.26±5.32）歲。全部患者均對研究內容知情同意，排除肝硬化、肝癌患者。

1.2? ? 研究方法? ? 同時采集受檢者空腹靜脈血兩份，3 500 r/min離心5 min備用。一份血液標本采集后24 h內用來檢測乙型肝炎血清標志物，采用雅培ARCHITECT i2000化學發光儀及其配套試劑（化學發光微粒子免疫檢測技術）。陽性判斷標準：HBsAg水平達到0.05 IU/mL，HBeAg的S/CO達到1.0及以上，HBsAb水平達到10 mIU/mL，HBeAb的S/CO為1.0及以下，HBcAb的S/CO達到1.0及以上。另一份血液標本離心冷藏3 d后用來檢測HBV-DNA，采用ABI 7500實時熒光定量PCR儀，試劑采用中山大學達安基因股份有限公司的乙型肝炎核酸定量檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）。陰性判斷：HBV-DNA濃度低于500 cps/mL。

1.3? ? 觀察指標? ? （1）不同乙型肝炎類型患者HBV-DNA陽性率，包括HBsAg、HBcAb與HBeAg陽性，HBsAg、HBcAb與HBeAb陽性，其他異常患者；（2）比較HBV-DNA結果與乙型肝炎血清標志物結果。

1.4? ? 統計學方法? ? 采用SPSS 23.0統計學軟件分析數據，計數資料以百分比表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? ? 結果

2.1? ? 乙型肝炎血清標志物結果? ? 本組患者接受乙型肝炎血清標志物檢查后，HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性82例，HBsAg、HBcAb與HBeAb均為陽性60例，其他異常結果18例。

2.2? ? 不同乙型肝炎血清標志物結果患者的HBV-DNA陽性率比較? ? 82例HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性的患者的HBV-DNA陽性率最高，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.3? ? HBV-DNA結果與乙型肝炎血清標志物結果比較? ? HBV-DNA陽性患者中HBeAg陽性率高于HBsAg陽性率，差異有統計學意義（χ2=5.802，P=0.016），見表2。

3? ? 討論

乙型肝炎病毒感染在世界范圍內均具有較高的發病率，根據世界衛生組織的報道，全球慢性乙型肝炎病毒感染患者數量大約為2.57億，其中非洲地區以及西太平洋地區患者數量占總數的68%左右[4]。全球每年由于慢性乙型肝炎病毒感染引發死亡的患者數量為88.7萬人左右，其中慢性乙型肝炎病毒感染所致肝硬化占52%，原發性肝細胞癌所占比例為37%[5]。亞洲慢性乙型肝炎病毒也存在地區性流行差異，大部分亞洲地區屬于中至高流行區，少部分亞洲地區屬于低流行區。乙型肝炎病毒可通過母嬰、血液以及性接觸傳播，隨著乙肝疫苗的普及推廣，我國居民乙型肝炎病毒感染率明顯降低，但乙型肝炎發病率仍居全球前列，因此做好乙型肝炎診治工作，對于防控疾病，改善患者預后具有積極作用[6]。慢性乙型肝炎屬于常見的傳染性疾病，患者可出現乏力、惡心、嘔吐等癥狀，若治療不及時或效果不佳，甚至可能發展為肝硬化或肝癌，對生命產生威脅。當患者確診為慢性乙型肝炎后，需保障充足休息，并為患者提供合理營養，同時為其應用藥物治療作為輔助。為改善疾病預后，需使患者的疾病得到盡早診斷。

乙型肝炎血清標志物為診斷乙型肝炎感染的主要標志物，是臨床上傳統檢測項目，但乙型肝炎血清標志物無法對患者體內病毒復制情況進行反映，因此存在一定局限性。有研究報道，乙型肝炎診斷中HBV-DNA定量檢測具備較高的靈敏度，體內血清中存在微量HBV即可被檢出，從而使疾病得到早期診斷[7]。通過開展聚合酶鏈式反應檢查，可使HBV-DNA水平得到特異性反映，具備比乙型肝炎血清標志物更高的靈敏度與特異度。HBV-DNA檢測不但可使乙型肝炎患者體內的病毒復制活性得到評價，而且可實現病情動態監測，在為乙型肝炎患者實施抗病毒治療時，通過監測患者的乙肝病毒DNA定量變化，是對治療效果進行評估的主要指標之一。在實施抗病毒治療后，若患者機體的病毒DNA定量降低較為明顯，甚至由陽性轉變為陰性，則提示抗病毒治療取得較好的效果；若患者的病毒DNA定量無明顯變化，則表明抗病毒治療的效果不佳，需針對性調整治療方案，以取得更好的治療效果。有資料顯示，將乙型肝炎血清標志物與HBV-DNA聯合應用，可有效評估乙型肝炎病毒復制活性與傳染性[8]。對于HBV-DNA陽性的患者，其自身體內的乙型肝炎病毒具備較高的復制活性，因此容易出現傳染風險，而對于HBsAg、HBcAb與HBeAb陽性的患者，雖然其體內乙型肝炎病毒并未發生大量復制，但仍舊存在部分傳染性。有研究報道，對于乙型肝炎血清標志物陰性的患者，若HBV-DNA檢查結果為陽性，則表明患者體內的HBsAg處于恢復狀態，其病毒血癥被消除，因此不會出現傳染性[9]。

部分乙型肝炎急性期患者，或是慢性乙型肝炎患者，若為其開展乙型肝炎血清標志物檢測，結果顯示HBsAg陰性，但仍舊在血清中可檢測出水平較低的HBV-DNA，則提示患者的體內出現HBV感染。有研究結果報道稱，血清HBsAg結果呈現為陰性，但HBV-DNA結果呈現為陽性的乙型肝炎患者，在全部慢性肝病患者中的占比為32%～60%[10]。慢性肝病患者出現隱匿性HBV感染的原因，可能是由于：（1）HBV基因出現變異。當S基因發生突變，可使得部分氨基酸出現替換缺失情況，進而使HBsAg具備的抗原性發生改變，或對HBsAg的表達產生影響，導致HBsAg無法正常表達。（2）當患者發生乙型肝炎后，機體處在HBV消失的早期階段，此時其機體內的血清HBsAg水平極低，若采用普通酶聯免疫吸附法檢驗，由于該方法不具備較高的靈敏度，則可能導致HBsAg水平無法被準確測量，但患者體內的HBV-DNA仍開展低水平復制，因此在血清中仍有HBV-DNA被檢測出來。（3）HBV的表達降低。當HBV的病毒顆粒組裝，或是HBV分泌發生變化，則可使被感染的肝細胞內HBV基因表達減弱，或HBsAg可能在免疫復合物內隱藏，從而導致其無法被檢出[11]。本次研究結果顯示，82例HBsAg、HBcAb與HBeAg均為陽性的患者的HBV-DNA陽性率最高，HBV-DNA陽性患者中HBeAg陽性率高于HBsAg陽性率（P<0.05），表明乙型肝炎患者HBeAg水平與HBV-DNA水平之間可能具有一定關聯，即大部分HBV-DNA為陽性的患者可能為乙型肝炎HBeAg攜帶者。有資料證實，乙肝血清HBeAg屬于HBV復制活躍的標志物，可用于乙肝病毒感染診斷[12]。通過乙型肝炎血清標志物以及HBV-DNA檢查，可使乙型肝炎得到早期診斷，同時可判斷HBV復制情況，為后續治療的實施提供參考。乙型肝炎患者機體血清HBsAg可能在無癥狀攜帶者的體內存在，也可能在HBV感染早期（感染時間為1～2周）患者體內存在，因此當乙型肝炎血清HBsAg檢測結果為陽性時，則表明患者自身已經受到HBV感染，但無法對患者體內的HBV復制狀態予以明確判斷。有研究報道稱，在對乙型肝炎進行診斷時，不可僅依靠乙型肝炎血清標志物檢測來作為診斷依據，還需要實施HBV-DNA檢測，來對其體內的HBV復制情況進行判斷，從而為后續治療提供依據。

綜上所述，乙型肝炎血清標志物與HBV-DNA定量檢測對診斷乙型肝炎均具有較高的應用價值。

參考文獻

[1]? ? 王曉美，牛俊奇.慢性乙型肝炎臨床治愈的監測指標及新血清學標志物[J].中華肝臟病雜志，2018，26（8）：565-567.

[2]? ? CAREY I，GERSCH J，WANG B，et al.Pregenomic HBV RNA and Hepatitis B Core-Related Antigen Predict Outcomes in Hepatitis B e Antigen-Negative Chronic Hepatitis B Patients Suppressed on Nucleos（T）ide Analogue Therapy[J]. Hepatology， 2020，72（1）：42-57.

[3]? ? 郭文麗，潘春燕，莊潔偉.外周血T淋巴細胞及乙型肝炎病毒血清標志物與HBV-DNA的相關性分析[J].吉林醫學，2020，41（1）：12-14.

[4]? ? ?秦小英.用不同的測定方法對乙型病毒性肝炎患者進行乙型肝炎病毒血清標志物測定的效果研究[J].當代醫藥論叢，2020，18（5）：176-177.

[5]? ? ANASTASIOU O E， YURDAYDIN C， MAASOUMY B， et al. A transient early HBV-DNA increase during PEG-IFNα therapy of hepatitis D indicates loss of infected cells and is associated with HDV-RNA and HBsAg reduction[J].J Viral Hepat，2021，28（2）：410-419.

[6]? ? 朱萍，王麗，王紅，路毓峰，等.慢性乙型肝炎患者肝纖維化血清標志物水平與肝纖維化分期的關系[J].現代中西醫結合雜志，2019，28（24）：2643-2647.

[7]? ? 華琳，楊雅蕓，孫維羅，等.乙型肝炎患者ALT水平與HBV血清標志物聯合檢測的應用價值[J].中華醫院感染學雜志，2019，29（18）：2746-2749，2753.

[8]? ? TAN L，WU Z Q，ZHAO C，et al.A perspective of the relationship of serum HBV DNA and HBsAg apportioned by the same hepatic parenchyma cell volume with inflammation in the natural history of chronic hepatitis B[J].Ann Palliat Med，2021，10（2）：1388-1395.

[9]? ? 趙小平.兩種不同免疫檢驗方法檢測乙型肝炎病毒感染血清學標志物的臨床對比探討[J].中外醫學研究，2019，17（3）：56-57.

[10]? ? 麥志周，蔡林林，盧麗君.慢性乙型肝炎和乙肝肝硬化及原發性肝癌血清腫瘤標志物的檢測意義研究[J].數理醫藥學雜志，2019，32（3）：364-365.

[11]? ? WONG D K，CHENG S C Y，MAK L L，et al.Among Patients with Undetectable Hepatitis B Surface Antigen and Hepatocellular Carcinoma，a High Proportion Has Integration of HBV DNA into Hepatocyte DNA and No Cirrhosis[J].Clin Gastroenterol Hepatol，2020，18（2）：449-456.

[12]? ? 王蕾，李世寶，金玉.乙型肝炎血清標志物模式及前S1抗原與乙型肝炎病毒DNA定量檢測的關系[J].臨床與病理雜志，2018，38（10）：2088-2093.

（收稿日期：2022-12-21）