CLIA 與ELISA 檢測在丙型肝炎病毒抗體中的應用價值比較

董秀麗

（安陽市燈塔醫院，河南安陽 455000）

丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）是腸道外散播的非甲非乙型肝炎病毒，主要是經血液、體液進行傳播。HCV 抗體是在病毒侵入機體后，患者的免疫功能實施的相關免疫反應，是HCV 感染后產生的特異性抗體，是HCV 感染的主要標志。HCV 感染屬于病毒性肝炎，會損害患者肝細胞，嚴重者會誘發腎功能不全、高脂血癥、甲狀腺功能異常等，甚至會發展為肝癌，危及患者生命[1］。且其具有一定傳染性，目前并無適當的治療方式，也無有效的治療手段，只能利用早期診斷進行針對性治療。酶聯免疫吸附法（ELISA）是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術的基本上發展起來的一種新型免疫測定技術，可以讓抗原或抗體連接到某種載體表面，并保證患者免疫活力。化學發光酶免疫分析法（CLIA）是按照放射免疫分析的基本原理，將高靈敏的化學發光技巧和高特異性的免疫反響連接，樹立化學發光免疫研究法，其具有較廣使用邊界，可以檢查出不同體積的抗原、抗體、半抗原等[2］。本研究挑選疑似HCV 感染86 例，對比研究CLIA 與ELISA 的臨床應用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究選取2016 年1 月～2020 年12 月安陽市燈塔醫院疑似HCV 感染患者86 例，男、女分別為46 例、40 例；年齡34～55（43.45±3.47）歲。

1.2 選取標準

納入：患者均疑似為HCV 感染；患者無嚴重腎臟異常；患者臨床資料齊全；患者及家屬知情并簽訂同意書。排除：合并其他種類的傳染病癥；患者標本不契合臨床檢查標準；患者意識模糊，不能合作實驗。

1.3 方法

所有患者均在入院次日清晨，在空腹的狀態下分別收取患者5ml 靜脈血液，并將收取的血液標本放入伴有肝素鈉的試管中實施抗凝試驗，將試管放入轉速為3000r/min 的儀器中實施離心處理，離心15min 左右，將獲取的上清液放置在冰箱中儲存。

使用ELISA 檢查患者血清標本中的HCV 抗體含量，選取MULTISKAN FC 型酶標儀器（上海賽默飛），檢查時試劑用品為上海科華，檢查過程中需嚴格按照說明書進行，需在每個微孔板上設置空白、陰性及陽性對照，若患者血清中HCV 抗體含量≥臨界值，則表明檢查結果為陽性，臨界值=陽性對照平均值×0.1＋陰性對照平均值使用CLIA 檢查患者血清標本中的HCV 抗體含量，檢查過程中需嚴格按照說明書進行，若樣本的吸光度/臨界數據≥1，表明檢查為陽性，檢測儀器為maccura-i3000 型全自動化學分析儀（邁克），檢查使用的試劑盒為該儀器成套的CLIA 檢查試劑。

1.4 觀察指標

檢查結果，以重組免疫印跡法結果為“金標準”，研究ELISA、CLIA 的檢查結果。病毒抗體檢出率，統計ELISA、CLIA及二者結合檢查的有關病毒抗體檢出情況。

1.5 統計學方法

采用統計學軟件SPSS 22.0 對數據進行統計分析，計數資料以（%）表示，組間比較行χ2 檢驗，以P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 檢查結果（見表1）

表1 檢查結果例

2.2 相關檢出率（見表2）

表2 相關檢出率n（%）

3 討論

HCV 感染誘發的病毒性肝炎，是一種傳染范圍較廣的病癥，全球感染率為3%，約50.0%患者會轉變成慢性肝炎[3］。當病毒感染人體后，患者的免疫功能會產生HCV 抗體，作為感染特異性標志物廣泛存在于感染患者的血液中。早期診斷治療，是避免感染持續進展、肝功能損害的關鍵，對降低肝臟纖維化和相關并發癥發生風險有積極意義。

ELISA 是免疫診斷中以固相酶聯免疫反應為基礎的一種技術，在臨床上被廣泛應用，具有操作簡單、快速、無放射污染的優勢，其不需要使用二抗，有效避免交互反應，還可以有多種選擇并作出不同的測定分析。CLIA 是一種特殊的反應，具有高靈敏度、強特異性、操作簡單等優勢，其使用發光劑作為酶標記物，酶標物純度、質量、活性、親和力均能確定檢查是否成功，可以加強發光記號的強度，延長發光時間，并加強診斷的靈敏度，還可以有效排除其他因素造成的感染，進而提高檢測敏感度[4］。CLIA 診斷抗SP100 抗體、抗AMA-M2 抗體、抗3E 抗體、抗PML 抗體檢出率較ELISA 檢出率高，提示CLIA 可以提高檢出率。CLIA 具有無放射性污染、檢測方便等優點，在不斷的改進后，對相應抗體檢測方式變得更靈敏，且其使用苯并蔥為發光底物，其洗滌液的特有配比可以減少其余因素的侵擾，可以高度、敏感的診斷出HCV，從而提高臨床檢測的準確性，其在早期發現并預防、控制HCV 感染中起到重要功效。

綜上所述，與ELISA 比較，CLIA 診斷HCV 能提高HCV 抗體檢出率，便于臨床早期治療疾病。