桂花多糖的提取工藝、測定及藥理活性研究進展

◎ 李 泳，姚 春，廖 娜

（咸寧市公共檢驗檢測中心，湖北 咸寧 437000）

桂花，又稱木犀、九里香、巖桂、月桂等，是木犀科（Oleaceae）木犀屬（Osmanthus）植物，多分布于我國的湖北、廣西、貴州、江蘇、浙江、安徽等地[1-3]。桂花的花、根、果均有藥用價值[4-6]。《本草綱目》稱桂花為本經上品，“化痰、生津、辟臭，可治風蟲牙痛”，而《陸川本草》亦稱桂花“治痰飲喘咳”[7-9]。現代藥理研究表明，桂花具有降血糖、抑菌抗炎、體內外抗氧化、抗癌、抗高血糖、護肝以及保護神經等多種作用[10-12]。多糖是桂花的主要活性成分之一，從桂花、桂花葉和桂花果實中均可提取得到多糖[13-15]。植物多糖作為天然生物體大分子物質，經研究證實具有多種多樣的生物活性，如抗病毒、抗氧化、抗凝、抗癌、降血糖和增強免疫等，近年來成為天然藥物研究的熱點[7,16-18]。本文綜述了近年來國內外對桂花多糖的提取工藝、含量和組成的測定及藥理活性的研究進展，以期為桂花多糖的進一步研究和應用提供一定的思路及依據。

1 桂花多糖的提取工藝

近些年從桂花、桂葉和桂花果實中提取多糖的方法主要有溶劑提取法（又分為水溶醇析法[13,15,19-21]和內部沸騰法[18,22]）、微波輔助提取法[23]、超聲波輔助提取法[14,17]、酶法提取[24-25]等，相關工藝流程、最優提取條件及其提取率詳見表1。表1 中的數據表明，不同原料的桂花多糖提取率為干桂花＞干桂葉＞桂花果實（種子）。

表1 桂花多糖的不同提取工藝匯總表

2 桂花多糖的測定

2.1 桂花多糖含量的測定

目前測定植物多糖含量的方法有化學滴定法、色譜法、光譜法和酶法等。其中，化學滴定法步驟煩瑣、重復性和準確度差，而色譜法和酶法儀器設備昂貴，均不易推廣[23,26]。近些年應用于多糖含量測定最廣的方法是紫外-可見分光光度法[26]。此法測定多糖含量的方式主要分為兩類，一類是利用糖的還原性，如3,5-二硝基水楊酸比色法和Somogyi-Nelson 法，另一類是糠醛縮合顯色法[26-27]。糠醛縮合顯色法根據顯色劑的不同又可分為地衣酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法等[23,26-27]。馮程程等[20]用苯酚-硫酸法測得桂花中多糖含量的均值為34%，王升勻等[28]用此法測得桂花種子中多糖的含量為4.32%。林志鑾等[23]用熒光光譜法測得桂花多糖的含量為12.17%，黃玲艷[8]用改良的苯酚-硫酸法測得每克桂花提取物中總多糖的含量為（307.98 8.90）mg。上述結果表明桂花中多糖含量適中，方便用來提取植物多糖。

2.2 桂花多糖組成的測定

除了測定桂花多糖的含量，分析桂花多糖單糖成分的分布規律也有助于桂花相關產品的開發和利用。目前植物多糖的單糖組成分析方法主要有毛細管電泳技術、氣相色譜技術、高效液相色譜技術和質譜技術等[29]。李婷婷等[21]、范寶磊等[30]分別采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色譜（PMP-HPLC）法和PMP-HPLC-MS-MS 法[31]分離檢測桂花多糖中單糖組成的結果詳見表2。

表2 桂花中單糖組成的測定表

3 桂花多糖的藥理活性

3.1 抗氧化作用

李昊[24]發現桂花多糖對DPPH 自由基和O2-·有一定的清除作用，當其質量濃度為10 g·L-1時，對DPPH 自由基的清除率為85.38%，對O2-·的清除率為85.03%；桂花多糖對DPPH 自由基和O2-·的半數抑制濃度分別為0.812 g·L-1和1.364 g·L-1。蔣德旗等[25]發現桂花多糖的質量濃度為10 mg·mL-1時，對DPPH 自由基的清除率為88.76%，對O2-·的清除率為87.63%；桂花多糖對DPPH 自由基和O2-·的半數抑制濃度分別為0.846 mg·mL-1和1.256 mg·mL-1。趙叢叢等[32]抗氧化活性試驗結果表明桂花子多糖對羥自由基、DPPH自由基和ABTS+自由基最高清除率分別為48.5%、55.8%和77.9%。多項研究結果表明，桂花多糖具有清除自由基的能力，在一定范圍內清除自由基的能力與濃度變化呈正相關[18,28,33-34]。

3.2 抑菌活性

黃國文等[15]研究發現金桂果實多糖在pH 值為4 ～8 時對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和大腸桿菌均有抑制作用，且抑制作用由強變弱，在pH=6 時抑菌作用最強，過酸或過堿時則無抑菌作用。同時，隨著處理時間的增加，金桂果實多糖對這3 種菌的抑制作用先增強后減弱，且最佳處理時間為10 ～20 h，抑菌率可達100%。此外，金桂果實多糖對這3 種細菌的抑制作用隨其濃度的增加逐漸增強，且對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和大腸桿菌的最小抑菌濃度分別約為3.2%、3.2%和7.5%。該研究證實金桂果實多糖有一定的抑菌作用，可進一步研究其能否用于食品的防腐保鮮。

3.3 免疫活性

尹偉等[33]研究發現桂花多糖對鼠脾淋巴細胞誘導的增殖轉化效果明顯且無顯著的細胞毒性。此外，桂花多糖對IL-2、IFN-γ、TNF-α 的分泌有很強的促進作用，并在一定程度上，其效果隨劑量的增大而增強。由該研究可推斷桂花多糖有一定的免疫調節作用，這也為其抗癌作用的研究提供了一定的依據。

3.4 抗癌活性

亞硝酸鹽是生成亞硝胺的前體[34]，在一定條件下，可與食物中的仲胺、叔胺等生成亞硝胺[28]。亞硝胺被世界衛生組織列為1 類致癌物，對人和動物有強致癌性。王升勻等[28]通過體外實驗研究表明，桂花種子多糖在2.4 g·L-1濃度下對亞硝基具有一定清除作用。該研究說明桂花種子多糖是一種良好的亞硝基清除劑，可阻斷亞硝胺在體內的合成，因而這種物質可能具有防癌作用[28,34]。

4 結語

綜上所述，桂花多糖具有抗氧化、抑菌、增強免疫、抗癌等作用。桂花多糖的抑菌作用為其進一步用于食品的防腐保鮮提供了新的思路；桂花多糖的抗氧化作用、增強免疫和抗癌活性使其在保健食品領域有很大的潛力和廣闊的前景。但目前市面上的桂花產品大多為粗放式的民間工藝所制造，較少有深加工的研究，缺乏高端產品。通過研究桂花活性成分，如桂花多糖，有利于開發桂花的精、深加工產品，提高其附加值。目前，對桂花多糖的研究還不夠深入，仍需進一步研究其在生物體內的作用機制。此外，由于不同品種的桂花及桂花的不同部位的多糖含量和單糖組成存在差異，后續在研究桂花多糖的提取時應篩選品質優良的桂花品種及其重要部位。咸寧市作為“桂花之鄉”，桂花資源豐富，我國應大力研究和開發桂花的精、深加工產品，以帶動地方經濟發展。