慢性心衰患者血清SIRT1的表達(dá)及臨床意義*

賴(lài)運(yùn)波, 刁曉艷

(1.貴州醫(yī)科大學(xué) 臨床醫(yī)學(xué)院, 貴州 貴陽(yáng) 550004; 2.貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 心血管內(nèi)科, 貴州 貴陽(yáng) 550004)

慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是各種心臟結(jié)構(gòu)或功能異常導(dǎo)致心室充盈或射血能力受損的臨床綜合征[1],其基本機(jī)制是心室重構(gòu),包括心肌細(xì)胞肥大、凋亡與壞死、外基質(zhì)過(guò)度沉淀和降解增加等[2]。CHF是心血管事件的終末階段,嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。抗衰老酶1(sirtuin 1,SIRT1)與慢性心衰關(guān)系密切[3],SIRT1是組蛋白去乙酰化酶Sirtuins家族的重要成員,是一種NAD+依賴(lài)的組蛋白去乙酰化酶,參與心肌肥大、心肌衰老、抗氧化性應(yīng)激等一系列病理過(guò)程[4-8]。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)SIRT1的抗氧化性應(yīng)激在心衰的作用研究較為突出,以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和基礎(chǔ)研究報(bào)道較多,研究顯示心衰時(shí)SIRT1的表達(dá)增加,而體外誘導(dǎo)SIRT1的表達(dá)后,可減輕氧化性應(yīng)激和減少心肌細(xì)胞的凋亡[9-12],但相對(duì)于人體血清SIRT1的水平變化報(bào)道甚少。本研究對(duì)比107名CHF患者與59名非心力衰竭患者相關(guān)指標(biāo),探討血清SIRT1表達(dá)水平與心衰的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2018—2019年心內(nèi)科住院的CHF患者107例設(shè)為CHF組,50～80歲、平均(67.08±9.30)歲,其中男58例、女49例,CHF診斷根據(jù)《中國(guó)心力衰竭診斷和治療指南 2018》[13]。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)結(jié)構(gòu)性心臟病(心瓣膜疾病、心包疾病、先天性心臟病)、心內(nèi)腫瘤、肥厚型心肌病、限制性(浸潤(rùn)性)心臟病等;(2)昏迷或感染的患者;(3)近1月伴發(fā)急性心肌梗死;(4)終末期腎病患者(腎小球?yàn)V過(guò)率<15 mL/min.1.73 m2),(5)縮窄性心包炎;(6)血糖明顯異常;(7)慢性阻塞性肺疾病患者;(8)伴有腦梗死患者。選擇同期住院心內(nèi)科非心衰患者59例為對(duì)照組,50～80歲、平均(61.74±8.12)歲,其中男33例、女性26例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)無(wú)慢性心力衰竭、N端腦鈉肽前體(b-type natriuretic peptide,NT-pro BNP)<125 ng/L;(2)無(wú)感染性疾病,排除急性心肌梗死、先天性心臟病、心瓣膜病等疾病。入選患者血壓、體質(zhì)量指數(shù)等一般指標(biāo)均控制在正常范圍內(nèi),且患者或其近親屬對(duì)本研究均知情同意。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求,并獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(批準(zhǔn)文號(hào)2020091K)。

1.2 研究方法

1.2.1血生化指標(biāo)測(cè)定 所有對(duì)象于清晨6點(diǎn)(空腹8 h以上)抽取靜脈血,采用瑞士Cobas 8000全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)NT-pro BNP、空腹血糖、血脂、肝功能、腎功能及血常規(guī)等指標(biāo)。

1.2.2超聲心動(dòng)圖檢查 采用美國(guó)飛利浦iE33高端心血管超聲診斷儀常規(guī)測(cè)定各房室腔的結(jié)構(gòu)和大小,記錄左室射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心房前后徑(left atrium diameter, LAD)、左心室舒張末期內(nèi)徑(left ventricle end diastolic diameter,LVEDd)、左心室后壁厚度(left ventricle posterior wall,LVPW)、舒張末期室間隔厚度(inter ventricular septum thickness at diastole,IVSD)等指標(biāo)。根據(jù)心臟超聲心動(dòng)圖檢查結(jié)果,將觀察組分為射血分?jǐn)?shù)保留型心力衰竭亞組(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF亞組,LVEF≥50%)和射血分?jǐn)?shù)降低型心力衰竭亞組(heart failure with reduced ejection fraction,HFrEF亞組,LVEF<40%)。

1.2.3SIRT1水平測(cè)定 所有研究對(duì)象血液經(jīng)離心處理后置于EP管中,置-80 ℃冰箱備用。采用美國(guó)Aviva Systems Biology公司提供的酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay ELISA)試劑盒檢測(cè)血清SIRT1水平,加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺在波長(zhǎng)450 nm處通過(guò)微型平板閱讀器(Chroate Manager 4300,Palm City,USA)進(jìn)行定性或定量分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 血生化指標(biāo)

與對(duì)照組比較,CHF組肌鈣蛋白T、肌酐明顯升高,膽固醇及甘油三酯下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但上述結(jié)果均在正常參考值范圍內(nèi)符合納入標(biāo)準(zhǔn)。見(jiàn)表1。

表1 CHF組及對(duì)照組患者血生化指標(biāo)比較

2.2 血清SIRT1及NT-pro BNP,左心結(jié)構(gòu)及功能

CHF組血清SIRT1、NT-pro BNP、LVEDd、LAD、IVSD及LVPW高于對(duì)照組,但LVEF低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 對(duì)照組與CHF組患者血清SIRT1、NT-pro BNP、左心結(jié)構(gòu)及功能指標(biāo)比較

2.3 血清SIRT1與NT-pro BNP、LVEF及LVEDd相關(guān)性

經(jīng)Spearman相關(guān)分析,血清SIRT1與血清NT-pro BNP、LVEDd、LAD均呈正相關(guān)(P<0.05),而血清SIRT1與LVEF呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 血清SIRT1與NT-pro BNP、左心結(jié)構(gòu)指標(biāo)及功能的相關(guān)性分析

3 討論

隨著我國(guó)老年化進(jìn)程,慢性心力衰竭發(fā)病率逐漸上升,其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,可由心肌代謝異常、能量利用障礙、氧化性應(yīng)激等多種途徑共同作用[14-16]。近年來(lái),國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究最多的是氧化性應(yīng)激在心力衰竭發(fā)病的途徑,當(dāng)心衰時(shí),機(jī)體RAAS被激活,產(chǎn)能較低的游離脂肪酸β氧化供能占主導(dǎo)地位,并伴有線(xiàn)粒體功能障礙。脂肪酸β氧化產(chǎn)生大量活性氧自由基,降低調(diào)節(jié)線(xiàn)粒體能量生成的心磷脂含量,造成線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)和功能損傷,抑制心肌收縮,引起心肌細(xì)胞凋亡[17]。與此同時(shí),CHF患者血清C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1水平明顯升高,通過(guò)誘導(dǎo)SIRT1的表達(dá)及其活性,減弱心臟炎癥和細(xì)胞損傷[18-19]。在心衰的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中,SIRT1表現(xiàn)出激活狀態(tài),從而起到減少活性氧的產(chǎn)生和心肌細(xì)胞凋亡的作用。在本研究中CHF患者血清SIRT1水平升高,且與NT-pro BNP水平呈正相關(guān),符合心衰時(shí)機(jī)體的自我代償機(jī)制,由此推測(cè)CHF患者血清SIRT1的升高可能是一種保護(hù)機(jī)制,其與BNP在心衰時(shí),心室肌受牽拉刺激分泌增多,從而代償性保護(hù)心肌機(jī)制相似[20-22],當(dāng)發(fā)生慢性心力衰竭時(shí),分泌更多的SIRT1保護(hù)心肌細(xì)胞,減輕細(xì)胞炎癥,或通過(guò)抑制ROS生成,增加抗凋亡蛋白的表達(dá),激活抗凋亡機(jī)制,減少心肌細(xì)胞凋亡,促進(jìn)心肌細(xì)胞生存,保護(hù)心臟,維持其功能和代謝[23-25],從而改善心衰。本研究還顯示,心臟的結(jié)構(gòu)在CHF患者中出現(xiàn)了明顯的改變,LVEF較正常對(duì)照組也明顯降低,這也符合心衰患者的臨床特點(diǎn),SIRT1表達(dá)水平隨著左心室和左房的擴(kuò)大而增加,并隨心臟收縮功能減退,SIRT1水平也有所上升。這也提示SIRT1對(duì)臨床工作有一定的指導(dǎo)意義。

綜上所述,本研究結(jié)果顯示CHF患者血清SIRT1表達(dá)水平明顯升高,并與NT-pro BNP水平呈高度正相關(guān),推測(cè)其可能作為一種代償性心肌保護(hù)機(jī)制,為心衰的診療評(píng)估提供數(shù)據(jù)支撐,由于本研究樣本量較少,其結(jié)果亦可能存在一定偏倚,尚需大量臨床實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證。