5-氮雜-2’-脫氧胞苷對苯并[a]芘致海馬神經元毒性的保護作用

魏智超 馮婧宇 聶繼盛 魏建宏

1.山西醫科大學公共衛生學院，山西太原 030000；2.山西醫科大學汾陽學院，山西汾陽 032200

表觀遺傳學是指當核苷酸序列不變時，基因表型改變的一門學科。DNA 甲基化是最重要的基因修飾途徑，是人類生命過程中的重要組成部分[1-2]，它可以調節神經元發育中的重要過程[3-5]。哺乳動物細胞中DNMT1、DNMT3A 和DNMT3B 3 種酶具有DNA 甲基轉移酶（DNA methyltransferase，DNMT）活性[4]。

苯并[a]芘（benzo[a]pyrene，B[a]P）是多環芳烴的主要代表，在香煙煙霧、柴油廢氣及工業廢物中可以檢測到高濃度的B[a]P[6]。B[a]P 具有遺傳毒性、致畸性和神經毒性等特點。由于其親脂性，B[a]P 能輕易通過血腦屏障，可導致認知功能障礙、神經功能損傷[7-9]。B[a]P 暴露后DNA 甲基化的變化可影響肺癌發展[10]。B[a]P 可引起精子DNA 異常甲基化，與胚胎、生殖系統發育和許多遺傳疾病有關[11]，還可影響小鼠血液和肝臟中的DNA 甲基化水平[12]。但是，目前關于DNA 甲基化在B[a]P 致神經毒性中的作用研究較少。

5-氮雜-2’-脫氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine，5-Aza-cdR）為DNA 甲基轉移酶抑制劑[13]。研究發現5-Aza-cdR 可以通過氧化應激來調節百草枯對PC12 細胞的毒性作用[14]。目前，5-Aza-cdR 對B[a]P所致的神經毒性作用尚未見報道。本研究旨在構建B[a]P 的體外染毒模型，利用5-Aza-cdR 進行干預，探討5-Aza-cdR 對B[a]P 神經毒性的保護作用，為深入探索B[a]P 的發病機制提供新思路。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

3 月齡SPF 級SD 大鼠20 只[山西醫科大學實驗動物中心提供，許可證號：SCXK（晉）2019-0004），合格證號：SYXK（晉）2019-0007]。體重250～300 g，雌雄比例2∶1 合籠交配。飼養條件：溫度（24±2）℃，濕度（55±5）%。本研究經山西醫科大學汾陽學院動物倫理委員會審批通過（2018-021）。

1.2 實驗材料

B[a]P（B1760，sigma）；5-Aza-cdR（D9010，索萊寶）；無血清培養基（21103049，Thermo）；……