四氯化碳誘導的大鼠肝纖維化肝組織中SHP2表達與在體肝星狀細胞活化及增殖的關系

張朋壘 張明婷 郝禮森 靳麗敏 潘恩亮 何宇 苗笑佳 王薇

肝纖維化是肝臟對各種損傷產生的修復反應,長期進展可演變為肝硬化[1]。而肝星狀細胞 (hepatic stellate cells, HSC) 是參與肝纖維化的最重要細胞,其活化及增殖在肝纖維化的形成及發展中扮演重要角色[2-4]。含SH2結構域的蛋白酪氨酸磷酸酶2 (SH2 domain-containing protein tyrosine phosphatase 2, SHP2)是第一個被確定為具有促癌作用的蛋白酪氨酸磷酸酶,廣泛表達于人體各個組織和細胞,其過表達可通過促進腫瘤細胞的增殖參與多種惡性腫瘤的形成及發展[5-6]。近年來一些學者對SHP2在某些非腫瘤領域的作用給予了廣泛關注。有研究發現[7],體外活化大鼠HSC的 SHP2表達下調可使其增殖明顯受到抑制。但SHP2在纖維化肝組織及在體HSC中的表達變化與在體HSC活化及增殖的關系仍不清楚。本研究采用腹腔注射四氯化碳法建立大鼠肝纖維化模型,探討大鼠肝纖維化病程中肝組織及在體HSC的SHP2表達與在體HSC活化及增殖的關系。

材料與方法

一、實驗動物及試劑

50只清潔級健康雄性 SD大鼠(350～400 g/只)購于北京華阜康生物科技股份有限公司。SP試劑購于北京中山金橋生物有限公司,兔抗 SHP2多克隆抗體購于武漢三鷹生物技術有限公司,小鼠抗α-平滑肌肌動蛋白 (alpha-smooth muscle actin, α-SMA)單克隆抗體購于臺灣arigo公司。

二、方法

(一)大鼠肝纖維化模型的構建 上述實驗大鼠均按清潔級要求在華北理工大學動物實驗室飼養,并被隨機分為:對照組(10只)、模型組(40只)。大鼠肝纖維化模型采用腹腔注射四氯化碳法構建[8],將 50%的四氯化碳橄欖油……