miR-19a對民豬前脂肪細胞分化影響的研究

劉 娣 ，李皓月，馬 紅，汪 亮

（1.東北農業大學動物科學技術學院，哈爾濱 150030；2.黑龍江省農業科學院畜牧研究所，哈爾濱 150086）

民豬是我國地方品種，主要分布在東北地區，具有抗逆性強、肉質好、抗寒等特點[1]，脂肪沉積情況直接影響民豬抗寒能力[2]。根據脂肪組織分布位置不同分為皮下脂肪、肌內脂肪及內臟脂肪。皮下脂肪占民豬總脂肪含量70%左右，大部分存在于皮下，如背部脂肪、腋下脂肪等，主要發揮保護、隔熱及儲存能量功能[3]。

microRNA 是內源性啟動的非編碼RNA，由19～25個核苷酸組成，通過和靶基因mRNA堿基配對引導沉默復合體（RISC）降解mRNA 或阻礙其翻譯，發揮轉錄后控制基因表達作用[4]。microRNA已被發現參與多種生理過程，在細胞增殖、分化、腫瘤發生、神經元發育、脂肪形成等過程中發揮關鍵作用[6-7]。miR-19a屬于miR-17-92基因簇，參與脂肪組織的胰島信號轉導。miR-19a已被證實促進雞前脂肪細胞增殖[8]，但在民豬中研究較少。

轉錄因子KLFs 家族（Krüppel-like factors）是DNA結合轉錄調節因子家族成員，在脂肪細胞分化過程中發揮重要作用[9]。Jiang 等研究發現，KLF13通過調節PPARγ 促進豬脂肪細胞分化[10]。生物信息學分析表明，miR-19a靶作用于KLF13基因。為揭示民豬miR-19a作用及其作用機制，本研究開展miR-19a 靶作用于KLF13 基因鑒定與分析及miR-19a對脂肪分化調控機制的研究。

脂肪在民豬抗寒過程中發揮重要作用，本研究通過對miR-19a 靶作用于KLF13 基因的鑒定分析及miR-19a 對脂肪分化標志基因的作用，探究miR-19a對民豬脂肪沉積的影響，為研究民豬脂肪分化過程調控提供依據。

1 材料與方法

1.1 主要試劑及儀器

Trizol、DMEM/F12 培養基、熒光定量試劑均購自Life techonogies 公司；……