HPLC 法測定食品接觸材料中雙酚A 的遷移量

2023-05-19 12:25:06吳少棠

現代食品 2023年4期

◎ 吳少棠

（新亞太檢測技術服務（中山）有限公司，廣東中山 528400）

作為一種化工有機原料，雙酚A 主要用于聚碳酸酯和環氧樹脂等高分子材料的加工和生產。多數食品包裝材料中均含有雙酚A。因此，雙酚A 在各類食品包裝材料中的遷移量一直是食品檢測工作的重點[1]。雙酚A 也是一種雌激素，可能與乳腺、前列腺以及生殖系統疾病有關，有誘發癌癥的風險。一種簡便、靈敏度高且重現性好的分析方法，能夠快速對食品接觸材料遷移物中的雙酚A 進行準確定量分析，對食品接觸材料遷移物中雙酚A 的限度控制具有重要意義[2]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

LC-QQQ（安捷倫公司）；E201 型紫外-可見分光光度計（北京普析通用儀器有限公司）；分析天平（感量0.1 mg，Lab-103）；渦旋振蕩器（合肥艾本森科學儀器有限公司）；恒溫恒濕箱（東莞市長星儀器有限公司）；雙酚A 標準物質（默克，CAS 號：80-05-7，純度≥99%）。

乙酸、乙醇、正己烷，購自天津永大化學試劑有限公司。

1.2 食品模擬物

水基：10%乙醇溶液；酸基：4%乙酸溶液；酒精類：20%乙醇溶液；油基食品模擬物：植物油。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品的制備

參照《食品安全國家標準》（GB 5009.156-2016）中食品接觸材料及制品遷移試驗預處理方法通則，對于水基樣品包裝材料選擇10%乙醇溶液為食品模擬物；對于酸基樣品包裝材料選擇4%乙酸溶液為食品模擬物；對于酒精類樣品包裝材料選擇20%乙醇溶液作為食品模擬物；油基食品模擬物選擇植物油。按照食品安全國家標準（GB 31604.1-2015）食品接觸材料及制品遷移試驗通則中的遷移實驗條件進行試驗，收集各條件項下的浸泡溶液。

（1）水基樣品的制備。取上述水基樣品遷移試驗所得溶液，過0.22 μm 微孔濾膜待測。

（2）酸基樣品的制備。取上述酸基樣品遷移試驗所得溶液，過0.22 μm 微孔濾膜待測。

（3）酒精類樣品的制備。取上述酒精類遷移試驗所得溶液，過0.22 μm 微孔濾膜待測。

（4）油基樣品的制備。取油基樣品1.0 g，于20 mL 試管中，加入正己烷5 mL，渦旋混勻后，加入50%甲醇5 mL，渦旋混勻。靜置5 min 后，取下層水溶液過0.22 μm 微孔濾膜待測。

1.3.2 標準溶液的配置

雙酚A 標準貯備液：精確稱取雙酚A 對照品20 mg，至20 ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度線即得，雙酚A 對照品標準貯備液的濃度約為1.0 mg·mL-1。

雙酚A 標準中間液：精確移取雙酚A 標準儲備液1.0ml 至100 ml 容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度線即得雙酚A 標準中液，濃度約10 mg/L。

1.3.3 水基、酸性食品、酒精類食品模擬物標準曲線的繪制

精確量取雙酚A 標準中間液0ml、0.01 mL、0.025 mL、0.05 mL、0.075 mL、0.10 mL、0.20 mL，分別至10 mL 容量瓶中，用10%乙醇分別定容至刻度線，即得濃度分別為0.00 ml、0.01 mg/L、0.025 mg/L、0.050 mg·L-1、0.075 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.20 mg·L-1的標準曲線系列溶液。分別精確量取各標準曲線系列溶液各10 μL，在擬定的液相色譜條件下進樣分析，記錄峰面積。以雙酚A 的濃度為橫坐標，其峰面積為縱坐標進行線性回歸，獲得標準曲線。

1.3.4 油基食品模擬物標準曲線的繪制

分別稱取1g（精確至0.01g）油基食品模擬物至7 個具塞試管中，精確量取雙酚A 標準中間液0 ml、0.01 mL、0.03 mL、0.05 mL、0.07 mL、0.01 mL、0.03 mL，分別至10 mL容量瓶中，用4%乙酸分別定容至刻度線，即得濃度分別為0.00 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1、0.30 mg·kg-1、0.50mg·kg-1、0.70 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1、2.0 mg·kg-1的標準曲線系列溶液。分別精確量取各標準曲線系列溶液各10 μL，在擬定的液相色譜條件下進樣分析，記錄峰面積。以雙酚A 的濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標進行線性回歸，獲得標準曲線。

1.3.5 油基模擬物標準曲線的繪制

分別稱取1g（精確至0.01g）油基食品模擬物至7 個具塞試管中，精確量取雙酚A 標準中間液0 ml、0.01 mL、0.03 mL、0.05 mL、0.07 mL、0.01mL、0.03 mL，分別至10 mL 容量瓶中，用4%乙酸分別定容至刻度線，即得濃度分別為0.00 mg·kg-1、0.1 0 m g·k g-1、0.30 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1、0.70 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1、2.0 mg·kg-1的標準曲線系列溶液。分別至上述試管中，加入正己烷3 mL，渦旋混勻后，加入50%甲醇水溶液（1+1）3 mL，渦旋混勻。靜置5 min 后，取下層水溶液過0.22 μm 微孔濾膜待測。分別精確量取各標準曲線系列溶液各10 μL，在擬定的液相色譜條件下進樣分析，記錄峰面積。以雙酚A 的濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標進行線性回歸，獲得標準曲線。

1.3.6 主要儀器參數

（1）色譜條件。色譜柱選擇Agilent ZORBAX SB-C18 色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫：30 ℃；進樣量：10 μL；流速：1 mL·min-1；流動相：甲醇和水。洗脫程序見表1。

表1 洗脫程序表

（2）質譜條件。離子源：電噴霧離子源；電離方式：采用負離子掃描；檢測方式：選擇反應監測模式（SRM）；毛細管加熱溫度350 ℃；電噴霧電壓5.0 kV；離子源鞘氣（N2)，30.0 psi；離子源輔助氣（N2)，10.0 psi；m/z 掃描范圍為200～1 000，全掃描（SCAN）。其他參數見表2。

表2 雙酚A 質譜檢測條件表

1.3.7 雙酚A 的檢測限

按照1.3.1 節中的處理方法，采用空白加標溶液測試7 次，并計算各食品模擬物中雙酚A 的檢測限（S/N=3）。

1.3.8 樣品中雙酚A 測定的重復性和重現性

分別在水基、酸基、酒精類和油基食品模擬物中添加雙酚A，按照1.3.1 節中的實驗方法進行處理，并在擬定色譜條件下進行分析測定，可通過不同人員在相同條件下進行重復獨立測試，驗證其再現性[3]。

1.3.9 樣品中雙酚A 的加標回收率測定

分別在水基、酸基、酒精類和油基食品模擬物中添加雙酚A，按照1.3.1 節中的實驗方法進行處理，并在擬定色譜條件下進行分析測定，計算加標回收率[4]。

2 結果與分析

2.1 標準曲線的測定結果

雙酚A 水基食品中線性關系為y = 1,706.214 12 x- 2.979 78，R2= 0.999 82；雙酚A 酸性食品中線性關系為y = 3 071.654 73x - 8.417 87，R2= 0.998 81；雙酚A 酒精類食品中線性關系為y = 1 167.347 98x - 0.606 55，R2= 0.999.88743；雙酚A 油基食品中線性關系為y =531.887 21x - 9.236 34，R2= 0.999 42。不同模擬液雙酚A 標準曲線見圖1～圖4。