棕櫚酸降低內皮型一氧化氮合酶Ser633位點磷酸化水平對內皮細胞功能影響的分子機制*

李小宇，梁政偉，秦思，張倩，張俊詩，丁菁，陸德琴*

(貴州省常見慢性疾病發病機制及藥物防治研究重點實驗室，貴州 貴陽 550025；貴州醫科大學 基礎醫學院 病理生理學教研室，貴州 貴陽 550025)

由內皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)催化產生的一氧化氮(nitric oxide，NO)是維持血管內皮功能的一個重要因子。eNOS酶活性調控機制中蛋白質翻譯后磷酸化修飾是重要機制之一，目前已知eNOS有Ser114、Thr495、Ser615、Ser633和Ser1177等5個絲/蘇氨酸磷酸化調控位點[1]，其中Ser633[2]和eNOS Ser1177[3]位點磷酸化增加均可增強eNOS活性。eNOS Ser1177磷酸化已被廣泛研究，其調控機制比較清楚[4]。eNOS Ser633可在細胞內鈣濃度不改變的條件下發生磷酸化且持續時間較eNOS Ser1177更長，因此可更有效地增強eNOS活性[5]。現有研究表明，蛋白激酶 A (PKA)、Pim1激酶、AMP 活化蛋白激酶 (AMPK)、細胞外信號調節激酶 (ERK) 1以及ERK2等蛋白激酶可使eNOS Ser633磷酸化而激活eNOS[5]，但對調控該位點去磷酸化的蛋白磷酸酶了解甚少。蛋白絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶家族包括蛋白磷酸酶1(protein phosphatase 1，PP1)、PP2A、PP2B、PP2C以及PP5等[6]，PP2A又包含3個家族成員PP2A、PP4以及PP6，3者分子結構和酶學特性相似、氨基酸序列高度同源[7]，PP2A家族成員負責細胞內大多數蛋白質的Ser/Thr位點去磷酸化調控[8]。已經明確PP2A能直接使eNOS Ser1177去磷酸化[9]，PP2A激活后下調eNOS Ser1177磷酸化水平，降低細胞內NO含量，可導致內皮功能障礙[10-11]。然而，對于eNOS Ser633去磷酸化調控，迄今仍不清楚。游離脂肪酸(free fatty acids，FFAs)，即非酯化脂肪酸，是體內的一種能源物質，當血漿FFAs異常升高會造成內皮功能損害[12-13]，誘導eNOS功能障礙，細胞凋亡增加，從而發生氧化應激和炎癥反應[14-15]。棕櫚酸(palmitic acid，PA)是一種飽和脂肪酸，是血液中含量最高的FFAs。……