溫經(jīng)湯藥材不同炮制方法組方對(duì)小鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的影響*

張秀萍 孫達(dá)辰 梁?jiǎn)⒊?佟 雷 韓 犇 張文宇

溫經(jīng)湯出自《金匱要略·婦人雜病脈證并治》，由吳茱萸、當(dāng)歸、芍藥、川芎、人參、桂枝、阿膠(烊化)、牡丹皮(去心)、生姜、甘草、生半夏、麥冬(去心)組成，其功效顯著。近年來(lái)，為了提高方劑的療效，有些學(xué)者開(kāi)始研究中藥炮制后對(duì)藥效學(xué)的影響，但炮制后對(duì)全方的安全性研究非常少，而且中藥炮制后其成分之間是否產(chǎn)生毒性也未見(jiàn)報(bào)道，因此本研究將從溫經(jīng)湯中藥炮制前后進(jìn)行對(duì)比，初步探討溫經(jīng)湯炮制前后短期的安全效應(yīng)，以期為后續(xù)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 中藥飲片吳茱萸、當(dāng)歸、阿膠、甘草、炙甘草、蜜炙桂枝、川芎、白芍藥、生半夏、桂枝、麥門(mén)冬(去心)、蒲黃炒阿膠、人參、牡丹皮(去心)、生姜。購(gòu)自哈爾濱市三棵樹(shù)中藥材市場(chǎng)；牡丹皮(不去心)網(wǎng)購(gòu)于大別山特產(chǎn)；酒炙吳茱萸、炒白芍藥、姜半夏、酒炙當(dāng)歸、酒炙川芎、煨姜、紅參購(gòu)自御桂圓；麥門(mén)冬(不去心)，火神派中藥材。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雌雄各半ICR小鼠共40只，體質(zhì)量(18±2)g， 雌雄各半，購(gòu)自北京維通利華，生產(chǎn)許可證號(hào)(SCXK-2016-0011)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 動(dòng)物分組按文獻(xiàn)[1,2]將ICR小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為溫經(jīng)湯原方組(吳茱萸、當(dāng)歸、川芎、白芍藥、生半夏、麥門(mén)冬(去心)、人參、牡丹皮(去心)、桂枝、阿膠、生姜、甘草)，溫經(jīng)湯全方炮制組(酒炙吳茱萸、酒炙當(dāng)歸、酒炙川芎、紅參、蜜炙桂枝、炒白芍藥、姜半夏、蒲黃炒阿膠、牡丹皮(不去心)、煨姜、炙甘草、不去心麥冬)，溫經(jīng)湯君藥炮制品組(酒炙吳茱萸、當(dāng)歸、川芎、人參、桂蜜炙枝、白芍藥、生半夏、阿膠、牡丹皮(去心)、生姜、甘草、麥冬)，溫經(jīng)湯臣藥炮制品組(吳茱萸、酒炙當(dāng)歸、酒炙川芎、紅參、桂枝、白芍藥、生半夏、阿膠、牡丹皮(不去心)、生姜、甘草、麥冬(去心)及空白對(duì)照組。

1.3.2 藥物制備將溫經(jīng)湯原方、全方炮制品、君藥炮制品、臣藥炮制品(除阿膠、蒲黃炒阿膠需烊化外)所有飲片分別取3劑劑量，加蒸餾水900 ml，浸泡30 min，煎煮至300 ml，紗布過(guò)濾，剩余藥渣加水900 ml，繼續(xù)煎煮至300 ml，連續(xù)煎煮3次，將3次藥液混合均勻，加熱濃縮至藥液約500 ml，混合藥液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至180 ml，將阿膠或蒲黃炒阿膠烊化至藥液中，用蒸餾水調(diào)整至234 ml(濃度為10 g/ml)。放涼后置于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 給藥方法及觀察指標(biāo)選取18～22 g ICR小鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組8只，即溫經(jīng)湯君藥炮制組、臣藥炮制組、空白對(duì)照組、全方炮制組及原方組。按照10 g/ml制備各組藥液，以0.2 ml/10 g進(jìn)行灌胃給藥，連續(xù)給藥14 d，空白對(duì)照組給予相同體積蒸餾水，每天觀察小鼠一般情況，并末次給藥第2天禁食不禁水，稱取小鼠體質(zhì)量，摘取小鼠心、肝、脾、肺、腎稱重，觀察小鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)變化。

2 結(jié)果

2.1 溫經(jīng)湯炮制前后對(duì)小鼠一般情況影響連續(xù)給藥14 d，小鼠生長(zhǎng)正常，毛色未見(jiàn)變化，行為活動(dòng)未受影響，飲水、進(jìn)食及大、小便均未見(jiàn)異常，口、鼻等處未見(jiàn)異常分泌物，均未出現(xiàn)中毒現(xiàn)象。

2.2 溫經(jīng)湯炮制前后對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響與空白對(duì)照組比較，各溫經(jīng)湯炮制組對(duì)小鼠體質(zhì)量無(wú)影響。表明溫經(jīng)湯炮制前后的安全性一致。見(jiàn)表1。

表1 溫經(jīng)湯炮制前后對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

2.3 溫經(jīng)湯炮制前后對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響與空白對(duì)照組比較，各溫經(jīng)湯炮制組對(duì)小鼠心、肝、脾、肺及腎臟指數(shù)均無(wú)影響。表明溫經(jīng)湯炮制前后的安全性一致。見(jiàn)表2。

表2 溫經(jīng)湯炮制前后對(duì)小鼠臟器指數(shù)的影響 (只，

3 討論

研究表明，溫經(jīng)湯可以改善持續(xù)光照環(huán)境下大鼠的卵巢周期紊亂[3]；治療虛寒型婦科疾病，主要通過(guò)改善婦科虛寒證模型大鼠卵巢能量代謝的失調(diào)狀態(tài)，恢復(fù)卵巢功能[4]；改善大鼠寒凝血瘀證模型血液流變學(xué)指標(biāo)[5]；抑制子宮收縮，并有較好的鎮(zhèn)痛作用[6]；改善子宮內(nèi)膜異位癥大鼠的妊娠功能，治療子宮內(nèi)膜異位癥及不孕，主要通過(guò)改善盆腔粘連、免疫系統(tǒng)功能紊亂、內(nèi)分泌紊亂等[7,8]。通過(guò)降低子宮內(nèi)膜異位癥大鼠在位和異位內(nèi)膜中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及富含半胱氨酸的本性分泌蛋白表達(dá)，影響新生血管形成，抑制異位子宮內(nèi)膜的生長(zhǎng)[9]。

而以上研究大多是研究溫經(jīng)湯藥味或者藥量進(jìn)行加減以達(dá)到相應(yīng)藥效或探討相應(yīng)的機(jī)制，但關(guān)于溫經(jīng)湯炮制后的毒性研究卻未見(jiàn)報(bào)道，因此本研究通過(guò)觀察后發(fā)現(xiàn)，溫經(jīng)湯炮制前后對(duì)小鼠的一般情況無(wú)影響，對(duì)小鼠的體質(zhì)量及臟器指數(shù)也無(wú)影響，最大給藥量為200 g/kg生藥，相當(dāng)于 60 kg 成人約154倍的臨床推薦使用劑量，說(shuō)明溫經(jīng)湯中藥品炮制后對(duì)小鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)無(wú)明顯影響，可能無(wú)明顯毒性，常規(guī)臨床劑量下用藥后是安全可靠的，為進(jìn)一步證明溫經(jīng)湯炮制前后無(wú)明顯毒性，后續(xù)實(shí)驗(yàn)將摘取相關(guān)組織進(jìn)行病理切片，也會(huì)進(jìn)行小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)及大鼠的長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)以保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的有效性。