不同分子分型乳腺癌組織中HSF1的表達情況及其與預后的相關性

宋芳霞 王 楠 劉 維

乳腺癌為臨床高發惡性腫瘤，多發于女性，且近年發生率呈逐年上升趨勢，給我國女性居民的身心安全造成眾多威脅[1-2]。目前，對于該病臨床多數給予手術、放化療等綜合措施診治，然而乳腺癌存在高度的異質性，不同組織學分型患者的治療方法與其獲得的效果不盡相同[3-4]。臨床多項研究表明，熱休克轉錄因子1(HSF1)的水平與較多惡性腫瘤的發生聯系緊密[5]。HSF1可在生理病理性的刺激之下快速地轉錄激活，以此確保內環境的平穩，提升細胞凋亡抗性。然而臨床關于HSF1在乳腺癌組織內的表達與其意義的相關研究報道較為缺乏，基于此，本研究回顧性分析186例女性乳腺癌患者的病歷資料，探究HSF1在不同分子分型乳腺癌組織內的表達情況以及與患者預后的聯系。信息如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2017年3月至2019年3月該院收治的186例女性乳腺癌患者的病歷資料。納入標準：患者均經病理有關檢查證實；患者病歷有關資料齊全；患者依從性較高。排除標準：存在神經疾患者；合并其他惡性腫瘤者；存有精神障礙或難以進行正常交流者；長期服藥者；合并血液系統疾病者；存有凝血功能異常者；合并免疫系統紊亂者。依照雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)以及人表皮生長因子受體2(HER2)表達水平的不同，把所有患者劃分成Luminal A型組(n=68)、Luminal B型組(n=46)、HER2型組(n=34)與三陰性組(n=38)。Luminal A型組年齡34～67歲，平均年齡(50.26±6.69)歲；腫瘤直徑4～10 cm，平均直徑(7.59±0.74)cm；體重指數(BMI)18.4～27.7 kg/m2，平均BMI(23.57±1.64)kg/m2。Luminal B型組年齡35～68歲，平均年齡(50.31±6.74)歲；腫瘤直徑3～9 cm，平均直徑(7.36±0.68)cm；BMI 18.5～27.8 kg/m2，平均BMI(23.64±1.58)kg/m2。HER2型組年齡37～69歲，平均年齡(50.40±6.81)歲；腫瘤直徑3～10 cm，平均直徑(7.40±0.71)cm；BMI 18.7～27.5 kg/m2，平均BMI(23.59±1.71)kg/m2。三陰性組年齡35～65歲，平均年齡(50.26±6.45)歲；腫瘤直徑3～11 cm，平均直徑(7.35±0.68)cm；BMI 18.4～27.7 kg/m2，平均BMI(23.61±1.66)kg/m2。比較4組一般資料，無統計學差異(P>0.05)。

1.2 方法

手術時取所有患者的病灶組織，以免疫組織化學染色法檢測乳腺癌組織內的HSF1、熱休克蛋白70(HSP70)、抗凋亡蛋白B細胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、巨噬細胞移動抑制因子(MIF)表達。取經10%福爾馬林固定與石蠟包埋的病理標本，切成3 μm厚片，脫蠟脫水，以檸檬酸鹽緩沖液行3 min的抗原修復，在室溫條件下以0.3%雙氧水處理20 min，然后以磷酸鹽緩沖液(PBS)清洗，在胎牛血清室溫環境之下封存35 min；然后以此放入鼠抗人HSF1、HSP70，兔抗人Bcl-2、MIF單抗，在4 ℃冰箱內孵育至第2天，PBS清洗，放入經由生物素標記完的二抗，全部以室溫孵育30 min，PBS沖洗，放入一辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素，室溫孵育30 min，PBS沖洗，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，蘇木精復染，脫水、封片，同時以同一病理標本切片作為空白對照，PBS代替一抗，在鏡下分析各指標的表達。鏡下觀察細胞核或細胞質內存在棕黃色顆粒為陽性，陽性細胞率=陽性細胞數/(陽性+陰性)細胞數×100%，0分：陽性細胞率<1%；1分：≥1%且<25%；2分：≥25%且<50%；3分：≥50%且<75%；4分：≥75%。陽性細胞染色強度評分：0分：不染色；1分：淡黃色；2分：棕黃色；3分：棕褐色染色。上述兩者分數相乘總分判定陰陽性，0～3分為陰性，4～12分為陽性。

1.3 觀察指標

(1)4組HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF陽性表達對比。(2)HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF的相關性。(3)運用Kaplan-Meier法分析HSF1陽性、陰性表達患者的3年生存率。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 4組HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF陽性表達對比

Luminal A型組與Luminal B型組患者乳腺癌組織內的HSF1、HSP70、Bcl-2與MIF陽性表達率均低于HER2型與三陰性組患者，有統計學差異(P<0.05)。見表1。

2.2 HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF的相關性

乳腺癌組織內HSF1與HSP70、Bcl-2與MIF表達呈正相關(γ=0.358、0.405、0.426，P<0.05)。見表2。

2.3 HSF1陽性表達與陰性表達患者的生存率

HSF1陽性表達患者的3年生存率為44.25%(50/113)，低于陰性表達患者的67.12%(49/73)，差異有統計學意義(χ2=9.322，P=0.002)。見圖1。

表1 4組HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF陽性表達對比(例，%)

表2 HSF1與HSP70、Bcl-2、MIF的相關性

圖1 HSF1陽性表達與陰性表達患者的Kaplan-Meier生存曲線圖

3 討論

乳腺癌占女性惡性腫瘤死亡率的首位[6-7]，發病早期無明顯癥狀，通常經由體檢或乳腺癌篩查發現，而一旦經檢查證實，則多數患者的病情已發展至中晚期，最終錯失最佳的手術診治時間，預后較差[8-9]。乳腺癌的組織形態、治療反應等均存有較多的不同，加之癌細胞之中各類因子表達情況的不同亦會對乳腺癌的治療效果與患者預后構成較多影響[10-11]。而臨床有相關研究提示，HSF1與較多惡性腫瘤發生聯系緊密，且在乳腺癌癌組織之中表現為過高水平[12]。然而臨床對于HSF1在不同分子分型乳腺癌組織內的表達研究較為缺乏，還需進一步探究。

本研究結果顯示，Luminal A型與 B型組乳腺癌組織內的HSF1、HSP70、Bcl-2與MIF陽性表達率較HER2型與三陰性組低，由此表明，HSF1在HER2型與三陰性乳腺癌內呈過高表達，分析原因與HSF1表達存在極大的可能受分子分型的干擾，推測ER、PR可能與HSF1具有調節功效有關，但仍需進一步探討。ER、PR全部屬正常乳腺上皮細胞之中存有的性激素受體，能夠對乳腺生長、發育予以調節，在發生癌變之時，ER與PR均會減少，促使腫瘤組織的生長與增殖缺乏內分泌激素調節，繼而造成腫瘤分化程度低，預后差。而HSF1在真核細胞的蛋白質分子內表達，其構造與功能處于較高的保守狀況，具有加快機體發育、穩定內環境等作用[13-14]。HSF1表達與活性異常與各類腫瘤的發生密切聯系，且腫瘤惡性程度越高，則其表達水平越高[15]。本研究結果顯示，HSF1陽性表達患者的3年生存率[44.25%(50/113)]低于陰性表達患者[67.12%(49/73)]，表明HSF1表達水平可有效預測乳腺癌患者的預后。乳腺癌組織內HSF1與HSP70、Bcl-2與MIF表達呈正相關(γ=0.358、0.405、0.426，P<0.05)。HS970可在細胞遭受到感染、化學物質等刺激之后迅速的分泌，繼而促進細胞修復與內環境恢復平穩。而HSF1為HSP表達的重要調控因子，同樣屬HSP基因轉錄重要因子，若機體處于應激刺激狀態之時，HSF1將被快速激活，進而加快HSP70轉錄。Bcl-2能夠阻礙細胞因各類因素造成的程序性死亡，于不同癌細胞中呈過高表達，而通過抑制HSF1的表達，可降低Bcl-2表達，進而加快細胞凋亡。另外，MIF會加快腫瘤細胞擴散、侵襲，促使腫瘤組發生、發展。而MIF與HSF1存在相互作用，能夠加速HER2型乳腺癌惡性轉變。由此可知，HSF1在乳腺癌組織內可能通過某種機制干擾上述幾者的表達，繼而給患者帶來不良預后。

綜上所述，HSF1在HER2型與三陰性乳腺癌患者癌組織內呈高表達，且HSF1陽性患者的生存率低于陰性患者，預后更差。