多發性骨髓瘤患者的CD38+CD138+漿細胞表面Notch1的表達水平及臨床意義

劉 翔 胡陶玉

四川省宜賓市第二人民醫院醫學檢驗科 644000

多發性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是臨床上較為常見的一種惡性血液系統疾病[1-2]，是由于骨髓中的漿細胞發生異常增生，使患者血液以及尿液中出現大量的免疫球蛋白，同時也會導致患者機體各個組織以及器官受到不同程度的損傷，使患者機體免疫力下降，并發貧血、嚴重感染、腎衰竭等各種疾病[3-4]。多發性骨髓瘤多發生于中老年人群體中，男性患者所占比例較大，其病因目前尚未明確，且病情發展迅速，預后較差，若不及時進行治療，會對患者的生命造成很嚴重的威脅[5]。因此多發性骨髓瘤的早期診斷與治療，對延長患者生存期有著極其重要的意義。本文選取我院血液科于2020年8月—2021年3月期間收治的29例多發性骨髓瘤患者，探究多發性骨髓瘤患者的CD38+、CD138+漿細胞表面Notch1的表達水平及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院血液科于2020年8月—2021年3月收治的29例多發性骨髓瘤患者作為研究組，其中男17例，女12例，年齡45～84歲，中位年齡51歲。選取同一時期內于我院進行體檢的29例健康人作為對照組，其中男15例，女14例，年齡42～86歲，中位年齡54歲。兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本次研究經過醫學倫理學委員會批準后進行研究。納入標準：(1)研究組對象均符合《血液病診斷及療效標準》中的診斷標準[6]，確診為多發性骨髓瘤,且均為初次治療患者；(2)所選對象均無溝通障礙以及語言表達障礙，且自愿簽署對本研究的知情同意書。排除標準：(1)患者存在溝通障礙和(或)語言表達障礙；(2)患伴有其他重大器官性疾病和(或)伴有惡性腫瘤疾病等影響患者病情的穩定。

1.2 治療方法 研究組患者均采用硼替佐米聯合地塞米松進行治療。硼替佐米注射液(生產企業：Janssen-Cilag International N.V.；批準文號：H20050308)單次注射劑量為1.3mg/m2，且每周注射2次，連續注射2周(即在治療的第1、4、8和11天時進行注射)后需要停藥10d(即在治療的第12～21天時停藥)；地塞米松注射液(生產企業：成都天臺山制藥有限公司；批準文號：H51020513)8mg進行肌肉注射，每天注射1次。21d為1個治療療程，本次治療共6個療程。在每個療程結束后以及在出院后每2個月，患者需要進行相關的骨髓檢查，并檢測患者初期、緩解期以及進展期骨髓液中CD38+CD138+漿細胞表面Notchl的表達情況。

1.3 檢測方法 采集兩組對象的骨髓液于真空肝素抗凝管中，并通過200目濾網將骨髓液進行過濾備用。各取兩組對象100μl骨髓液樣本于EP管中，并分別加入15μl的CD45-PerCP抗體、CD38-PE抗體、CDl38-FITC抗體以及Notchl-APC抗體，進行充分渦旋混勻，并在4℃環境中避光靜置15min，15min后在每個樣本中加入2ml溶血素，再次渦旋混勻后，在室溫避光的條件下靜置10min，以1 500r/min的轉數離心5min，棄去上清液后，加入1ml PBS緩沖液重懸細胞形成細胞懸液，再次以1 500r/min的轉數離心5min，此操作重復2次，目的是對細胞樣本進行清洗，最后通過流式細胞儀檢測兩組骨髓液樣本中CD38+CD138+漿細胞和CD38+CD138-漿細胞表面Notchl的表達水平[7-8]。

1.4 觀察指標 (1)比較兩組骨髓樣本中CD38+CD138+漿細胞和CD38+CD138-漿細胞表面Notchl的表達水平。(2)比較研究組患者在不同時期(包括初期、緩解期、發展期)CD38+CD138+漿細胞表面Notchl的表達情況。不同時期的定義如下：①初期：患者在首次診斷為多發性骨髓瘤時的時間點；②緩解期：患者在入院接受治療的6個療程中，接受骨髓穿刺檢查結果綜合評價最佳的時間點；③進展期：患者治療療程結束出院后病情發生進展的時間點。

2 結果

2.1 兩組漿細胞表面Notch1表達水平比較 研究組患者骨髓液中CD38+CD138+漿細胞表面Notch1的表達率為(62.35±19.64)%，顯著高于研究組CD38+CD138-漿細胞表面的(40.18±16.65)%、對照組CD38+CD138+漿細胞表面的(29.90±7.28)%，以及對照組CD38+CD138-漿細胞表面的(33.79±15.22)%，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組漿細胞表面Notch1表達水平比較

2.2 研究組不同時期與對照組CD38+CD138+漿細胞表面Notch1表達情況比較 研究組患者在初期和進展期骨髓液CD38+CD138+漿細胞表面Notch1表達率分別為(62.35±19.64)%、(45.58±10.44)%，均高于研究組緩解期的(39.34±8.23)%和對照組的(29.90±7.28)%；同時，研究組患者緩解期骨髓液CD38+CD138+漿細胞表面Notch1表達率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 研究組不同時期與對照組CD38+CD138+漿細胞表面Notch1表達情況比較

3 討論

多發性骨髓瘤多發生于中老年人群體中，男性的患病概率高于女性，目前其病因尚未明確。多發性骨髓瘤患者的生存期較短，且病情發展迅速，預后較差，如若不及時進行治療，會對患者的生命造成很嚴重的威脅。患者在患病后，其骨髓液中的漿細胞會發生異常增生，并在周圍的組織和骨骼中浸潤[9]，導致部分組織和臟器發生不同程度的損傷，骨髓的造血功能也受到破壞，使患者的免疫功能低下，并發貧血、嚴重感染、腎衰竭等各種疾病，危害患者生命[10-11]。CD38的表達與細胞增殖有關，且檢測結果顯示其在漿細胞表面表達量較高，是漿細胞表面的一種特異性標記。CD138是細胞表面的黏附因子，其功能有很多，主要有促進細胞增殖、維持細胞正常形態、抑制腫瘤分化等。由于接近100%的多發性骨髓瘤患者惡性漿細胞CD138表達為陽性，并且在正常粒細胞中，CD138表達為陰性，因此將CD138作為惡性漿細胞的特異性指標[12]。

近幾年來有研究結果表明，漿細胞表面Notch1的表達與多發性骨髓瘤有著密不可分的關系[13]。Notch受體目前一共有4種，在與其他細胞表面的配體結合后就會被激活，與細胞核內的轉錄因子相互作用后對目的基因進行調節，從而影響細胞的增殖和凋亡。抑制骨髓細胞表面Notch1基因表達后，會下調Hes1蛋白的表達，誘導PTEN抑癌基因表達的上調，同時使Bcl-2的表達下調。Bcl-2是一種抗凋亡蛋白，因此會有效抑制癌細胞的增殖，促進細胞凋亡[14]。本文探究了多發性骨髓瘤患者的CD38+CD138+漿細胞表面Notch1的表達水平及其臨床意義。

研究組骨髓液中CD38+CD138+漿細胞表面Notch1的表達率為(62.35±19.64)%，顯著高于研究組CD38+CD138-漿細胞表面的(40.18±16.65)%、對照組CD38+CD138+漿細胞表面的(29.90±7.28)%，以及對照組CD38+CD138-漿細胞表面的(33.79±15.22)%(P<0.05)。結果說明Notch1在MM患者的CD38+CD138+漿細胞表面高度表達。同時研究組患者在初期和進展期骨髓液CD38+CD138+漿細胞表面Notch1表達率分別為(62.35±19.64)%、(45.58±10.44)%，均高于研究組緩解期的(39.34±8.23)%和對照組的(29.90±7.28)%(P<0.05)。結果表明，Notch1的表達量與患者的疾病發展以及預后情況有著密切的關系，呈現病情越嚴重Notch1的表達量越高的趨勢。這一研究結果的發現為多發性骨髓瘤疾病的發生發展、治療療效以及預后情況的監測提供了一個新的方向。

綜上所述，在多發性骨髓瘤患者骨髓液中CD38+CD138+漿細胞表面Notch1表達較高，并且患者的治療效果越好，Notch1表達量越低，在多發性骨髓瘤的檢測、進展、治療和預后中發揮極其重要的意義。