腰果過敏原Ana o 3蛋白的分離純化及熱穩定性研究

肖志文， 胡 帥， 金雪玲， 陳紅兵， 武 涌

(1.南昌大學 食品科學與技術國家重點實驗室， 江西 南昌 330047；2.南昌大學 食品學院， 江西 南昌 330047；3.南昌大學 中德聯合研究院， 江西 南昌 330047；4.江西省農業科學院 農產品加工研究所， 江西 南昌 330200;5.南昌大學 第一附屬醫院 耳鼻咽喉頭頸外科， 江西 南昌 330006)

腰果(AnacardiumoccidentaleLinn.)是被子植物門(Angiospermae)木蘭綱(Magnoliopsida)無患子目(Sapindales)漆樹科(Anacardiaceae)腰果屬(Anacardium)植物的果實，又稱槚如果。原產于西印度群島和巴西東北部，全球熱帶地區已廣泛引種栽培。腰果過敏是一種僅次于核桃過敏的常見堅果過敏，其全球發生率呈上升趨勢[1]。腰果在我國也是較為常見的致敏食物之一，研究表明腰果處于我國食入性過敏原的前3位[2-4]。腰果過敏臨床癥狀涉及多個器官或系統，根據國內早期的病例報道，腰果過敏患者多表現為過敏性休克、體溫下降、全身瘙癢、腹部疼痛及呼吸困難等，甚至有因腰果過敏死亡的案例[5]。

腰果中過敏原蛋白主要分為3類：7S豌豆球蛋白(Ana o 1)、11S豆球蛋白(Ana o 2)和2S白蛋白(Ana o 3)。這3種蛋白被歸類為種子貯藏蛋白[6]，且都屬于I類食物過敏原[7]。其中，腰果過敏原Ana o 3蛋白是分子質量為16.3 kDa的2S白蛋白，由5個α-螺旋組成，包含2個由半胱氨酸二硫鍵連接的亞基。國內外已圍繞腰果過敏原Ana o 3蛋白的純化進行了相關的研究。迄今為止，Reitsma等[8]通過多步硫酸銨沉淀結合超濾法分離出腰果過敏原Ana o 3蛋白，Mattison等[9]采用硫酸銨分級沉淀結合羥基磷灰石低壓色譜系統純化出腰果過敏原Ana o 3蛋白。然而，目前腰果過敏原Ana o 3蛋白分離純化的效果較低，且分離過程復雜，而僅通過陰離子交換層析高效純化出高純度的腰果過敏原Ana o 3蛋白尚未見報道。……