LTA4H 基因多態(tài)性對(duì)漢族兒童支氣管哮喘患者使用孟魯司特鈉療效及肺功能的影響

楊一民，黃小玲，李溦，洪菲萍，鐘瑋，范海婷，李璐琦，王穎，黃永蓮

（1.廈門市中醫(yī)院兒科，福建 廈門 361000；2.廈門市海滄區(qū)婦幼保健院，福建 廈門 361000；3.廈門弘愛(ài)醫(yī)院新生兒科，福建 廈門 361000；4.福建中醫(yī)藥大學(xué)，福建 福州 350108）

支氣管哮喘（bronchial asthma）是兒童呼吸系統(tǒng)最常見(jiàn)的慢性疾病。據(jù)報(bào)道[1]，1990-2010 年間，我國(guó)兒童哮喘每10 年發(fā)病率分別上升64.84%和96.10%，預(yù)計(jì)2025 年哮喘患兒將增加至4 億。白三烯受體拮抗劑（LTRA）是國(guó)內(nèi)外哮喘防治指南推薦的最常用藥物之一，但不同個(gè)體間治療療效存在差異性，甚者伴有嚴(yán)重的不良反應(yīng)。有研究認(rèn)為[2]，這種療效差異是由單核苷酸變異引起的DNA 序列變化即單核苷酸多態(tài)性所導(dǎo)致的。另外，某些基因位點(diǎn)的多態(tài)性還與哮喘的易感性和病情嚴(yán)重程度具有相關(guān)性[3]。本研究通過(guò)檢測(cè)70 例漢族哮喘患兒LTA4H 基因rs2660845 位點(diǎn)分布情況，研究LTA4H基因多態(tài)性對(duì)漢族兒童支氣管哮喘患者使用孟魯司特鈉療效的影響，分析不同基因型患兒治療前后肺功能的變化情況，以期更好地指導(dǎo)個(gè)體化用藥，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)醫(yī)療。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集廈門市中醫(yī)院2019 年10 月-2021 年3 月就診的70 例經(jīng)孟魯司特鈉治療的哮喘患兒臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》中輕、中度哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；②漢族，年齡4～14 歲；③能配合完成肺功能檢測(cè)者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①既往有行插管或機(jī)械通氣者；②合并嚴(yán)重全身性疾病或精神病患者；③對(duì)孟魯司特鈉過(guò)敏者；④依從性差者。本研究經(jīng)廈門市中醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患兒家屬知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 口服孟魯司特鈉（杭州默沙東制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字J2013OO54、J20130053，規(guī)格：5 mg×5 片、4 mg×5 片)，服用方法：4 歲≤年齡＜6 歲者4 mg/d；6 歲≤年齡≤14 歲者5 mg/d，療程6 周。

1.2.2 基因檢測(cè) 患兒抽血2 ml，抗凝保存于-20℃，并進(jìn)行基因測(cè)序鑒定（北京康旭醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所有限公司），分為AA、AG、GG 三種基因型。

1.2.3 肺功能檢測(cè) 患兒首診和療程結(jié)束后，采用Master Sreenc 肺功能儀（德國(guó)JAEGER 公司）進(jìn)行肺功能檢測(cè)。參考《兒童肺功能系列（二）：肺容積和通氣功能指南》[5]擬定以下研究指標(biāo)：FEV1、PEF、FEV1%、FVC、FEF25、FEF50、FEF75。

1.3 觀察指標(biāo) 分析患兒LTA4H 基因rs2660845 位點(diǎn)基因型分布情況，比較不同基因型患兒臨床療效及各基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能。參照文獻(xiàn)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)[6]評(píng)價(jià)其臨床療效，其中臨床控制：癥狀完全緩解，偶有輕度發(fā)作可自行緩解；顯效：癥狀明顯緩解，發(fā)作次數(shù)減少2/3；好轉(zhuǎn)：癥狀有所改善，發(fā)作次數(shù)減少1/3；無(wú)效：癥狀無(wú)改善甚至加重。總有效率=（臨床控制+顯效+好轉(zhuǎn)）/總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，應(yīng)用H-W 平衡檢驗(yàn)分布情況；計(jì)量資料用（）表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 LTA4H 基因rs2660845 位點(diǎn)基因型分布情況經(jīng)統(tǒng)計(jì)，70 例患兒AA 型16 例（22.86%）、AG 型25例（35.71%）、GG 型29 例（41.43%），等位基因頻率為A 41.00%、G 59.00%。應(yīng)用H-W 平衡檢驗(yàn)分布情況，結(jié)果顯示rs2660845 SNP 基因分布符合遺傳平衡定律（P＞0.05）。

2.2 LTA4H 基因多態(tài)性與孟魯司特鈉療效的關(guān)系70 例哮喘患兒經(jīng)孟魯司特鈉治療6 周后總有效率為78.57%；AG 型、GG 型總有效率均高于AA 型（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 不同基因型患兒臨床療效比較[n（%）]

2.3 不同基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能比較 AA 型治療前與治療6 周后FEV1、PEF、FEV1%、FVC、FEF25、FEF50、FEF75 比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2；AG 型治療6 周后FEV1、PEF、FVC 高于治療前（P＜0.05），但治療前后FEV1%、FEF25、FEF50、FEF75 比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表3；GG 型治療6 周后FEV1、PEF、FEF25、FEF50、FEF75 高于治療前（P＜0.05），但治療前后FVC、FEV1%比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表4。

表2 AA 基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能比較（）

表2 AA 基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能比較（）

表3 AG 基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能比較（）

表3 AG 基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能比較（）

表4 GG 基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能比較（）

表4 GG 基因型患兒治療前與治療6 周后肺功能比較（）

3 討論

LTA4H 基因位于染色體12q22 上，其編碼合成的LTA4H 酶能催化白三烯A4 水解為白三烯B4，增加血管通透性，誘導(dǎo)支氣管痙攣，引起哮喘發(fā)作[7，8]。孟魯司特鈉作為白三烯受體拮抗劑，通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性與白三烯受體結(jié)合以減輕氣道炎癥和高反應(yīng)性，從而改善哮喘癥狀和肺功能，成為哮喘防治中的重要藥物之一[9]。研究發(fā)現(xiàn)[10-13]，孟魯司特鈉在不同基因型哮喘患兒中表現(xiàn)出明顯的個(gè)體差異性，已知LTC4S、ALOX5、LTC4H 等基因多態(tài)性均可能對(duì)其療效產(chǎn)生影響，但不同種族對(duì)應(yīng)用白三烯受體（CysLTR1）拮抗劑治療的反應(yīng)不同。國(guó)外有學(xué)者以白色人種為對(duì)象進(jìn)行了LTA4H 基因多態(tài)性的小樣本研究，結(jié)果表明攜帶等位基因A 的哮喘患者在使用孟魯司特鈉后PEF、FEV1參數(shù)明顯升高，與哮喘癥狀頻率相關(guān)[12]。國(guó)內(nèi)關(guān)于該基因多態(tài)性與白三烯受體拮抗劑療效的相關(guān)性研究報(bào)道較少，故研究LTA4H 基因多態(tài)性對(duì)漢族兒童支氣管哮喘患者使用孟魯司特鈉療效及肺功能的影響，有助于揭示漢族哮喘患兒對(duì)白三烯受體拮抗劑治療反應(yīng)差異的遺傳學(xué)特征。

本研究探討LTA4H 基因多態(tài)性對(duì)孟魯司特療效及肺功能的影響方面，發(fā)現(xiàn)AG 型、GG 型總有效率高于AA 型（P＜0.05）；AA 型患兒療程結(jié)束后，肺功能未見(jiàn)明顯改善，說(shuō)明孟魯司特鈉對(duì)AA 型患兒的療效欠佳，推測(cè)AA 基因型可能是孟魯司特鈉的不敏感基因型或可稱為耐藥基因型。此外，AG 型治療6 周后FEV1、PEF、FVC 高于治療前（P＜0.05），但治療前后FEV1%、FEF25、FEF50、FEF75 比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；GG 型治療6 周后FEV1、PEF、FEF25、FEF50、FEF75 高于治療前（P＜0.05），但治療前后FVC、FEV1%比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），以上結(jié)果說(shuō)明攜帶G 等位基因的哮喘患兒應(yīng)用孟魯司特鈉療效更佳、肺功能明顯好轉(zhuǎn)。因此，建議臨床上對(duì)于國(guó)內(nèi)漢族兒童LTA4H 基因rs2660845位點(diǎn)表型為AA 型的哮喘患兒，其抗炎平喘藥物的選擇可優(yōu)先考慮其他類型藥物，如吸入性糖皮質(zhì)激素等。

綜上所述，LTA4H 基因rs2660845 位點(diǎn)多態(tài)性會(huì)對(duì)白三烯受體拮抗劑產(chǎn)生一定的療效異質(zhì)性，但其作用機(jī)制還有待探索。本研究樣本量較小，且受地域環(huán)境的影響，尚不能完全闡述該基因多態(tài)性與哮喘之間的關(guān)系，需要建立大樣本、多中心的研究，以期為漢族兒童支氣管哮喘患者的個(gè)體化用藥提供理論基礎(chǔ)。