TB-IGRA在不同年齡段肺結核患者中的應用研究*

張艷 劉傳江 江儒東 薛春萍 汪闖 周光宏 龔勛

肺結核是一種由結核桿菌引起的慢性傳染性疾病，以呼吸道傳播為主要傳播途徑[1-2]。據相關研究調查顯示，2010 年以后，我國華東某地區肺結核發病率較高，且2000-2018 年某系統共報告肺結核2 088 例，3-5 月疾病發生率為峰值[3]?？梢?，在空氣污染不斷加劇下，肺結核發病率有所上升。而為了避免肺結核的大范圍傳播，早發現、早診斷、早治療十分關鍵。由于結核分枝桿菌感染后人體以T 細胞免疫為主要反應，該反應會產生γ 干擾素（IFN-γ）等活化效應產物，檢測IFN-γ 水平能了解是否存在結核分枝桿菌感染[4-5]。結核感染T 細胞γ 干擾素釋放試驗（TB-IGRA）是一種新型檢測方法，主要通過檢測特異度IFN-γ 的釋放來診斷肺結核[6]。然而，由于肺結核患者的年齡差異，會在一定程度上影響TB-IGRA 檢測結果，但近些年來尚缺乏TB-IGRA 對不同年齡段肺結核患者診斷效能研究報道。對此，本次研究選取2021 年1 月-2022 年3 月麻城市人民醫院接收的128 例疑似為肺結核患者作為此次研究對象，旨在研究TBIGRA 在不同年齡段肺結核患者診斷及療效評估中的應用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年1 月-2022 年3 月本院接收的128 例疑似為肺結核患者作為此次研究對象，納入標準：臨床疑似肺結核；年齡≥18 歲；臨床資料完整。排除標準：合并哮喘、乙型或丙型肝炎、艾滋病、自身免疫性病等疾??；近3 個月內使用過影響免疫功能藥物；合并心肝腎功能不全或惡性腫瘤；存在嚴重精神疾病既往史。根據患者的年齡不同劃分為青年組（18～44 歲，共25 例）、中年組（45～59 歲，共50 例）、老年組（≥60 歲，共53 例）。研究已獲得麻城市人民醫院醫學倫理委員會批準，且患者及其家屬均表示同意參與此次研究。

1.2 檢測方法 青年組、中年組、老年組均進行痰涂片抗酸染色試驗檢測、TB-IGRA 檢測，具體方法如下。

痰涂片抗酸染色試驗檢測：晨起時，指導患者用溫開水漱口后咳出深部痰液，取帶有血液、黏液的痰液作為標本，并送至檢驗科檢測。用萋-尼氏染色方法檢測，判斷標準：藍色背景下看到紫紅色桿狀抗酸桿菌。連續進行3 d 送檢，3 次中出現≥2 次的紫紅色桿狀抗酸桿菌則為陽性。

TB-IGRA 檢測：采集患者晨起空腹靜脈血5 mL，置于肝素鈉綠色抗凝試管中保存，顛倒混勻3～5 次，于2 h 內送至檢驗科檢測。采用化學發光法檢測，試劑盒采用的是基于雙抗體夾心法原理的吖啶酯直接化學發光免疫分析方法。純化的特異性單克隆抗體預先包被在磁微粒表面，加入待測樣本后，樣本中的相應抗原與磁微粒表面的特異性抗體相結合，同時也會和吖啶酯標記的另一株特異性單克隆抗體相結合，在磁微粒表面形成特異性抗體-抗原-吖啶酯標記的抗體的免疫復合物，洗滌后，磁微粒表面的免疫復合物上的吖啶酯經過激發后發出光子。發光儀光學系統測定樣本的相對發光強度，與標準曲線相比較，可以計算出相應抗原的濃度。結果判定：測試培養管（T）含量值=a（pg/mL），本底對照培養管（N）含量值=b（pg/mL），陽性對照培養管（p）含量值=c（pg/mL）[7]，見表1。

表1 TB-IGRA檢測結果判定

1.3 觀察指標及評價標準 觀察、對比痰涂片抗酸染色試驗、TB-IGRA 檢測的陽性檢出率。同時，以結核菌培養為“金標準”，對比TB-IGRA 在不同年齡段肺結核中的診斷效能（敏感度、特異度、準確度）。敏感度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%，特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）×100%，準確度=（真陽性+真陰性）/總例數×100%。

1.4 統計學處理 SPSS 22.0 為此次研究處理數據所用的統計學軟件，計量資料以（）表示，使用t檢驗；組間對比采用重復測量的方差分析，組間兩兩對比采用LSD 法；計數資料以率（%）表示，使用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組一般資料對比 青年組：年齡21～44 歲，中年組：年齡45～59 歲，老年組：年齡60～88 歲。三組性別、是否吸煙對比差異均無統計學意義（P＞0.05），年齡對比差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 三組一般資料對比

2.2 痰涂片抗酸染色試驗、TB-IGRA 和結核菌培養結果對比 青年組、中年組、老年組結核菌培養、TB-IGRA 檢測的陽性率均高于痰涂片抗酸染色試驗（P＜0.05），見表3。

表3 痰涂片抗酸染色試驗、TB-IGRA和結核菌培養結果對比[例（%）]

2.3 TB-IGRA 在不同年齡段肺結核中的診斷效能 TB-IGRA 檢測下，青年組、中年組、老年組的敏感度、準確度、特異度對比差異均無統計學意義（P＞0.05），見表4。

表4 TB-IGRA在不同年齡段肺結核中的診斷效能（%）

3 討論

結核分枝桿菌感染肺部是肺結核的主要病因，而肺結核主要傳染源為痰中帶菌的肺結核患者[8]。肺結核多發于機體免疫功能低下群體，患者以咳嗽咳痰、痰中帶血、午后低熱、乏力、盜汗、食欲減退等為主要臨床癥狀，若患者獲得及時診斷和針對性治療，大部分可痊愈。目前，我國肺結核流行程度較高，據彭偉等[9]流行病學調查顯示，2012-2016 年共報告結核病患者10 152 例，多年平均報告發病率為54.9/（10 萬），年報告發病率呈緩慢下降的趨勢，有著明顯的季節性高發現象。雖然在我國醫療水平的不斷提高下，結核病發病率有所降低，但依舊要加強肺結核的早期診斷，以有效控制疾病傳播，保證我國居民健康安全。

從現階段來看，檢測患者是否存在結核分枝桿菌感染是診斷肺結核的關鍵。痰涂片抗酸染色試驗作為檢測結核分枝桿菌的常用方法，雖然該檢測方法操作簡便，但敏感度相對較低，加之診斷醫師的主觀判斷差異，即使涂片呈陽性也難以區分非結核分枝桿菌，導致診斷準確度較低，極易耽誤治療[9-10]。TB-IGRA 作為一種新型檢測方法，其原理為檢測結核分枝桿菌感染患者體內特異度T 細胞，在重新接觸結核分枝桿菌抗原后觀察INF-γ 的表達情況[11-12]。該檢測方法對結核分枝桿菌的靈敏度較高，近年來成了結核病診斷研究的重點檢測技術。徐瑤等[13]研究指出，在結核患者中TB-IGRA 能有效評估疾病活動度。康新桂等[14]則將TB-IGRA 應用于脊柱結核診斷中，結果發現，TB-IGRA 的敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為85.7%、68.8%、82.8%、73.3%。從上述研究得知，TB-IGRA 在結核病中具有較高應用價值。據本次研究表明，結核菌培養、TB-IGRA 檢測的青年組、中年組、老年組陽性率均高于痰涂片抗酸染色試驗（P＜0.05）。該結果提示，相較于痰涂片抗酸染色試驗，TB-IGRA 在肺結核診斷中的效果更優，且TB-IGRA 的診斷結果與“金標準”接近。相較于痰涂片抗酸染色試驗等常規檢出，TB-IGRA 檢測結果不會受到非結核分枝桿菌感染、卡介苗接種的影響，敏感度較高；所測細胞因子產生的交叉反應不會影響TB-IGRA 檢測的特異度[15-16]。同時，TBIGRA 檢測耗時較短，能避免檢測時間過長而受外界環境因素影響，使得TB-IGRA 檢測的準確度提升。

人體感染結核分枝桿菌后多以T 細胞免疫為主要反應。但不同年齡段人群的機體免疫力存在一定差異性，會給TB-IGRA 檢測結果造成一定影響。為了將TB-IGRA 檢測更好地應用于肺結核診斷中，必須了解對該檢測方法在不同年齡段的診斷效能，以指導肺結核篩查、診斷工作的開展，避免疾病的流行。據本次研究表明，在TB-IGRA 檢測下，青年組（95.45%、88.00%、33.33%）、中年組（97.83%、92.00%、25.00%）、老年組（98.00%、94.34%、33.33%）的敏感度、準確度、特異度對比差異均無統計學意義（P＞0.05）。該結果提示，TBIGRA 檢測在青年、中年和老年群體具有較高的敏感度和準確度。但老年群體隨著年齡的增長，機體各項功能逐漸減退，細胞免疫功能減弱[17-18]。當感染結核分枝桿菌后T 細胞免疫反應相對較弱，這可能會對檢測結果造成影響，但本次研究尚未發現這一點。雖然本次認為TB-IGRA 對青年、中年和老年肺結核群體的診斷效能較高，但由于缺乏相關研究數據對比佐證，故結論存在一定片面性，后續還需開展更多研究進行進一步對比論證。此外，對于肺結核的防治，除了早診斷、早治療之外，還需加大結核病預防宣傳力度，及時控制傳染源，切斷傳播途徑，保護易感染人群，以盡可能降低結核患病率，減輕社會醫療負擔[19-20]。

綜上所述，TB-IGRA 在肺結核中具有較高的診斷價值，無論是在青年、中年群體還是老年群體，該檢測方法的診斷敏感度、準確度均較高。但由于此次研究樣本量僅有128 例，尤其是青年組的病例數較少，導致獲取的研究數據存在一定局限性，后續還需加大樣本量加強研究驗證。