化學發光免疫分析在臨床檢驗中的診斷價值

韋洪偉

山東省臨沂市婦幼保健院檢驗科，山東臨沂 276000

體外診斷是指在人體之外，通過對人體樣本（血液、體液、組織液等）進行檢測而獲取臨床診斷信息，進而判斷疾病或機體功能的產品和服務。根據檢測原理和檢測方法的分類，體外診斷主要可分為生化診斷、免疫診斷、分子診斷、即時診斷、微生物診斷、尿液診斷、凝血類診斷、血液診斷等，其中免疫診斷是體外診斷的重要分支。在待測物中特殊物質的檢測中，化學發光免疫分析技術能夠以較快的速度對乙型肝炎病毒的表面抗體、抗原等標志物進行測定，同時還能夠有效保證檢測的準確度，最終作為臨床檢驗的重要依據[1]。本研究統計分析2020年5月至2021年4月山東省臨沂市婦幼保健院收治的50例疑似乙型肝炎患者的臨床資料，探討臨床檢驗中化學發光免疫分析的應用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年5月至2021年4月山東省臨沂市婦幼保健院收治的50例疑似乙型肝炎患者，其中女23例（46.00%），男27例（54.00%）；年齡19～72歲，平均（46.32±7.26）歲；病程6個月～21年，平均（10.25±1.86）年。納入標準：①病歷資料齊全；②均接受化學發光免疫分析、乙型肝炎病毒DNA載量檢測。排除標準：①合并器質性疾病者；②合并全身性疾病者；③智力殘缺者[3]。本研究通過醫院醫學倫理委員會批準，患者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 乙型肝炎病毒DNA載量抽血檢測乙型肝炎病毒DNA。DNA≥500拷貝/ml為陽性；＜500拷貝/ml為陰性[2]。

1.2.2 化學發光免疫分析預處理待測標本，充分利用還原試劑，將乙型肝炎核心抗原（hepatitis B core antigen，HBcAg）加入恒溫培育，將抗-HBc（經釕標記）、抗-HBc（經生物素標記）加入前保證HBcAg和抗-HBc有抗原抗體復合物形成，然后使其結合HBcAg，之后將鏈霉素包被的磁珠加入，使鏈霉素和生物素親和作用的固相復合物形成，用三丙胺沖洗前保證磁珠吸附在電極表面，為電極表面結合物發光反應的發生提供有利條件，待檢標本抗-HBc量和檢出的光信號呈負相關，即待檢標本抗-HBc量隨著光信號的增強而減少。

1.3 觀察指標及評價標準

①血清標志物陽性情況。化學發光免疫分析檢測乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen，HB sAg）、乙型肝炎表面抗體（hepatitis B surface antibody，HBsAb）、乙型肝炎核心抗體（hepatitis B core antibody，HBcAb）、乙型肝炎e抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）、乙型肝炎e抗體（hepatitis B e antibody，HBeAb）陽性標準依據博陽的試劑盒說明書[4]，乙型肝炎病毒DNA載量檢測HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb陽性標準依據博陽儀器[5]。②應用價值。以臨床確診（病理）為金標準。靈敏度＝真陽性/（真陽性+假陰性）例數/總例數×100%；特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）例數/總例數×100%；準確度=（真陽性+真陰性）例數/總例數×100%；陽性預測值=真陽性/（真陽性+假陽性）例數/總例數×100%；陰性預測值=真陰性/（真陰性+假陰性）例數/總例數×100%。

1.4 統計學方法

采用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方法血清標志物陽性情況的比較

化學發光免疫分析檢測HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性率均高于乙型肝炎病毒DNA載量，差異有統計學意義（P＜0.05）；但二者檢測HBsAb、HBcAb的陽性率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）（表1）。

表1 兩種檢測方法血清標志物陽性情況的比較[n（%）]

2.2 化學發光免疫分析和乙型肝炎病毒DNA載量應用價值比較

以臨床確診為金標準，化學發光免疫分析檢測的靈敏度為97.96%（48/49），特異度為100.00%（1/1），準確度為98.00%（49/50），陽性預測值為100.00%（48/48），陰性預測值為50.00%（1/2）。乙型肝炎病毒DNA載量檢測的靈敏度為81.63%（40/49），特異度為100.00%（1/1），準確度為82.00%（41/50），陽性預測值為100.00%（40/40），陰性預測值為10.00%（1/10）。化學發光免疫分析檢測的靈敏度、準確度、陰性預測值均高于乙型肝炎病毒DNA載量，差異有統計學意義（P＜0.05），但二者檢測的特異度、陽性預測值比較，差異無統計學意義（P＞0.05）（表2～4）。

表2 化學發光免疫應用價值分析（例）

表3 乙型肝炎病毒DNA載量應用價值分析（例）

3 討論

乙型肝炎病毒會引發乙型肝炎，在乙型肝炎發病情況的判定中，對乙型肝炎病毒表面抗原陽性情況進行檢測能夠將有效依據提供給臨床[6-7]。乙型肝炎病毒DNA載量是臨床通常采用的乙型肝炎病毒DNA載量，其具有便攜的操作，但是具有較低的檢測靈敏度，極易誤診，進而引發醫療矛盾[8]。化學發光免疫分析技術指以光學識別為基礎，將物質間特殊化學反應充分利用起來進行特異度鑒別，經檢測設備中的兩端電極使一個通路形成于樣品間，促進電流的產生，進而形成新物質，傳遞能量，促進一些物質電子躍遷的發生，從而促進光信號的形成，被檢測設備獲取后，在對標志物濃度進行判定的過程中可以依據光電信號。近年來，化學發光免疫分析技術能夠使現代臨床檢驗的質量標準得到有效滿足，檢測原理為特異性結合抗體和抗原，加入氧化劑，將有利條件提供給發光物質的產生，然后經檢測設備接收光信號，合理判斷檢測濃度，途徑為對光信號強弱進行觀察[9]。本研究結果表明，化學發光免疫分析檢測HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性率均高于乙型肝炎病毒DNA載量，差異有統計學意義（P＜0.05），提示化學發光免疫分析技術能夠顯著提升乙型肝炎陽性檢出率。

表4 化學發光免疫分析和乙型肝炎病毒DNA載量應用價值比較（%）

在乙型肝炎病毒抗體和抗原的檢測中，化學發光免疫分析技術的應用價值高[10]。同時，在腫瘤標志物的檢測中，化學發光免疫分析技術的應用價值也高，其能夠直接標定腫瘤標志物，輔助檢驗患者腫瘤組織存在情況，還能夠對腫瘤組織分泌或破壞腫瘤組織后形成的特異性蛋白進行檢測[11]。相關研究[12-15]表明，在乙型肝炎的診斷中，化學發光免疫分析技術檢測能夠促進乙型肝炎陽性檢出率的提升，并提升血清標志物陽性檢出率，敏感度與特異度均較高，達到了95%以上，在乙型肝炎、腫瘤等診斷中具有較高的應用價值。本研究結果表明，化學發光免疫分析檢測的靈敏度為97.96%（48/49），特異度為100.00%（1/1），準確度為98.00%（49/50），陽性預測值為100.00%（48/48），陰性預測值為50.00%（1/2）。乙型肝炎病毒DNA載量檢測的靈敏度為81.63%（40/49），特異度為100.00%（1/1），準確度為82.00%（41/50），陽性預測值為100.00%（40/40），陰性預測值為10.00%（1/10）。化學發光免疫分析檢測的靈敏度、準確度、陰性預測值均高于乙型肝炎病毒DNA載量，差異有統計學意義（P＜0.05），但二者檢測的特異度、陽性預測值之間的差異無統計學意義（P＞0.05），和相關研究結果一致[16-18]。

綜上所述，臨床檢驗中化學發光免疫分析的應用價值較乙型肝炎病毒DNA載量高，靈敏度、準確度、陽性預測值更高，值得推廣。