多囊卵巢綜合征患者陰道微生態與性激素的相關性分析

孔紫靖

廣東省中山市小欖人民醫院婦科，廣東中山 528415

多囊卵巢綜合征（polycystic overarian syndrome，PCOS）是育齡婦女常見的疾病，發病率高達6%～15%，其主要的臨床表現有月經不調、高雄激素血癥以及卵巢多囊樣改變等，其中多伴有內分泌異常，甚至影響排卵導致不孕癥[1]。陰道微生態系統作為人體微生態系統中重要的組成部分，具有健康功能的陰道微生態系統擔任著女性生殖健康重要門戶這個重要角色[2]。有研究表明[3]，PCOS存在性激素紊亂，主要表現為睪酮、黃體生成素升高，催乳素降低。同時有大量研究表明[4-5]，人體內激素變化可導致陰道微生態環境改變，激素水平是陰道微生態失調的影響因素之一。然而，PCOS患者的激素水平情況與其陰道微生態健康情況是否存在關系以及存在何種關系，目前尚未有定論，為更好地對PCOS的治療，本研究對患者陰道微生態狀況與其性激素水平變化情況關系進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年11月至2021年8月中山市小欖人民醫院收治的101例PCOS患者作為研究組，選取同期接受婦科檢查的100名健康女性作為對照組。納入標準：①年齡18～40歲；②PCOS患者符合2003年鹿特丹診斷標準[6]PCOS的相關診斷標準并確診（存在月經失調，即月經稀發或者閉經，每年月經周期少于9個；存在高雄激素血癥；超聲檢查顯示卵巢多發性囊性改變。滿足以上兩個或以上則多考慮為PCOS）；③分泌物提取前3個月內無孕激素、雌激素或者糖皮質激素等藥物使用史。排除標準：①3 d內存在性生活、陰道上藥史或者檢測當天陰道出血者；②3月內接受過糖皮質激素或性激素治療者；③存在高泌乳素、腎上腺皮質增生癥、甲狀腺功能減退等內分泌疾病患者。研究組中，年齡18～37歲，平均（29.61±7.14）歲；病程4個月～13年，平均（3.37±2.64）年；體重指數（body mass index，BMI）（24.12±3.37）kg/m2。對照組中，年齡18～39歲，平均（29.49±8.54）歲；BMI（24.35±3.64）kg/m2。兩組患者的一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。所有受試者均簽署知情同意書；本研究符合《赫爾辛基宣言》[7]，經中山市小欖人民醫院醫學倫理委員會批準（倫理批件編號ZSXL-LL2022-002）。

1.2 方法

1.2.1 標本采集PCOS患者陰道分泌物于非經期進行采集，對照組陰道分泌物采集于月經期后3～7 d，使用長棉簽于受試者陰道側壁1/3處陰道分泌物進行采集。研究組在月經來潮1～4 d采集空腹靜脈血，2 ml，用于激素水平檢測。

1.2.2 陰道微生態檢測干棉簽取陰道分泌物，用精密pH試紙進行pH檢測。無菌棉簽拭取適量陰道分泌物浸入生理鹽水中，使用無菌吸管吸取分泌物與生理鹽水混合液置于載玻片上，用超高倍顯微鏡（OLYMPUS BX53）觀察陰道清潔度、菌群等情況。陰道菌群密度、菌群多樣性以及優勢菌情采用革蘭染色法觀察。

1.2.3 性激素水平檢測采用放射免疫法測定受試者血清卵泡刺激素（follicle stimulating hormone，FSH）、黃體生成素（luteinizing hormone，LH）、孕酮（progesterone，P）、雌二醇（estradiol，E2）、催乳素（prolactin，PRL）和睪酮（testosterone，T）水平。

1.3 觀察指標

1.3.1 陰道微生態評價標準

1.3.1.1 菌群檢出情況及清潔度評價標準鏡檢檢出念珠菌、毛滴蟲、線索細胞、革蘭陽性和陰性球菌等，均以“陽性”報告；清潔度根據白細胞、上皮細胞、雜菌、乳酸桿菌的數量結合特殊病原體將其分為Ⅰ～Ⅳ度，清潔度Ⅰ～Ⅱ度為正常，Ⅲ～Ⅳ度為異常[8]。

1.3.1.2 菌群密度、菌群多樣性、白細胞、乳酸桿菌以及pH值情況評價標準①菌群密度，可將其分為4級，每油鏡視野下菌群平均個數在1～9個為Ⅰ級；每油鏡視野下菌群平均個數在10～99個為Ⅱ級；每油鏡視野下菌群平均個數在100個以上則為Ⅲ級；油鏡視野下菌群集成團或者已密集覆蓋黏膜上皮細胞，則為Ⅳ級，Ⅱ～Ⅲ級為正常，Ⅰ、Ⅳ級為異常。②菌群多樣性，根據每油鏡下視野可辨別的細菌種類，分為4級，每油鏡1～3種為Ⅰ級，每油鏡4～6種為Ⅱ級，每油鏡7～9種為Ⅲ級，每油鏡細菌10種以上為Ⅳ級，Ⅱ～Ⅲ級為正常，Ⅰ、Ⅳ級為異常。③白細胞，高倍鏡每個視野中檢出白鞋吧5～15個為“+”，15～30個為“++”，多于30個為“+++”，若滿視野則為“++++”。④乳酸桿菌比例，為鏡下所見乳酸桿菌比例。⑤pH值，正常范圍為3.8～4.5[8]。

1.3.1.3 陰道微生態失衡評定標準在無任何陰道病原體的前體下，同時滿足以下6項條件為陰道微生態平衡[8]。6項條件包括：①pH值在3.8～4.5；②菌群多樣性為Ⅱ～Ⅲ級；③菌群密度為Ⅱ～Ⅲ級；④乳酸桿菌比例≥70%；⑤過氧化氫顯示陽性；⑥白細胞≤++。若有一項不符則為陰道微生態失衡。

1.3.2 陰道微生態Nugent評分標準

陰道微生物涂片，采用革蘭染色，通過油鏡觀察陰道加德納菌、乳酸桿菌、動彎桿菌以及普雷沃菌四種優勢菌的形態，并進行計數，采用半定量評估法進行評分，取四種細菌形態的分值之和，其中0～3分為正常[9]，見表1。

表1 Nugent評分標準（分）

1.4 統計學方法

采用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析；對于符合正態分布的計量資料，用均數±標準差（±s）的形式進行描述，采用獨立樣本t檢驗，對于不符合正態分布的資料，用中位數（下四分位數，上四分位數）[M（P25，P75）]進行描述，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Spearman檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組陰道微生態狀況的比較

兩組的乳酸菌比例、pH值、陰道微生態是否失衡、Nugent評分比較，差異有統計學意義（P＜0.05），其中研究組的乳酸菌比例≥70%、pH 3.8～4.5檢出率、Nugent評分低于對照組，陰道微生態失衡率大于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表2）。

表2 兩組陰道微生態狀況的比較[n（%）]

2.2 不同陰道微生態狀態性激素水平的比較

陰道微生態正常和失調的PCOS患者血清FSH、LH、PRL、T水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；陰道微生態失調的患者血清P、E2水平高于陰道微生態正常患者，差異有統計學意義（P＜0.05）（表4）。

2.3 PCOS患者陰道微生態Nugent評分與性激素的相關性分析

相關性分析結果顯示101例PCOS患者Nugent評分為（6.44±2.18）分，與患者血清FSH、LH、PRL以及T水平無相關性（r=-0.084、0.073、-0.112、0.168，P＞0.05），與患者血清P水平呈負相關（r=-0.325，P＜0.05），與血清E2水平呈正相關（r=0.291，P＜0.05）。

3 討論

PCOS是育齡婦女最常見的內分泌疾病，其具有內分泌、代謝異常的特征，主要表現為多毛、肥胖、閉經以及不孕等癥狀，PCOS的致病機制尚不明確，但常存在下丘腦-垂體功能異常和高雄激素血癥[10-13]。本研究中，PCOS患者血清LH、E2、PRL以及T均呈現相對較高狀態，同時FSH、P水平呈現相對較低狀態。PCOS患者一般存在內分泌失衡，而性激素與PCOS發生密切相關，性激素水平在PCOS患者中處于顯著異常的狀態。FSH與LH均是屬于糖蛋白激素，是垂體前葉促性腺細胞產生和分泌，可作用于卵巢，使卵泡發育加速，其中受促性激素釋放激素以及卵巢中孕激素、雌激素反饋調控[14]。PCOS患者因下丘腦-垂體功能異常，導致促性激素釋放激素釋放頻率增加，LH的釋放頻率和幅度也隨之明顯增加，排卵障礙使卵巢內無優勢卵泡形成，造成雌激素持續性分泌，反饋性刺激LH分泌，從而抑制FSH分泌形成；同時，因無排卵，導致血清P水平降低。

陰道是女性人體與外界相通的腔道，陰道微生態系統主要由真菌、細菌、病毒以及原蟲組成，陰道微生態在正常的狀態下，宿主-菌群-環境動態平衡，相互預存和制約[15]。近年來，陰道微生態的評價已廣泛應用于各種婦科疾病如陰道炎、婦科腫瘤、生殖醫學疾病等的診療指導中。同時有研究表明，對PCOS患者陰道微生態狀態進行動態評估，可作為PCOS治療后的一個重要指標[16-17]。本研究結果顯示，PCOS患者陰道微生態失衡比例顯著高于健康育齡婦女，與研究[18]結果一致，提示PCOS與陰道微生態失衡發生存在一定的關系。其中羅明蘭等[19]認為PCOS患者陰道微生態與性激素兩者變化具有相關性。本研究中陰道微生態失衡患者血清P水平低于陰道微生態正常患者，而E2水平反之，陰道微生態Nugent評分與血清P、E2存在相關性（P＜0.05），提示PCOS患者陰道微生態失衡可能與患者體內P、E2水平有關。E2水平的升高，陰道上皮的糖原水平也隨之身高，導致陰道上皮細胞吸附念珠菌能力增加，而陰道內念珠菌大量生長繁殖，打破乳酸桿菌的優勢狀態，造成陰道微生態失衡[18]。同時有研究表明，陰道上皮增生E2水平升高時其中重要的因素，分泌內糖原，導致陰道PH值改變，造成假絲酵母菌的感染率增加[20]，而P可降低假絲酵母菌生物膜生成能力[21]，因此在P水平降低的情況下，陰道微生態失衡的概率增加。

表3 不同陰道微生態狀態性激素水平的比較（±s）

表3 不同陰道微生態狀態性激素水平的比較（±s）

注FSH：卵泡刺激素；LH：黃體生成素；P：孕酮；E2：雌二醇；PRL：催乳素；T：睪酮

組別FSH（pg/ml）LH（pg）P（nmol/L）E2（pg/ml）PRL（μg/L，M（P25，P75）T（ng/ml）正常（n=13）失衡（n=88）t/Z值P值6.54±1.68 6.21±1.58 0.697 0.487 14.76±4.92 14.26±9.27 0.190 0.850 0.17±0.07 0.29±0.12 3.509＜0.001 54.37±10.41 62.14±13.43 1.996 0.049 12.04（7.96，15.24）18.07（8.75，30.04）1.923 0.054 0.43±0.10 0.48±0.16 1.093 0.277

綜上所述，PCOS患者存在陰道微生態失衡狀態和性激素異常狀況，患者陰道微生態變化與其性激素水平變化相關，PCOS患者性激素的變化可能參與患者陰道微生態失衡的形成。