食品檢測(cè)中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)要點(diǎn)探討

侯世允，陶相錦，范春春，王素香

（1.巨野縣檢驗(yàn)檢測(cè)中心，山東巨野 274900；2.菏澤市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)研究院，山東菏澤 274000）

1 食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)的常見(jiàn)技術(shù)

1.1 生物測(cè)定技術(shù)

該技術(shù)的檢測(cè)原理為利用指示生物對(duì)特定物質(zhì)的生理生化反應(yīng)分析、判斷食物表面殘留農(nóng)藥的物質(zhì)組成成分及各成分的殘留量。例如，可根據(jù)病菌生長(zhǎng)受到的抑制情況判斷磺酰脲類農(nóng)藥的殘留量；可根據(jù)敏感家蠅與檢測(cè)樣品接觸后產(chǎn)生的中毒反應(yīng)狀態(tài)判斷食品樣品中殺蟲(chóng)劑類農(nóng)藥的殘余量。

1.2 理化測(cè)定技術(shù)

該類型測(cè)定技術(shù)主要包含以下常見(jiàn)檢測(cè)方法。①氣相色譜法。該方法以氣體作為流動(dòng)相，根據(jù)固體相與流動(dòng)相物質(zhì)分配系數(shù)存在的差異性，利用特定的色譜柱對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行分離分析，通過(guò)不同成分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)產(chǎn)生的停留時(shí)間和流出色譜柱的先后順序確定食品中農(nóng)藥殘留的具體成分和含量。該方法具有靈敏度高、分離效能好、選擇性強(qiáng)的應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)，是現(xiàn)階段食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)常用的方法之一[1]。②液相色譜法。該方法的檢測(cè)原理與氣相色譜法相似，不同之處在于該方法是以液體作為流動(dòng)相。相較于氣相色譜法，該方法既可有效分離分子量較大、檢測(cè)極性更強(qiáng)的農(nóng)藥，也可分離易受熱分解或不易氣化的農(nóng)藥，因此具有較高的檢測(cè)效率、速度及靈敏度[2]。③色質(zhì)聯(lián)用法。該方法是氣相或液相色譜法與質(zhì)譜法的整合運(yùn)用，不僅具備色譜法的高分離效能特征，還能精準(zhǔn)地檢測(cè)和展示出目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)特征。因此，現(xiàn)階段色質(zhì)聯(lián)用法被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥降解物、代謝物的檢驗(yàn)檢測(cè)工作中。④超臨界流體色譜法。該方法是一種以超臨界流體為流動(dòng)相的色譜檢測(cè)方法。超臨界流體是指物質(zhì)處于溫度和壓力臨界點(diǎn)時(shí)呈現(xiàn)的狀態(tài)，既不屬于液體，也不屬于氣體，其理化性質(zhì)介于液體和氣體之間。在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，該方法不僅具有檢測(cè)靈敏度高、檢測(cè)效率高的顯著優(yōu)勢(shì)，還能有效分離和分析氣相、液相色譜法無(wú)法檢測(cè)的對(duì)象[3]。

1.3 生化測(cè)定技術(shù)

隨著生物化學(xué)科學(xué)技術(shù)水平的不斷提高，生化測(cè)定技術(shù)在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用愈發(fā)普及。目前，食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)常用的生化測(cè)定方法主要有以下兩種。①酶抑制法。該方法主要是利用酶活性易受有機(jī)磷或特定物質(zhì)影響這一原理檢驗(yàn)、測(cè)定食品的農(nóng)藥殘留量。在食品檢測(cè)樣品提取液中加入乙酰膽堿酶，若酶活性未受到影響或抑制，說(shuō)明檢測(cè)樣品中不包含有機(jī)磷類農(nóng)藥，若殘留有有機(jī)磷類農(nóng)藥，則酶活性會(huì)受到抑制，此時(shí)可利用分光光度計(jì)對(duì)吸光度值進(jìn)行測(cè)定并結(jié)合吸光度曲線變化圖計(jì)算酶活性抑制率，從而對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定。該方法的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)在于檢測(cè)速度較快、檢測(cè)結(jié)果較為直觀、對(duì)檢測(cè)樣品無(wú)特殊要求，具有良好的總體適用性；其應(yīng)用劣勢(shì)在于檢測(cè)樣品無(wú)法回收再利用，檢測(cè)精準(zhǔn)性較低[4]。②酶聯(lián)免疫法。該方法的檢測(cè)原理為利用抗體與抗原的特異性結(jié)合反應(yīng)，使抗體與酶復(fù)合物結(jié)合，通過(guò)顯色法進(jìn)行特定物質(zhì)的檢驗(yàn)檢測(cè)。酶聯(lián)免疫法的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)在于檢測(cè)成本低、檢測(cè)速度較快且能同步進(jìn)行多組試驗(yàn)。其應(yīng)用劣勢(shì)在于對(duì)檢測(cè)試劑有較為苛刻的要求，對(duì)組成結(jié)構(gòu)相似的化合物進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，易受交叉反應(yīng)的影響而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。因此，該方法多用于單殘留物質(zhì)的檢驗(yàn)檢測(cè)[5]。

2 食品檢測(cè)中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用要點(diǎn)分析

2.1 樣品制備環(huán)節(jié)技術(shù)要點(diǎn)

食品檢測(cè)樣品制備是食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)的首要環(huán)節(jié)，其制備過(guò)程的科學(xué)性和質(zhì)量對(duì)檢測(cè)結(jié)果具有重要的影響，因此為最大限度保證農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果的精確性，需做好樣品制備環(huán)節(jié)的技術(shù)控制工作，具體技術(shù)要點(diǎn)如下。

（1）溶劑制備技術(shù)要點(diǎn)。對(duì)于食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)而言，溶劑、吸附劑、試劑的使用范圍和純度會(huì)對(duì)色譜柱產(chǎn)生直接性的影響，從而顯著干擾檢測(cè)結(jié)果。因此，在進(jìn)行溶劑制備時(shí)應(yīng)做好以下技術(shù)控制工作。①嚴(yán)格按照相關(guān)技術(shù)規(guī)范的要求對(duì)吸附劑、空白試劑的可用性進(jìn)行檢測(cè)，確保其各項(xiàng)性能滿足檢測(cè)需求。同時(shí)，將溶劑濃縮劑量控制在100～200 mL，將定容劑量控制在1 mL。②在檢測(cè)結(jié)果分析環(huán)節(jié)做好防護(hù)措施，避免發(fā)生溶劑交叉反應(yīng)的情況，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。對(duì)于低濃度溶液，因其穩(wěn)定性較差，易揮發(fā)，所以需先進(jìn)行單個(gè)試驗(yàn)，再結(jié)合多組單個(gè)試驗(yàn)結(jié)果完成多點(diǎn)校正試驗(yàn)，最大限度地保證檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)性。

（2）檢測(cè)樣本制備技術(shù)要點(diǎn)。在進(jìn)行食品檢測(cè)樣品制備時(shí)，應(yīng)做好以下兩個(gè)技術(shù)要點(diǎn)把控工作。①應(yīng)結(jié)合實(shí)際情況科學(xué)選擇最適宜的農(nóng)藥速測(cè)卡。農(nóng)藥速測(cè)卡是現(xiàn)階段一種常見(jiàn)的、方便快捷的食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)工具，其本質(zhì)是由膽堿酯酶和顯色劑制成的酶試紙，對(duì)農(nóng)藥具有較高的檢測(cè)敏感度，能快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出食品中殘留的氨基甲酸酯類、有機(jī)磷類農(nóng)藥。在實(shí)際檢測(cè)中，檢測(cè)人員應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況合理選擇適宜的農(nóng)藥速測(cè)卡，以快速完成上述農(nóng)藥的檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)整體檢測(cè)效率的提升[6]。

2.2 檢測(cè)流程技術(shù)控制要點(diǎn)

對(duì)于檢測(cè)流程需加強(qiáng)以下3個(gè)技術(shù)要點(diǎn)的把控。①樣品流轉(zhuǎn)過(guò)程控制要點(diǎn)。食品樣品采集完畢送往實(shí)驗(yàn)室前需對(duì)樣品進(jìn)行清理，并將清理后的樣品裝入專用的聚乙烯包裝袋中。鑒于不同樣品檢測(cè)方式存在一定的差異性，樣品流轉(zhuǎn)過(guò)程需嚴(yán)格按照現(xiàn)行技術(shù)規(guī)范的要求進(jìn)行各環(huán)節(jié)的操作，以保證各流轉(zhuǎn)環(huán)節(jié)的規(guī)范性，避免因操作不當(dāng)而影響樣品的檢測(cè)有效性，同時(shí)在樣品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室時(shí)，需出示負(fù)責(zé)人簽字認(rèn)可的樣品流轉(zhuǎn)單及檢測(cè)通知單，以確認(rèn)樣品的檢測(cè)有效性。②樣品制備過(guò)程控制要點(diǎn)。根莖類和塊根類樣品制備時(shí)應(yīng)全面剔除其表面輔助物；葉類樣品應(yīng)剔除腐爛部位并利用四分法對(duì)其進(jìn)行預(yù)處理。同時(shí)，樣品制備過(guò)程中應(yīng)按照相關(guān)操作規(guī)范做好樣品的全面保護(hù)工作，以最大限度避免外界環(huán)境或物質(zhì)對(duì)樣品的污染，在樣品使用前，要對(duì)其使用狀態(tài)和檢測(cè)有效性進(jìn)行檢查和確認(rèn)。③樣品保存過(guò)程控制要點(diǎn)。在樣品檢測(cè)前的處置保存環(huán)節(jié)，應(yīng)根據(jù)樣本的性狀、大小選用恰當(dāng)?shù)姆椒▽?duì)其進(jìn)行縮分、混勻處理，以增強(qiáng)樣品的代表性。對(duì)縮分后的樣品進(jìn)行充分的勻漿處理并根據(jù)檢測(cè)需求將勻漿后的樣本平均分成相應(yīng)的份數(shù)。檢測(cè)時(shí)，取出1份樣本置于燒杯中進(jìn)行檢測(cè)，其余樣本置于密閉性良好的玻璃瓶或聚乙烯容器中，做好標(biāo)記并存放于-20 ℃的冰箱中[7]。

2.3 檢測(cè)實(shí)施環(huán)節(jié)技術(shù)要點(diǎn)

檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用規(guī)范性和科學(xué)性對(duì)檢測(cè)結(jié)果具有決定性的影響。因此，在進(jìn)行食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)人員需加強(qiáng)技術(shù)實(shí)施環(huán)節(jié)各項(xiàng)操作要點(diǎn)的技術(shù)控制，以確保檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)性。以氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)為例，其實(shí)施過(guò)程包含以下技術(shù)控制要點(diǎn)。①稱樣環(huán)節(jié)。對(duì)于冷凍樣品，應(yīng)在其完全融化混合均勻后進(jìn)行稱重。同時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況和檢測(cè)要求選擇量程、精度適宜的稱重儀器。②提取凈化環(huán)節(jié)，采用固相萃?。⊿olid-phase Extraction，SPE）法時(shí)，應(yīng)注意勻漿階段轉(zhuǎn)速和時(shí)間的控制。在靜置分層階段，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)加鹽量和振搖力度的把控；在氮吹階段，應(yīng)以柱床微微濕潤(rùn)、有液體但不流動(dòng)為宜；在定容階段，可利用雞心瓶一次性定容，也可利用茄形瓶進(jìn)行多次涮洗定容。③數(shù)值分析計(jì)算環(huán)節(jié)，必須要注重農(nóng)藥代謝物的折算。例如，在進(jìn)行甲拌磷分析檢測(cè)時(shí)，同時(shí)要進(jìn)行甲拌磷砜、甲拌磷亞砜等農(nóng)藥代謝物的檢測(cè)；在進(jìn)行克百威分析檢測(cè)時(shí)，同時(shí)要進(jìn)行3-羥基克百威等代謝物的檢測(cè)，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行系數(shù)折算，從而最大限度保證檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)性。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，農(nóng)藥殘留檢測(cè)是果蔬類食品檢測(cè)的重要內(nèi)容，其檢測(cè)結(jié)果的全面性和準(zhǔn)確性直接影響人們對(duì)果蔬類食品安全性的評(píng)價(jià)。為確保果蔬類食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)的準(zhǔn)確性，不僅需要相關(guān)檢測(cè)機(jī)構(gòu)或技術(shù)人員全面了解現(xiàn)階段常用的食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)及各自的適用條件和應(yīng)用優(yōu)缺點(diǎn)，從而根據(jù)實(shí)際檢測(cè)需求科學(xué)選擇適宜的檢測(cè)方法，還需要其能明確樣品制備環(huán)節(jié)、檢測(cè)流程、檢測(cè)實(shí)施環(huán)節(jié)等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的技術(shù)控制要點(diǎn)，以最大限度確保整個(gè)檢測(cè)過(guò)程的科學(xué)性和規(guī)范性，從而最大限度保障檢測(cè)結(jié)果的精準(zhǔn)度，對(duì)果蔬類食品的安全性作出最準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)。