鹽酸美西律滴鼻劑的制備及質(zhì)量控制

金偉華，鄧凱文△，蒲志強(qiáng)，廖 艷

（1.中國(guó)人民解放軍西部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院，四川 成都 610083；2.西南醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，四川 瀘州 646000）

鹽酸美西律屬鈉通道阻滯藥中的Ⅰb類抗心律失常藥，化學(xué)名為1-（2，6-二甲基苯氧基）-丙胺鹽酸鹽，具有抑制鈉離子內(nèi)流和促進(jìn)鉀離子外流的電生理效應(yīng)，能抑制0相，減慢傳導(dǎo)，縮短浦氏纖維的有效不應(yīng)期等作用，臨床主要用于治療室性早搏和室性心動(dòng)過(guò)速[1］。目前，鹽酸美西律已有片劑、栓劑、乳膏劑等劑型，但其最常見(jiàn)的不良反應(yīng)為胃腸道反應(yīng)。滴鼻劑有利于減少不良反應(yīng)，提高生物利用度，擴(kuò)大臨床應(yīng)用范圍。為此，本研究中建立了測(cè)定鹽酸美西律滴鼻劑中鹽酸美西律含量的高效液相色譜（HPLC）法，并對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

1200型高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫公司）；PHS-3C型精密pH計(jì)（上海康儀儀器有限公司）；AL204型電子天平（d=0.000 1），AB135-5型電子天平（d=0.000 01），均購(gòu)于梅特勒-托利多儀器上海有限公司。

1.2 試藥

鹽酸美西律對(duì)照品及原料藥（Solarbio LIFE SCIENCES，批號(hào)20151211，含量≥98%）；羥苯乙酯（批號(hào)20150406），冰醋酸（批號(hào)20151108），均購(gòu)自臺(tái)山市新寧制藥有限公司）；氯化鈉（批號(hào)2018012601，含量≥99.5%），甲醇（批號(hào)2016041101，含量≥99.5%），無(wú)水乙醇（批號(hào)2016042801，含量≥99.7%），乙酸鈉（批號(hào)20170604，含量≥99.0%），均購(gòu)自成都市科龍化工試劑廠。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方工藝與制備

處方工藝：鹽酸美西律2.5 g，氯化鈉6 g，5%羥苯乙酯溶液5 mL，加純化水至1 000 mL。

制備方法：按處方工藝量取鹽酸美西律、氯化鈉，加適量水，攪拌溶解，再加入5%羥苯乙酯溶液，用純化水稀釋至1 000 mL，即得鹽酸美西律滴鼻劑樣品。

2.2 質(zhì)量控制

性狀：通過(guò)視覺(jué)觀察到，樣品為無(wú)色透明澄清液體。

pH檢查[2-3］：采用pH計(jì)考察制劑的pH，鹽酸美西律滴鼻劑的pH應(yīng)與鼻腔內(nèi)分泌液pH相近。取2批樣品（批號(hào)分別為20210417，20210419），連續(xù)2 d進(jìn)行pH考察，結(jié)果的RSD為0.76%（n=6），詳見(jiàn)表1。可見(jiàn)，鹽酸美西律易溶于水，水溶液呈弱酸性，pH不用調(diào)節(jié)就可在合格范圍（pH為5.5～7.5）內(nèi)。鹽酸美西律滴鼻劑pH為5.5～6.5，其他均符合滴鼻劑項(xiàng)下各項(xiàng)規(guī)定。

表1 鹽酸美西律滴鼻劑pH值考察結(jié)果（n=6）Tab.1 Investigation of pH of Mexiletine Hydrochloride Nasal Drops（n=6）

2.3 含量測(cè)定

2.3.1 色譜條件[4-9］與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Eclipse XDB-C18柱（150 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：0.1 mol/L醋酸鈉溶液[冰醋酸調(diào)pH至（5.8±0.1）］-甲醇（49∶51，V/V）；柱溫：30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：262 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10μL。在此色譜條件下的色譜圖見(jiàn)圖1，表明陰性對(duì)照無(wú)干擾，理論板數(shù)按鹽酸美西律峰計(jì)不低于3 000。

圖1 高效液相色譜圖1.Mexiletine hydrochloride A.Reference solution B.Test solution C.Negative reference solutionFig.1 HPLC chromatograms

2.3.2 溶液制備[10］

精密稱取鹽酸美西律對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并制成質(zhì)量濃度為1.251 mg/mL的，對(duì)照品貯備液。取樣品5 mL，置10 mL容量瓶中，加流動(dòng)相定容，搖勻，即得供試品溶液。取不含鹽酸美西律的空白溶液5 mL，置10 mL容量瓶中，加流動(dòng)相定容，按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照品溶液。

2.3.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察與檢測(cè)限、定量限確定：精密量取對(duì)照品貯備液（質(zhì)量濃度為1.251 mg/mL）2，4，6，8，10 mL，置10 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋成質(zhì)量濃度分別為0.250 2，0.500 4，0.750 6，1.000 8，1.251 0 mg/mL的系列對(duì)照品溶液，按2.3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以進(jìn)樣質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=638.65X-3.81（r=0.999 9，n=5）。結(jié)果表明，鹽酸美西律質(zhì)量濃度在0.250 2～1.251 0 mg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。以3倍信噪比（S/N）的質(zhì)量濃度為檢測(cè)限，以10倍S/N的質(zhì)量濃度為定量限，基線噪聲為0.011 62 mAU，得檢測(cè)限、定量限分別為0.000 645 mg/mL和0.002 15 mg/mL。

精密度試驗(yàn)：精密吸取對(duì)照品溶液10μL，按2.3.1項(xiàng)下色譜條件重復(fù)測(cè)定6次，記錄峰面積，結(jié)果的RSD為0.66%（n=6）。另配制對(duì)照品溶液（質(zhì)量濃度為0.775 mg/mL），連續(xù)3 d按2.3.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定6次，記錄峰面積。結(jié)果的RSD為1.22%（n=6），表明日內(nèi)和日間精密度均良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：精密量取樣品（批號(hào)20210419）適量，按2.3.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別于0，2，4，6，8，24 h時(shí)按2.3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果的RSD為0.72%（n=6），表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：精密量取樣品（批號(hào)20210419）適量，共6份，按2.3.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按2.3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積。結(jié)果的RSD為1.82%（n=6），表明方法重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：取已知含量的樣品9份，按2.3.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按鹽酸美西律低、中、高質(zhì)量濃度精密加入對(duì)照品溶液，各3份，按2.3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，并計(jì)算加樣回收率。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n=9）Tab.2 Results of the recovery test（n=9）

2.3.4 樣品含量測(cè)定

取3批（批號(hào)分別為20210415，20210416，20210417）樣品，依法制備供試品溶液，按2.3.1項(xiàng)下色譜條件平行測(cè)定3次，記錄峰面積，以外標(biāo)法計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 樣品含量測(cè)定結(jié)果（n=9）Tab.3 Results of the content determination of mexiletine hydrochloride in the samples（n=9）

2.4 防腐劑考察[11］

處方中采用5%羥苯乙酯醇溶液作為防腐劑，對(duì)制劑中防腐劑在室溫下的影響進(jìn)行考察，以制劑中羥苯乙酯的峰面積及外觀澄清度作為考察指標(biāo)。結(jié)果7 d內(nèi)，鹽酸美西律滴鼻劑澄清透明且無(wú)沉淀，制劑中羥苯乙酯峰面積的RSD為0.36%（n=6）。可見(jiàn)，防腐劑對(duì)鹽酸美西律制劑無(wú)影響，且本身穩(wěn)定性較強(qiáng)。

3 討論

3.1 防腐劑選擇

本研究中采用5%羥苯乙酯醇溶液作為防腐劑。羥苯乙酯又叫4-羥基苯甲酸乙酯，屬尼泊金類，通過(guò)破壞微生物的細(xì)胞膜使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)變性而抑制菌落的生長(zhǎng)[12］。該防腐劑化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，能耐100℃2 h滅菌，其pH適用值在3～8范圍內(nèi)，在酸性溶液中作用較強(qiáng)，一般用量不得超過(guò)0.05%，由于其溶解度較差，故選用5%羥苯乙酯醇溶液，避免損害儀器。

3.2 pH范圍確定

鼻用制劑需對(duì)鼻黏膜無(wú)刺激性和對(duì)鼻纖毛運(yùn)動(dòng)不產(chǎn)生影響，水性介質(zhì)的鼻用制劑可通過(guò)調(diào)節(jié)pH和滲透壓、減小刺激性[13］。因此，pH是鼻用制劑質(zhì)量控制的重點(diǎn)考察內(nèi)容。正常人鼻腔分泌液的pH一般為5.5～6.5，當(dāng)鼻腔內(nèi)發(fā)生病變時(shí)，鼻腔環(huán)境pH升高甚至呈堿性，細(xì)菌更易增殖繁衍，進(jìn)而影響鼻腔內(nèi)纖毛的正常運(yùn)動(dòng)和分泌物的溶菌作用。因此，鹽酸美西律滴鼻劑的pH應(yīng)與鼻腔內(nèi)分泌物的pH相近。鹽酸美西律易溶于水，其水溶液本身呈弱酸性，故其pH不用調(diào)節(jié)就在合格范圍內(nèi)。

3.3 含量測(cè)定方法選擇

HPLC法分離效能高，能有效避免其他雜質(zhì)對(duì)含量測(cè)定結(jié)果的干擾；選擇性好，專屬性高；檢測(cè)靈敏度高，對(duì)質(zhì)量濃度在0.001 mg/mL以下的溶液也能進(jìn)行含量測(cè)定，紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01 ng；應(yīng)用范圍廣。同時(shí)，考慮鹽酸美西律的治療窗較窄[14］，有效劑量與最小中毒劑量很近等，故對(duì)鹽酸美西律制劑的質(zhì)量進(jìn)行控制時(shí)需選用準(zhǔn)確、靈敏、專屬性強(qiáng)的方法[15］，故采用HPLC法進(jìn)行含量測(cè)定。