術(shù)前血清磷酸甘油酸激酶1、髓樣相關(guān)蛋白8/14水平與前列腺癌根治術(shù)患者預(yù)后和生存情況相關(guān)性研究

代 佳，韓衛(wèi)軍，賀 林，慕玉東，高紅變

(1.陜西省腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科,陜西 西安 710061;2.寶雞市中醫(yī)醫(yī)院外三科,陜西 寶雞 721001;3.陜西省腫瘤醫(yī)院病理科,陜西 西安 710061)

據(jù)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，前列腺癌已經(jīng)成為我國(guó)發(fā)病率位居第6位的男性惡性腫瘤，且近年來(lái)隨著人們生活方式的改變、老齡化進(jìn)程的加劇以及前列腺癌篩查技術(shù)的提升和普及，造成我國(guó)男性前列腺癌發(fā)病率和病死率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。早期前列腺癌局限于前列腺內(nèi)時(shí)多可通過(guò)手術(shù)切除，預(yù)后通常較好，但仍有部分患者發(fā)生復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移甚至死亡，因此繼續(xù)尋找能夠預(yù)測(cè)前列腺癌患者預(yù)后和生存情況的指標(biāo)，并據(jù)此制定和完善治療策略對(duì)于提高該類患者的臨床療效，延長(zhǎng)生存時(shí)間顯得尤為重要。磷酸甘油酸激酶1(Phosphoglycerate kinase 1,PGK-1)是糖酵解過(guò)程的關(guān)鍵酶之一，對(duì)DNA復(fù)制和損傷修復(fù)有重要的影響，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在乳腺癌[3]、結(jié)腸癌[4]等惡性腫瘤組織中PGK-1呈異常高表達(dá)。髓樣相關(guān)蛋白8/14(Myeloid-related protein 8/14,MRP8/14)被證實(shí)參與了細(xì)胞遷移、增殖、凋亡等重要的生物過(guò)程，并在多種腫瘤組織中出現(xiàn)高表達(dá)[5]。但目前鮮有關(guān)于血清PGK-1與MRP8/14水平與前列腺癌根治術(shù)患者預(yù)后和生存情況的相關(guān)性報(bào)道，本研究以80例前列腺癌根治術(shù)患者作為研究對(duì)象對(duì)此進(jìn)行了深入探討，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2018年7月至2020年6月期間收治的80例前列腺癌根治術(shù)患者以及同期健康體檢的100例健康者作為研究對(duì)象。前列腺癌組，年齡53～77歲，平均(65.92±5.48)歲；TNM臨床分期：Ⅰ期16例、Ⅱ期39例、Ⅲ期18例、Ⅳ期7例；格里森(Gleason)指數(shù)：2～4分22例，5～7分51例，8～10分7例。健康組，年齡52～79歲，平均(67.36±6.83)歲。兩組平均年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①前列腺癌患者均經(jīng)組織病理學(xué)檢查確診；②符合前列腺癌根治術(shù)指證[6]；③各項(xiàng)臨床資料和隨訪數(shù)據(jù)完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤者；②近期服用激素類或者影響內(nèi)分泌的藥物者；③合并內(nèi)分泌疾病、自身免疫性疾病者；④合并肝、腎等重要器官嚴(yán)重功能障礙及凝血功能障礙者；⑤中途退出或失訪者；⑥因前列腺癌以外原因死亡者。

1.2 研究方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：在前列腺癌患者術(shù)前和術(shù)后1個(gè)月時(shí)及健康者體檢時(shí)采集晨起空腹靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min，分離血清，置于-80 ℃冰箱保存待測(cè)。采用上海梵態(tài)生物科技有限公司提供的酶聯(lián)免疫法檢測(cè)試劑盒測(cè)定血清中PGK-1和MRP8/14水平，檢測(cè)設(shè)備為深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司RT-6500型全自動(dòng)酶標(biāo)儀。分別根據(jù)患者血清PGK-1和MRP8/14水平中位值分為高水平組和低水平組。將PGK-1≥12.76 ng/ml納入PGK-1高水平組，<12.76 ng/ml納入PGK-1低水平組；將MRP8/14≥2790 ng/ml納入MRP8/14高水平組，<2790 ng/ml納入MRP8/14低水平組。所有樣本均重復(fù)檢測(cè)3次，以該樣本平均值作為指標(biāo)水平。均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)和設(shè)備操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 隨訪：從患者出院之日起每1個(gè)月通過(guò)電話、微信等方式隨訪1次，隨訪時(shí)間截至2022年6月。記錄所有患者術(shù)后復(fù)發(fā)、總生存期(Overall survive，OS)和無(wú)進(jìn)展生存期(Progress-free survive，PFS)。復(fù)發(fā)定義為患者術(shù)后血清前列腺素在降至最低水平后連續(xù)出現(xiàn)兩次>0.2 ng/ml。OS指從確診為前列腺癌到因腫瘤引起患者死亡或者隨訪結(jié)束；PFS指從患者接受治療到前列腺癌進(jìn)展或者死亡的時(shí)間。

2 結(jié) 果

2.1 前列腺癌組與健康組血清PGK-1和MRP8/14水平比較 前列腺癌組血清PGK-1和MRP8/14水平均顯著高于健康組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 前列腺癌組與健康組血清PGK-1和MRP8/14水平比較(ng/ml)

2.2 前列腺癌組手術(shù)前后血清PGK-1和MRP8/14水平比較 前列腺癌患者術(shù)后1個(gè)月時(shí)血清PGK-1和MRP8/14水平均顯著低于術(shù)前(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 前列腺癌組手術(shù)前后血清PGK-1和MRP8/14水平比較(ng/ml)

2.3 術(shù)后復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者血清PGK-1和MRP8/14水平比較 術(shù)后隨訪中有48例患者復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)患者術(shù)前血清PGK-1和MRP8/14水平均顯著高于未復(fù)發(fā)患者(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 術(shù)后復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者術(shù)前血清PGK-1和MRP8/14水平比較(ng/ml)

2.4 前列腺癌組術(shù)前血清PGK-1和MRP8/14水平與生存狀態(tài)的關(guān)系 Log-Rank檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，血清PGK-1和MRP8/14低水平前列腺癌根治術(shù)患者PFS顯著長(zhǎng)于高水平患者(χ2=34.760、27.503，P<0.01)，見(jiàn)表4(圖1)。血清PGK-1和MRP8/14低水平前列腺癌根治術(shù)患者OS也顯著長(zhǎng)于高水平患者(χ2=10.201、16.651，P<0.01)，見(jiàn)表5(圖2)。

表4 術(shù)前血清PGK-1和MRP8/14水平與前列腺癌根治術(shù)患者PFS的關(guān)系

表5 術(shù)前血清PGK-1和MRP8/14水平與前列腺癌根治術(shù)患者OS的關(guān)系

圖1 不同血清PGK-1和MRP8/14水平前列腺癌根治術(shù)患者PFS生存曲線

圖2 不同血清PGK-1和MRP8/14水平前列腺癌根治術(shù)患者OS生存曲線

3 討 論

前列腺癌已經(jīng)成為影響我國(guó)男性居民生命健康的主要惡性腫瘤之一，其發(fā)病率較高，這與我國(guó)居民健康體檢意識(shí)較弱、前列腺癌臨床癥狀不特異等有關(guān)，也與近年來(lái)前列腺癌篩查技術(shù)進(jìn)步有關(guān)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)通過(guò)測(cè)定男性血清前列腺特異性抗原同源異構(gòu)體(p2PSA)、前列腺素特異性抗原(PSA)和游離PSA(fPSA)計(jì)算前列腺健康指數(shù)，能夠快速準(zhǔn)確篩選出前列腺癌高風(fēng)險(xiǎn)者，減少穿刺活檢數(shù)量[6-7]。然而對(duì)于前列腺癌預(yù)后和生存期的預(yù)測(cè)評(píng)估仍多依賴于影像學(xué)檢查、PSA檢測(cè)等，但影像學(xué)檢查價(jià)格較高且對(duì)人體有潛在輻射傷害，PSA檢測(cè)對(duì)于肥胖患者準(zhǔn)確性較差。因此十分有必要繼續(xù)尋找并研究能夠用于前列腺癌預(yù)后評(píng)估的無(wú)創(chuàng)指標(biāo)。

PGK1能夠催化1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)脫去1個(gè)磷酸基團(tuán)變?yōu)?-磷酸甘油酸(3-DPG)，并能夠影響DNA復(fù)制和損傷修復(fù)，現(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)PGK-1與多種腫瘤的發(fā)生、細(xì)胞增殖和侵襲、轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系[8-9]。Fiorillo等[10]發(fā)現(xiàn)，人卵巢癌細(xì)胞中存在PGK-1異常高表達(dá)，且PGK-1表達(dá)水平與紫杉醇耐藥性有明顯正相關(guān)關(guān)系。Jin等[11]研究發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移患者腫瘤組織中PGK-1表達(dá)水平明顯高于未轉(zhuǎn)移患者。Fu等[12]在乳腺癌中的研究發(fā)現(xiàn)沉默PGK-1基因后，缺氧誘導(dǎo)因子1α(Hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α)表達(dá)降低，乳腺癌細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程被逆轉(zhuǎn)，腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和侵襲受到明顯抑制。腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖對(duì)氧消耗巨大，其代謝與正常細(xì)胞差異顯著，主要依靠糖酵解途徑供給能量，這是由于腫瘤細(xì)胞為適應(yīng)過(guò)快增殖造成的低氧和低糖微環(huán)境有關(guān)[13]。PGK-1作為糖酵解途徑中的關(guān)鍵酶，其高表達(dá)能夠提高腫瘤細(xì)胞糖代謝水平和供能，增強(qiáng)腫瘤的無(wú)氧適應(yīng)能力。郭然等[14]研究發(fā)現(xiàn)乳腺浸潤(rùn)癌組織中PGK-1高表達(dá)與患者遠(yuǎn)期生存率降低有顯著相關(guān)性。潘恩山等[15]采用Kaplan-Meier生存曲線分發(fā)現(xiàn)前列腺癌腫瘤組織中PGK-1高表達(dá)水平與患者不良預(yù)后密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，前列腺癌患者術(shù)前血清PGK-1水平顯著高于健康組，術(shù)后1個(gè)月時(shí)血清PGK-1水平顯著降低。復(fù)發(fā)患者術(shù)前血清PGK-1水平均顯著高于未復(fù)發(fā)患者，Log-Rank檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，術(shù)前血清PGK-1低水平前列腺癌根治術(shù)患者PFS和OS顯著長(zhǎng)于高水平患者，都表明前列腺癌患者血清PGK-1水平增加，且術(shù)前血清高水平PGK-1患者預(yù)后通常不佳，這與潘恩山等的組織學(xué)研究結(jié)果一致。

MRP8/14是一種低分子酸性蛋白質(zhì)復(fù)合物，在脂多糖等刺激下能夠產(chǎn)生炎癥活性，且后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)MRP8/14在細(xì)胞遷移、增殖、凋亡、蛋白質(zhì)磷酸化等過(guò)程中具有重要的調(diào)控作用[16-17]。近年來(lái)MRP8/14與腫瘤的相關(guān)研究逐漸增加，有學(xué)者報(bào)道稱MRP8/14在直腸癌組織中高表達(dá)，尤其是在生長(zhǎng)旺盛的腫瘤組織部位，提示MRP8/14與直腸癌細(xì)胞侵襲相關(guān)[18]。已有少量關(guān)于MRP8/14與前列腺癌的相關(guān)報(bào)道，Minner等[19]發(fā)現(xiàn)前列腺癌患者血清MRP8/14水平顯著高于正常男性，且腫瘤分期越高的患者其血清MRP8/14水平越高。李孌等[20]研究也發(fā)現(xiàn)前列腺癌患者血清MRP8/14水平高于正常人和良性前列腺增生患者，進(jìn)一步采用受試者工作特征(ROC)曲線分析結(jié)果表明血清MRP8/14水平診斷前列腺癌的曲線下面積(AUC)為0.887(95%CI：0.841～0.934)，Cox回歸分析結(jié)果表明MRP8/14是前列腺癌患者隨訪期間死亡的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，高水平MRP8/14隨訪期間死亡風(fēng)險(xiǎn)顯著高于低水平患者。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，前列腺癌患者術(shù)前血清MRP8/14水平顯著高于健康組，術(shù)后1個(gè)月時(shí)血清MRP8/14顯著降低。復(fù)發(fā)患者術(shù)前血清MRP8/14水平均顯著高于未復(fù)發(fā)患者，Log-Rank檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，術(shù)前血清MRP8/14低水平前列腺癌根治術(shù)患者PFS和OS顯著長(zhǎng)于高水平患者(P<0.05)，與李孌等報(bào)道結(jié)果一致。

綜上，術(shù)前血清PGK-1和MRP8/14檢測(cè)簡(jiǎn)單，屬于無(wú)創(chuàng)檢測(cè)，有潛力作為評(píng)估前列腺癌根治術(shù)患者預(yù)后和生存期的重要指標(biāo)，高水平患者通常手術(shù)治療預(yù)后較差。但本研究納入樣本量較少，還需要擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步確認(rèn)兩個(gè)指標(biāo)的預(yù)后評(píng)估價(jià)值。