尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果的吻合性及其影響因素

李伊莎

（大連市友誼醫(yī)院檢驗科，遼寧 大連 116000）

尿紅細(xì)胞檢測是尿液分析中一項重要的檢測項目，可為肝膽、代謝性、泌尿生殖系統(tǒng)等疾病的鑒別診斷提供參考，目前臨床多采用尿沉渣檢測，可進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)定量分析且成本較低[1]。尿干化學(xué)法因具有操作便捷、檢測速度快、檢測樣本用量少的優(yōu)點，已廣泛應(yīng)用于臨床[2]。目前，關(guān)于上述兩種方法檢測尿紅細(xì)胞結(jié)果吻合性的研究較少，而明確兩種方法檢測尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合的影響因素，對提高臨床診斷準(zhǔn)確度具有重要意義。基于此，本研究旨在探討尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果的吻合性及其影響因素，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2019年9月至2020年9月于本院進(jìn)行尿檢的100例患者的尿液樣本作為研究對象，其中男53例，女47例；年齡26～72歲，平均年齡（51.64±3.09）歲；體質(zhì)量48～74 kg，平均體質(zhì)量（58.08±1.68）kg。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者均對本研究知情且簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：無精神疾病，具備正常認(rèn)知功能與溝通能力；采集尿液樣本均為晨尿。排除標(biāo)準(zhǔn)：尿液樣本遺失；尿液樣本混淆。

1.2 方法

1.2.1 尿干化學(xué)法取尿液放置于潔凈的刻度離心管中，使用尿干化學(xué)分析儀（長春迪瑞醫(yī)療設(shè)備有限公司，型號：H-500）對100例尿液樣本進(jìn)行檢測，每次開機(jī)檢測前采用日本希森美康公司生產(chǎn)的尿液質(zhì)控品進(jìn)行監(jiān)控，并嚴(yán)格按照操作說明書操作，質(zhì)控品搖勻后放置30 s測定，避免時間過久沉淀物分布均勻?qū)е聹y量結(jié)果出現(xiàn)誤差，當(dāng)質(zhì)控結(jié)果在允許范圍內(nèi)方可進(jìn)行實驗操作。尿紅細(xì)胞檢測正常值參考范圍：0～10個/μl，高于正常值參考范圍則可判定為尿紅細(xì)胞陽性。

1.2.2 尿沉渣法取尿液放置于潔凈的刻度離心管中，使用全自動尿沉渣分析儀（日本希森美康醫(yī)用電子公司，型號：Sysmex UF-100）對100例尿液樣本進(jìn)行檢測，每次開機(jī)檢測前采用尿液質(zhì)控品進(jìn)行監(jiān)控，并嚴(yán)格按照操作說明書操作，質(zhì)控品搖勻后放置30 s測定，避免時間過久沉淀物分布均勻?qū)е聹y量結(jié)果出現(xiàn)誤差，當(dāng)質(zhì)控結(jié)果在允許范圍內(nèi)方可進(jìn)行實驗操作。尿紅細(xì)胞檢測正常值參考范圍：男性：0～12個/μl，女性：0～23.8個/μl，高于上述范圍則判定為尿紅細(xì)胞陽性。

1.2.3 尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果的吻合性判定標(biāo)準(zhǔn)同一例尿液標(biāo)本采用尿干化學(xué)法與尿沉渣法檢測結(jié)果均為尿紅細(xì)胞陽性或均為尿紅細(xì)胞陰性，則可判定為檢測結(jié)果吻合，否則為不吻合。

1.2.4 樣本資料統(tǒng)計統(tǒng)計患者及其樣本相關(guān)資料，包括性別、年齡、體質(zhì)量、樣本存放時間、尿路感染[是（尿液分析檢查結(jié)果顯示顯微鏡下白細(xì)胞高于5個/高倍視野即為尿路感染）、否]、大量維生素C尿[是（尿液檢查中維生素C呈陽性）、否]、樣本采集[不規(guī)范（包括采尿前進(jìn)食或服用影響檢測結(jié)果的藥物，尿液采集后未能保持干燥、清潔造成尿液污染等）、規(guī)范]。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 24.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗；計量資料以“±s”表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果吻合性的影響因素，采用多項Logistic回歸分析檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞的檢測結(jié)果100例樣本尿干化學(xué)法與尿沉渣檢測結(jié)果顯示，有83例樣本檢測結(jié)果吻合，占比83.00%；有17例樣本檢測結(jié)果不吻合，占比17.00%，見表1。

表1 尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞的檢測結(jié)果

2.2 尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合影響因素分析檢測結(jié)果不吻合與檢測結(jié)果吻合患者的年齡、性別、體質(zhì)量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，尿路感染、樣本存放時間過長、樣本采集不規(guī)范、大量維生素C尿比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合影響因素的單因素分析

2.3 尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合影響因素的多項Logistic回歸分析將單因素分析差異有統(tǒng)計學(xué)意義的影響因素作為自變量并進(jìn)行賦值，見表3；將尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果吻合性作為因變量，檢測結(jié)果不吻合賦值為“1”，檢測結(jié)果吻合賦值為“0”，經(jīng)多項Logistic回歸分析結(jié)果顯示，尿路感染、樣本存放時間過長、樣本采集不規(guī)范、大量維生素C尿是尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合的影響因素（OR＞1，P＜0.05），見表4。

表3 自變量賦值

表4 尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合影響因素的多項Logistic回歸分析

3 討論

尿干化學(xué)法與尿沉渣法在尿紅細(xì)胞檢測中均有廣泛應(yīng)用，但檢測結(jié)果可能受多種因素的影響，致使檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，因此，明確上述兩種方法檢測尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合的影響因素，有利于提升早期疾病診斷的準(zhǔn)確度。

本研究結(jié)果顯示，100例樣本尿干化學(xué)法與尿沉渣檢測后有83例檢測結(jié)果吻合，有17例檢測結(jié)果不吻合；經(jīng)單因素分析與多項Logistic回歸分析結(jié)果顯示，尿路感染、樣本存放時間過長、樣本采集不規(guī)范、大量維生素C尿是尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合的影響因素。分析原因為，尿液樣本存放時間過長可導(dǎo)致樣本中細(xì)菌大量繁殖而發(fā)生污染，進(jìn)而分解尿素，釋放氨，導(dǎo)致尿液標(biāo)本的pH值升高，且存放時間過長，尿液中細(xì)胞發(fā)生溶解，尿蛋白出現(xiàn)分解，引發(fā)蛋白質(zhì)變性等問題，從而影響尿檢結(jié)果的準(zhǔn)確性；同時，尿液樣本中紅細(xì)胞和白細(xì)胞在采集后室溫1 h內(nèi)變化不明顯，溶解率與即刻檢查無明顯差異，而尿液樣本放置時間＞1 h后，白細(xì)胞和紅細(xì)胞形態(tài)會發(fā)生明顯變化，且存放時間越長，變化越大，導(dǎo)致尿紅細(xì)胞檢測結(jié)果不準(zhǔn)確[3-4]。因此，針對尿液樣本存放時間問題，臨床需在采集尿液樣本后注意時效性，采集患者中段晨尿，夏季應(yīng)在樣本采集完成后1 h內(nèi)進(jìn)行檢測，冬季應(yīng)在樣本采集完成后2 h內(nèi)進(jìn)行檢測，以確保血細(xì)胞、病理細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型細(xì)胞的結(jié)構(gòu)及形態(tài)完整性，對于2 h內(nèi)無法完成檢測的樣本，需將其放置于2～8℃環(huán)境中冷藏，且在冷藏后6 h內(nèi)完成相關(guān)檢測，否則需將樣本作廢，進(jìn)行樣本重新采集。樣本采集不規(guī)范是導(dǎo)致尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合的影響因素之一，主要原因在于，晨尿具有較高濃縮度，檢測晨尿?qū)颊吣I臟功能評價具有更高價值，但由于醫(yī)護(hù)人員叮囑不到位、患者誤解晨尿概念等，易出現(xiàn)采尿前不合理飲食、用藥等情況，而部分藥物如喹啉類藥物、季銨鹽類藥物等，可使強(qiáng)堿尿中的蛋白質(zhì)檢測結(jié)果呈假陽性或假陰性，影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性。針對上述問題，臨床應(yīng)在采集標(biāo)本的準(zhǔn)備過程中加強(qiáng)對患者的宣傳教育工作，向患者耐心解釋樣本采集前飲食、用藥相關(guān)注意事項，女性應(yīng)避開月經(jīng)期，采集時確保尿杯干燥、清潔，指導(dǎo)患者控制飲水和進(jìn)食的時間，并叮囑患者暫時停止服用非必須的藥物，禁飲濃茶、糖水、咖啡等飲品。尿路感染也可導(dǎo)致尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果不吻合，分析原因在于，尿沉渣法是一種利用流式細(xì)胞技術(shù)和電阻抗原理的檢測方法，染色液中具有選擇性的染料（主要為菲啶染料和羧花青染料），能夠使細(xì)胞核、細(xì)胞膜分別染上兩種不同顏色，從而將尿液中有形成分染色。通過觀察細(xì)胞熒光強(qiáng)度、細(xì)胞電阻抗大小、前向散射光強(qiáng)度等情況，對細(xì)胞形態(tài)、橫截面積、染色片段長度等進(jìn)行綜合分析，繪制散射圖，得出計數(shù)結(jié)果，由于紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，故儀器根據(jù)熒光強(qiáng)度低、前向散光強(qiáng)度低判斷紅細(xì)胞。當(dāng)患者發(fā)生尿路感染時，尿液中可存在大量細(xì)菌，而細(xì)菌有核但菲啶染料對膜滲透性較低，染色后前向散射光強(qiáng)度及熒光強(qiáng)度也較低。因此，當(dāng)尿液樣本中細(xì)菌超過一定濃度時，儀器可將葡萄球菌、鏈球菌等細(xì)菌誤認(rèn)為尿紅細(xì)胞，從而對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響[5-6]。因此，針對實驗中發(fā)現(xiàn)菌尿的樣本，臨床應(yīng)輔以顯微鏡監(jiān)察法或其他方法對樣本加以分析和鑒別，以避免不必要的誤診[7-8]。維生素C作為還原劑可參與機(jī)體內(nèi)氧化還原過程，尿液中維生素C的濃度增高可導(dǎo)致尿液比重增高，尿液pH值降低，由于維生素C具有還原性，而各型尿液分析儀多通過氧化還原反應(yīng)及pH改變等原理檢測尿紅細(xì)胞，尿液中高濃度的維生素C可作為強(qiáng)還原劑，抑制尿液成分檢測中的氧化還原反應(yīng)，造成假陰性的檢測結(jié)果[9-10]。因此，臨床在分析尿檢結(jié)果時須注意樣本中是否存在一定濃度的維生素C，當(dāng)尿液中存在高濃度的維生素C時，需注意排除由維生素C干擾作用造成的尿潛血等假陰性結(jié)果，必要時在患者停止服用維生素C 3 d后再進(jìn)行檢查[11-12]。

綜上所述，尿干化學(xué)法與尿沉渣測定尿紅細(xì)胞結(jié)果的吻合性相對較高，但尿路感染、樣本存放時間過長、樣本采集不規(guī)范、大量維生素C尿會導(dǎo)致兩種方法檢測結(jié)果不吻合，臨床可據(jù)此采取相關(guān)質(zhì)控措施，以提高檢測準(zhǔn)確度。