783例新生兒感染病原菌分布及耐藥分析

高 陽,吉彤珍,楊冬梅,劉 然

(首都醫科大學附屬北京婦產醫院/北京婦幼保健院 檢驗科，北京100026)

新生兒感染是新生兒常見疾病，也是引起新生兒死亡的主要原因，由于新生兒免疫功能尚不健全以及侵入性操作較多，所以新生兒重癥監護室(NICU)是醫院感染防控的重點，導管相關血流感染、呼吸道感染是新生兒常見的醫院感染[1-2]。近年來由于抗生素的廣泛使用，越來越多的耐藥菌被檢出[3]。本研究通過對北京婦產醫院NICU2019年1月至2021年12月患者標本中分離出的783病原菌和耐藥情況進行分析，為臨床治療和院感防控提供依據。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

1.1.1試驗菌株 收集北京婦產醫院2019年1月至2021年12月NICU患兒的送檢標本(包括咽拭子、血液、氣管插管尖端、靜脈置管斷端等)培養分離出的病原菌783株，已剔除同一患兒相同部位的重復菌株。送檢標本嚴格依據《全國臨床檢驗操作規程》進行接種。

1.1.2質控菌株 大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC29213。質控菌株均購自國家菌毒種中心。

1.2 培養、鑒定及藥敏試驗

1.2.1培養基和藥敏紙片使用OXIOD產品，有哥倫比亞血瓊脂培養皿、3號麥康凱培養皿、萬古霉素巧克力培養皿。

1.2.2細菌鑒定是通過識別菌落形態、革蘭染色、氧化酶等試驗進行初篩，將分離的菌株在梅里埃VITEK2 COMPACT儀器進行菌株鑒定和藥敏試驗。藥敏結果是根據美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)M100標準判定敏感、中介和耐藥。

1.3 統計學分析

實驗數據采用WHONET5.6及SPSS25軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 病原菌分布

783株病原菌中共檢出革蘭陰性菌432株(55.17%)，革蘭陽性菌295株(37.68%)，真菌56株(7.15%)。革蘭陰性菌中檢出較多的為大腸埃希菌331株(42.27%)，肺炎克雷伯菌26株(3.32%),鮑曼不動桿菌26株(3.32%)。革蘭陽性菌中凝固酶陰性菌和腸球菌較常見，其中表皮葡萄球菌79株(10.09%)，溶血葡萄球菌64株(8.17%)，沃氏葡萄球菌18株(2.30%)，糞腸球菌38株(4.85%)，屎腸球菌25株(3.19%)。真菌中白色念珠菌30株(3.83%),近平滑念珠菌17株(2.17%)。

2.2 革蘭陰性菌耐藥情況

檢出的革蘭陰性菌主要包括大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌和鮑曼不動桿菌，其中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌產超廣譜β內酰胺酶(ESBLs)檢出率分別為23.26%和7.69%。大腸埃希菌對阿米卡星、頭孢替坦、碳青霉烯類藥物、哌拉西林/他唑巴坦均不耐藥；肺炎克雷伯菌對頭孢吡肟、碳青霉烯類藥物、哌拉西林/他唑巴坦均不耐藥；沒檢出鮑曼不動桿菌耐藥株(表1)。

表1 主要革蘭陰性菌對抗生素的耐藥率(%)

2.3 主要凝固酶陰性葡萄球菌對抗生素的耐藥情況

檢出的凝固酶陰性葡萄球菌中表皮葡萄球菌占比最大；所有凝固酶陰性葡萄球菌均未檢測到對利奈唑胺、奎奴普丁/達福普丁、替加環素、萬古霉素的耐藥株(表2)。

表2 主要革蘭陽性葡萄球菌對抗生素的耐藥率(%)

2.4 腸球菌對抗生素的耐藥情況

腸球菌以糞腸球菌和屎腸球菌為主；糞腸球菌和屎腸球菌均未檢出奎奴普丁/達福普丁、替加環素、萬古霉素的耐藥株(表3)。

表3 糞腸球菌和屎腸球菌對抗生素的耐藥率(%)

2.5 真菌對抗生素的耐藥情況

白色念珠菌和近平滑念珠菌為主要檢出菌，檢出菌對兩性霉素和5-氟胞嘧啶均敏感(表4)。

表4 主要真菌對抗生素的耐藥率(%)

3 討論

新生兒重癥監護室收治的多為早產兒、嚴重宮內窘迫綜合征、低體重兒和多種并發癥的新生兒，多數經口氣管插管進行呼吸機輔助呼吸及深靜脈置管，抗菌藥物應用時間長，這些因素增加了感染的風險[4]。在本研究中，大腸埃希菌的檢出率最高達42.27%，ESBLs 是主要的耐藥菌。ESBLs能夠特異性地將β-內酰胺環打開，使頭孢菌素和青霉素類抗菌藥失活，它可通過質粒介導在細菌間傳播耐藥性，同時還能攜帶耐藥基因并造成ESBLs對磺胺類、氨基糖苷類、β-內酰胺類及喹諾酮類抗菌藥耐藥[5-7]。產ESBLs大腸埃希菌的增多可能與患兒自身免疫系統不完善、抵抗力差、呼吸支持、中心靜脈置管等治療措施和抗感染治療時選用相對安全的β-內酰胺類抗菌藥物等因素導致大腸埃希菌的高產酶率[8]，所以合理使用抗菌藥尤為重要。本研究還顯示凝固酶陰性葡萄球菌感染中表皮葡萄球菌占比較大，與曾月瑤等[9]研究相似，溶血葡萄球菌感染率高于其研究，可能與地區病原學分布差異有關。凝固酶陰性葡萄球菌是人類皮膚和黏膜的正常菌群，NICU新生兒由于各個器官和功能發育不成熟，免疫力較低，凝固酶陰性葡萄球菌會通過機械通氣、靜脈置管等有創操進入血液循環，增加了患兒感染的風險[10-12]。另外工作人員手部衛生不合格及環境污染也會增加患兒葡萄球菌定植[13]。在腸球菌中糞腸球菌和屎腸球菌對奎奴普丁/達福普丁、替加環素、萬古霉素均不耐藥，在真菌感染中白色念珠菌對兩性霉素和5-氟胞嘧啶無耐藥情況，近平滑念珠菌對兩性霉素和5-氟胞嘧啶、氟康唑和伏立康唑無耐藥出現。白色念珠菌對氟康唑和伏立康唑的耐藥率分別為23.33%和26.67%，高于吳思穎等[14]的分析，不同念珠菌對常用抗真菌藥物敏感性有差異或固有耐藥，以及因治療產生的獲得性耐藥使其成為治療的主要問題[15]，由于抗菌藥物的廣泛應用，病原菌的耐藥率明顯上升，不同地區不同科室耐藥率也有差異。