不同HPV感染亞型與陰道常見微生物感染的相關性研究

凌艷芝，劉麗文，黃 蕾，屠浚溶，李 琪，童望嬌

(長沙市第一醫院 婦科，湖南 長沙410000)

據統計，每年在全球范圍內大約會出現50多萬例宮頸癌患者，其中有近26萬例患者因宮頸癌而導致死亡[1-2]。目前臨床已明確人乳頭瘤病毒(HPV)與宮頸病變甚至宮頸癌密切相關，其中16、18型HPV對女性生殖道持續性感染狀態最為高危[3-4]。目前研究發現，陰道感染與HPV感染之間密切相關，它在生殖道HPV感染和宮頸癌前病變甚至宮頸癌發生中都可能發揮了一定的作用[5-7]，而其中陰道內各種微生物感染導致的菌群平衡失調對引發HPV感染方面有著重要意義。本研究通過收集并分析行HPV分型檢測且同時行陰道微生物檢測的743名患者的檢查結果，來分析HPV不同感染亞型與陰道內常見微生物之間的關系，為HPV感染的預防、檢測和診療方案優化提供一定的科學依據。

1 對象及方法

1.1 研究對象

選取2020.04.01至2020.10.31期間在長沙市第一醫院婦科門診就診，行HPV分型檢測且同時行陰道常見微生物檢測的743名患者作為研究對象。將HPV檢測陽性的患者分成三組：A組即HPV16、18型感染組；B組即除16、18其他高危型HPV感染組；C組即低危型HPV感染組。根據選擇標準確定365名HPV陽性者，其中A組共84人，B組共233人，C組共48人；同時從門診健康體檢人群中HPV檢測陰性的患者通過系統抽樣法隨機抽取378名作為D組即對照組。743名患者年齡為16-74歲，各組間患者年齡情況無統計學差異。

1.2 方法

1.2.1陰道常見微生物檢測 通過免疫熒光法，將免疫顯色試劑中的各種抗體成分分別來標記宮頸上皮脫落細胞以及陰道分泌物中的各種病原菌抗原，同時采用支原體藥敏培養基進行支原體分離培養及鑒定，采用沙眼衣原體抗原檢測試劑盒對沙眼衣原體進行檢測。

1.2.2HPV分型檢測 通過熒光PCR+膜雜交法的方法來檢測HPV21種亞型，即使用PCR技術擴增從宮頸細胞中提取出來的DNA，通過導流雜交的原理，將提前固定在低密度基因芯片膜上的DNA探針與得到的PCR產物進行雜交、顯色，最后通過得到的薄膜條HPV分布圖的陽性特點來判斷HPV感染的類型。

1.3 統計學分析

采用SPSS23.0統計軟件，計數資料用率表示，率的比較采用χ2檢驗，同時計算OR值及其95%CI描述風險度。多組間比較采用χ2檢驗，以α=0.05為檢驗標準，若P<0.05則表明有統計學差異，必要時予以采用Fisher確切概率法以及Bonferoni法校正檢驗水準。

2 結果

HPV各陽性組及HPV陰性組之間合并解脲脲原體(UU)、人型支原體(MH)、沙眼衣原體(CT)、細菌性陰道病(BV)、外陰陰道假絲酵母菌病(VVC)、滴蟲性陰道炎(TV)感染發生情況見表1。

表1 HPV16、18型組與HPV陰性組合并各種陰道炎對比情況

4組合并發生解脲脲原體(UU)感染率分別為48.81%(41/84)，40.34%(94/233)，47.92%(23/48)，28.84%(109/378)，A、B、C組分別與D組相比差異有顯著統計學意義，而四組在MH(χ2=6.045，P=0.109)、BV(χ2=1.363，P=0.714)、VVC(χ2=4.83，P=0.185)、CT(χ2=2.234，P=0.525)、TV(χ2=1.097，P=0.778)之間感染率無明顯差異性。

3 討論

宮頸癌是常見的一種生殖道惡性腫瘤，在女性生殖系統中的發病率及致死率均位于第一位[8]，雖然近年來隨著社會經濟的發展，宮頸癌的篩查已逐漸得到完善和廣泛應用，但由于人口基數大等各種原因的影響，我國仍然是一個宮頸癌高發國家，這對廣大女性的生殖健康以及身心健康都構成了很大威脅。而宮頸癌與HPV感染誘導宮頸病變的發生相關，特別是HR-HPV感染，其中又以16、18型最高危，是導致SIL以及宮頸癌變的重要病因[9-10]。而HPV感染越來越被認為與陰道微生物感染密切相關。

BV是陰道內優勢菌群減少、而其他厭氧菌大量生長繁殖所引發的陰道感染。BV發生的原因可能與性伴侶過多、過早進行性生活以及濫用陰道灌洗液等因素有關。目前有很多學者證實了BV與HPV感染的發生甚至宮頸病變的發生都有著一定的聯系，可能機制是宮頸上皮細胞可因為BV感染后加速降解及脫落，同時BV會影響如白細胞介素-1β、白細胞介素-10等一些免疫因子的分泌，從而增加HPV病毒易感性，且上皮細胞分泌的分泌性白細胞蛋白酶抑制因子被BV降解后數量的降低抑制了機體抵抗HPV的能力最終引起HPV感染。有研究提示BV與HR-HPV所導致的宮頸病變甚至與宮頸癌的進展有關[11]。Meng等[12]通過研究發現HPV感染與BV有一定的聯系，而與TV、VVC之間均無明顯相關性。但在本研究中，BV與不同亞型HPV感染之間均無明顯相關性。考慮這個結果不排除與數據樣本例數較少引起，因此日后需繼續加大樣本量進一步研究。

VVC是由假絲酵母菌感染發生的一種真菌性陰道炎，TV是由陰道毛滴蟲引起的一種臨床上較常見的性傳播疾病。目前對于VVC、TV是否與生殖道HPV感染，以及是否與宮頸病變相關尚還需要論證。有研究認為TV、VVC與HPV感染之間無明顯相關性[13-14]。

CT是一種生活在宮頸細胞內的原核生物，發病的原因可能是與機體免疫力下降以及宮頸黏膜的褶皺性特點等導致機體無法完全清除病原體從而發生感染有關。而支原體是一種沒有細胞壁故具有多種形狀的原核生物，一般將它分為UU和MH兩種。當機體在免疫功能下降時，支原體可以穿過細胞來干擾細胞正常的代謝，從而引起細胞損傷而發病。支原體已經被證實了與女性盆腹腔炎癥、不孕癥、稽留流產等疾病都有著一定的聯系[15]，但其與HPV感染之間的聯系尚未得到證實。Liang等[16]學者認為UU和CT感染均能夠促使HPV感染的發生發展，且UU是HPV促進宮頸癌前病變繼續發展成為宮頸癌的一個協同因子。劉娜等[17]通過分析82例患者高危型HPV感染與支、衣原體之間的關系，得出支原體與HR-HPV感染之間相關，而CT與之無明顯相關性。本研究發現，CT與HPV感染之間無明顯相關性，而UU感染與HPV感染密切相關。同時，MH感染僅與低危型HPV感染的發生呈正相關性。

近年來越來越多的學者提出恢復陰道微生態內環境穩定對于HPV轉陰率以及SIL轉陰率都有著非常重要的意義，且中西醫提倡的“內外兼治”法也被證實具有明顯的臨床效果。在本研究中也支持HPV感染與陰道微生物感染之間存在著一定聯系的結論，建議對存在MH或者UU感染者，應常規進行HPV檢測，同時在治療HPV感染的同時也應注重恢復陰道微生態平衡狀態，根據具體實際情況進行用藥治療。