知母皂苷AⅢ調(diào)控miR-494對原發(fā)性皮膚黑色素瘤生物學(xué)行為的影響

唐劍輝，黃昭明，余盼盼，朱必勝，劉啟勝

(咸寧市中心醫(yī)院，湖北 咸寧 437100)

黑色素瘤是來源于黑色素細(xì)胞起病的高度惡性的腫瘤，多發(fā)生于皮膚、眼睛，皮膚黑色素瘤與古籍中的“厲癰” “翻花”等十分相似，《內(nèi)經(jīng)》中對“厲癰”的描述為“其狀赤黑”，《外科正宗》中對“翻花”描述為“烏烏黑黑”[1]。近年來，惡性黑色素瘤的發(fā)生率和病死率逐年升高，致死年齡降低[2]。因此，惡性黑色素瘤的早期診斷和治療極其重要。

黑色素瘤基本病因是黑素細(xì)胞發(fā)生DNA損傷。中藥知母是指植物知母的干燥根莖，性寒、味苦、有滋陰潤肺、泄熱清火、止咳等功效，知母皂苷AⅢ是知母的最主要活性成分之一，具有改善記憶功能、抗炎、抗氧化、抗病毒、降低血糖、降低血壓、抗腫瘤等藥理活性[3-4]。miR-494可以調(diào)控多種腫瘤疾病的進程。miR-494介導(dǎo)人成纖維細(xì)胞生長因子受體2調(diào)控骨肉瘤細(xì)胞侵襲和遷移[5]。miR-494-3p靶向HTRA1調(diào)節(jié)瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞生物學(xué)功能[6]。miR-494-3p靶向配子生成素結(jié)合蛋白2促進結(jié)直腸癌細(xì)胞侵襲、遷移及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化[7]。本實驗主要研究知母皂苷AⅢ調(diào)控miR-494對原發(fā)性皮膚黑色素瘤增殖、遷移和侵襲的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 知母皂苷AⅢ購自上海同田生物技術(shù)股份有限公司；人黑色素瘤A375細(xì)胞株購自美國 ATCC公司；DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清，批號：086-150；CCK-8試劑盒購自武漢博士德生物科技有限公司；二辛可寧酸(Bicinchoninic acid，BCA)試劑盒來源于上海碧云天生物科技有限公司；Transwell小室、Matrigel膠購自廣州銳博生物科技有限公司；Cyclin D1、MMP-2、MMP-9抗體購自美國CST公司；β-actin購自美國Santa Cruz公司；Trizol試劑購自日本Takara公司。……