華學峰
(安徽省蕪湖市繁昌區繁陽鎮農業綜合服務中心畜牧獸醫站,安徽 蕪湖 241200)
豬弓形蟲病大多數情況下呈隱性感染,沒有特別明顯的臨床癥狀,還特別容易和其他疾病混合感染,最后造成誤診。因此建立快速、準確的診斷方法尤其重要。過去100年來,人們診斷弓形蟲病主要依靠直接鏡檢等病原學檢查方法,但是這些方法不僅耗時耗力,準確性還不高。而這些年分子診斷技術的不斷發展和完善成熟,目前,弓形蟲病分子診斷方法主要包括DNA探針技術、PCR技術、單克隆抗體技術及基因芯片技術。本病在我國主要是隱形感染,臨床癥狀不明顯而且易與豬瘟、豬肺疫等疫病混淆,所以臨床診斷比較困難,特別容易誤診為豬瘟,從而誤治。因此,建立高效、快速診斷弓形蟲病對預防和治療該病具有重要意義[1]。
2019年6月到8月在安徽省繁昌縣某豬場接診一起病例,仔豬精神不振,食欲減退,懷疑為豬弓形蟲病或者豬瘟、豬肺疫等病。基于以上情況,本文即以一例豬弓形蟲的診斷,以期為臨床正確診斷本病提供一些幫助。
1.1.1 病例來源
安徽繁昌某豬場發病病豬,收集發病仔豬的腹水和肝臟、肺臟、淋巴結內臟器官。
1.1.2 試劑
姬姆薩染料:購自蘇州亞科科技有限公司。甲醇、二甲苯、95%乙醇等均為國產分析純級產品。
1.2.1 流行病學調查
在筆者聯系該豬場3個月內,通過現場觀察,調查檔案,了解到了豬場的飼養規模,發病及死亡情況等。
1.2.2 臨床癥狀觀察
對發病仔豬的表面皮膚、毛發、尿液還有精神與食欲狀況進行觀察。
1.2.3 剖檢檢查
在豬場對其中的1例發病仔豬進行剖檢,觀察其內部肝肺等臟器病變情況。
1.2.4 病原學檢查
(1)細菌分離取發病仔豬的肝、肺、淋巴結等臟器,在無菌環境下保存,對剖檢的器官進行細菌分離,用手術剪剪一小塊,在平板上輕微的蘸一下,接著用四區劃線法培養分離細菌。24 h后,用接種環挑取單個菌落接種至液體培養基,培養24 h備用。如分離到細菌,通過革蘭氏染色方法鑒定。
(2)吉姆薩染色在無菌環境下,取發病仔豬的肝、肺、淋巴結制成觸片;取1滴發病仔豬的腹水,滴到載玻片上的左端,接著用蓋玻片推片,然后風干制成涂片。再在玻片上滴2~3滴甲醇固定,最后用吉姆薩液染色1 h,清洗后干燥鏡檢[2]。
該豬場是育肥豬場,飼養的都是長白豬,一共飼養母豬50頭。該豬場的產房剛剛轉入保育欄的一批小豬開始發病,共有152頭,1周內共有19頭仔豬精神抑郁,食欲減退,耳鼻及四肢末端呈藍紫色。工作人員曾采用抗生素類治療無明顯效果,死亡5頭。
發病初期仔豬存在發熱、腹瀉、無甚食欲、精神萎靡,呼吸困難、尿液發黃、形神俱枯等癥狀。后期身體多處出現紫紅色的瘢痕或者小紅點,同時,可見該病豬發生癲癇狀痙攣,后軀麻痹,運動障礙等神經癥狀,見圖1。

圖1 臨床癥狀
小豬肌肉發白無血色,胸腹腔內有滲出物,腹腔內有透明積液,肝臟邊緣有淤血斑,顏色深淺不一,不均勻。肺臟有明顯的“實變”現象,肺部表面出血嚴重。淋巴結嚴重水腫,出血嚴重,呈紫紅色甚至黑紫色;脾臟邊緣較整齊,但有明顯的出血點和淤血斑,見圖2。

圖2 病理變化
采用血平板分離細菌時未見到細菌。
吉姆薩染色鏡檢結果顯示可看到細胞質內外明顯的一頭稍減一頭鈍圓的弓形蟲滋養體,還看到明顯的假包囊,直徑大小為10~15μm,內含弓形蟲滋養體,白細胞核被擠向一邊,見圖3和圖4。

圖3 吉姆薩方法檢測弓形蟲滋養體

圖4 吉姆薩方法檢測假包囊
7月以后豬場開始發病,診斷初期懷疑方向不明確,無法確定是什么病因,并且用一些抗生素的治療效果不大。在7月底挑取一頭病豬準備剖檢觀察。剖檢結果懷疑為豬弓形蟲病,8月初帶回病料(肝、肺、淋巴結、腹水)進行檢測,最終通過病原學與PCR檢測確診為豬弓形蟲病。證明該豬場感染豬弓形蟲病。經檢測顯示該豬場只有部分小豬感染此病,究其原因,主要和豬場的周圍環境和飼養管理密切相關。豬場位置比較偏僻,飼養條件不盡人意。此次疫病的發病原因分析可能是由于飼養員看護管理不善,導致野貓進入產房,抓咬小豬導致。并且該弓形蟲的DNA傳染性很強,可短時間內傳至別的仔豬帶蟲,在轉入保育欄時,仔豬的免疫力降低從而導致發病。豬弓形蟲病本身就缺少特異性的臨床癥狀迷惑了獸醫的判斷,使得治療方向錯誤從而延誤治療時機,而導致了豬場的經濟損失。對于后期用藥,則是以磺胺藥為主,并輔以增加抵抗力的保健藥品[3]。
豬弓形蟲病對養豬業的發展形成了巨大的威脅,建立有效的防治措施是決不可忽視的。目前來說,還沒有切實可行的從根本上完全控制和杜絕弓形蟲感染的方法。積極采取防治措施可以大大降低該病造成的傷害和損失。科學的封閉式飼養管理,盡量降低對動物體的應激;制立完善嚴格的檢疫制度,定期抽檢弓形蟲,檢測為陽性要及時淘汰;豬場工作人員要注意避免與貓接觸等,這些都是控制弓形蟲病的感染和傳播的有效措施。