血清胱抑素C、癌胚抗原、抗原199聯合檢測在結直腸癌診斷中的價值研究

張程程，費素娟

結直腸癌是我國常見的消化系統惡性腫瘤之一，病人早期臨床癥狀不明顯，確診時約50%～60%的病人已有遠處轉移，對結直腸癌來說早期診斷已經非常重要［1-2］。胱抑素C可以抑制半胱氨酸蛋白酶，近些年有文獻報道惡性腫瘤病人體內的血清胱抑素C（Cys C）水平比健康人高，這與腫瘤的發生、轉移和浸潤有著非常密切的關系，可能成為臨床診斷和判斷預后的指標［3-4］。Yuan等［5］研究發現胱抑素C在良性病變組織和食管癌旁組織中的表達顯著低于食管癌組織。癌胚抗原（CEA）、抗原199（CA199）是常見的消化系統癌表面抗原，參與癌細胞浸潤及破壞分解的過程［6-7］。本研究探討血清癌胚抗原（CEA）、抗原199（CA199）及胱抑素C（Cys C）三項指標在結直腸癌病人和結直腸良性疾病者血清中的水平，以及聯合檢測在結直腸癌診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年1月至2020年1月徐州醫科大學附屬醫院經手術或內鏡取病理活檢診斷為結直腸癌病人選取215例（結直腸癌組），年齡（66.01±9.59）歲，男性152例，女性63例。其病理分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期76例，Ⅲ期84例，Ⅳ期30例；發生淋巴結轉移118例，無淋巴結轉移97例。結直腸良性疾病病人110例（對照組），包括增生性息肉30例，腺瘤性息肉30例，炎癥性腸病50例。年齡（54.73±10.94）歲，其中男性57例，女性53例。入選標準：病人病歷、檢查資料完整，初次診斷且沒有經過治療，其診斷明確并且腫瘤分期符合《美國癌癥聯合委員會AJCC-TNM分期指南（第七版）》。排除轉移性癌、合并有肝腎功能不全、其他部位惡性腫瘤、急慢性腎臟疾病、其他慢性疾病者。病人或其近親屬知情同意，本研究符合《世界醫學協會赫爾辛基宣言》相關要求。

1.2 方法按照試劑盒提供的檢測標準：血清胱抑素C（Cys C）＞1.15 mg/L、癌胚抗原（CEA）＞5.00 μg/L、抗原199（CAl99）＞35.00 U/mL為陽性標準。清晨空腹靜脈采血5 mL，然后離心、復溫，采用ELISA法進行檢測。

1.3 統計學方法采用SPSS 22.0對數據進行統計分析。計量資料經正態性檢驗，符合正態分布的數據均采用表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗。不符合正態分布的數據均采用M（P25，P75）表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗。分類計數資料均采用例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。采用logistic回歸分析篩選影響結直腸癌的相關因素。采用ROC曲線分析各指標對結直腸癌的診斷價值。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組Cys C、CEA、CA199的表達水平比較結直腸癌病人Cys C、CEA、CA199水平均明顯高于對照組，均差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 結直腸癌215例與結直腸良性疾病110例Cys C、CEA、CA199水平比較/M（P25，P75）

2.2 Cys C、CEA、CA 199在結直腸癌不同病理分組中的表達水平比較Ⅰ～Ⅱ期結直腸癌的Cys C、CEA、CA 199表達水平低于Ⅲ～Ⅳ期；無淋巴結轉移組的Cys C、CEA、CA 199水平低于有淋巴結轉移組，均差異有統計學意義（P＜0.05），見表2，3。

表2 結直腸癌215例不同TNM分期Cys C、CEA、CA199水平比較/M（P25，P75）

表3 結直腸癌215例有無淋巴結轉移病人Cys C、CEA、CA199水平比較/M（P25，P75）

2.3 結直腸癌危險因素的logistic回歸分析結直腸癌危險因素的logistic回歸分析結果見表4。以是否結直腸癌（是=1；否=0）為因變量，以年齡、Cys C、CEA、CA199、為自變量，采用進入法建立二元logistic回歸模型。結果顯示年齡、Cys C、CEA、CA199在模型中均差異有統計學意義（P＜0.05），且均為影響結直腸癌發生的危險因素。即年齡每增加1歲，病人患結直腸癌的風險將增加0.115倍；Cys C表達陽性病人患結直腸癌的風險比陰性病人高1.118倍；CEA表達陽性病人患結直腸癌的風險比陰性病人高0.940倍；CA199表達陽性病人患結直腸癌的風險比陰性病人高1.305倍。見圖1。

表4 結直腸癌215例危險因素的logistic回歸分析

2.4 Cys C、CEA、CA199對結直腸癌的診斷價值分析Cys C、CEA、CA199、三種指標聯合診斷結直腸癌的ROC曲線下面積分別為0.70、0.69、0.66、0.74，對應P值均小于0.05，說明各單一指標及聯合三指標對結直腸癌的診斷價值均差異有統計學意義。聯合三種指標診斷結直腸癌的ROC曲線下面積最大，說明三指標聯合診斷結直腸癌的效果更佳。見表5。

表5 Cys C、CEA、CA199診斷結直腸癌215例ROC曲線分析

3 討論

結直腸癌的發病死亡率各國有很大的差異，我國是世界上的高發地區之一［8］。結直腸癌的癌細胞過度異常增生，通過多因素、多步驟，以及遺傳、環境因素共同作用，形成一個復雜的致病過程［9-10］。結直腸癌的治療主要以手術切除以及聯合術前術后放化療為主，而即使是早期結直腸癌手術切除后，術后重建也會大大降低病人術后的生活質量［11-13］。因此血清標志物對于結直腸癌早期診斷非常重要。Cys C是一種存在于各種有核細胞中的蛋白酶抑制劑，堿性，分子量低，產生率恒定［14］。Cys C在反應腎功能早期異常方面，被廣泛應用于臨床。作為內源性抑制劑，胱抑素C可以調節細胞內蛋白水解水平，已被證明在一些生理和病理過程中發揮了重要作用［15-16］。近年來，大量研究表明，Cys C通過抑制組織蛋白酶活性、干擾TGF-β/smad和MAPK/Erk信號通路及損傷免疫應答多種途徑參與腫瘤細胞增殖，侵襲，血管生成和轉移等過程［17］。陳娟娟等［18］發現食管癌病人的血清胱抑素C水平比健康體檢者升高明顯，且ROC曲線提示具有較好的診斷效能。CEA是一種糖蛋白抗原，存在于胃腸道、膽道及胚胎組織的血清和分泌液中，是診斷結直腸癌的相對特異性較高的腫瘤標志物，但是在乳腺癌、肺癌及其他消化道腫瘤均有異常表達［19］。CA199也被稱為消化道腫瘤相關抗原，以唾液黏蛋白的形式存在于血清中，分布于胰腺、腸、肝和膽管上皮等處。具有調節癌細胞對細胞毒性淋巴細胞的敏感性的作用［20-21］。

本研究發現：三種指標聯合診斷結直腸癌的ROC曲線下面積最大，說明聯合檢測對結直腸癌的診斷效能較好。三項單獨比較，Cys C診斷結直腸癌的效能優于CEA和CA199，其截點值為0.76，對應的靈敏度為77.7%，特異度為61.8%。Cys C在三種指標里，對診斷結直腸癌的靈敏度最高，而在特異度方面，低于CEA和CA199，因此三種指標聯合檢測可互相彌補，提高結直腸癌的診斷價值。Cys C、CA199和CEA 3項指標不僅對結直腸癌的診斷有輔助價值，在判斷病情的嚴重程度方面也有一定的幫助。本研究證實，三種指標隨著病理分期的發展而逐漸升高，在不存在淋巴結轉移和Ⅰ～Ⅱ期結直腸癌中，血清的Cys C、CEA、CA199、水平均低于存在淋巴結轉移和Ⅲ～Ⅳ期結直腸癌。

綜上所述，血清CysC雖非結直腸癌的特異性標志物，但在結直腸癌診斷方面有一定的重要價值，可作為結直腸癌的輔助診斷指標，三者聯合應用對于結直腸癌的診斷效果更顯著。且3項指標水平與結直腸癌的病情相關，可應用于結直腸癌的預后判斷。