酶抑制率法測定蔬菜中農藥殘留試驗分析

何 歡

（湖南省農藥檢定所，湖南 長沙 410000）

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本文所提試驗將使用大型菜市場供應原料為試驗基礎材料，采集時間為2021年8月，其中蔬菜樣品按類別可分為葉菜類、蕓薹屬類、豆類、瓜類、茄果類和根莖類等6大類，共19個蔬菜品種。其中葉菜類包含7個品種、蕓薹屬類和豆類均為3個品種、瓜類、茄果類和根莖類均為2個品種，共計檢測份數為3800份（單位：批次），其中葉菜類共1400份，占總份數36.8%；蕓薹屬類和豆類均為600份，均占總份數的15.8%；瓜類、茄果類和根莖類蔬菜均為400份，均占總份數的10.5%。

本試驗所使用的儀器與試劑有：DY-3500Plus食品速測儀、電子天平，檢測試劑有提取試劑、乙酯膽堿酯酶、二硫代二硝基苯甲酸顯色劑、碘化硫代乙酰膽堿底物。

1.2 試驗方法

樣品處理：將從市場購買回來的蔬菜樣品進行預處理，擦凈表面泥土，用取樣器取1厘米左右的方碎片，用電子天平稱取葉菜類2克，非葉菜類4克。將稱取好的樣品放入取樣瓶中，加入20毫升緩沖液，振蕩1～2分鐘，倒出提取液，靜置2分鐘待測。

檢測：對照測試，在專用反應瓶中加入3毫升緩沖液，再加入50微升顯色劑和50微升酶液，混勻，37℃下放置30分鐘后加入50微升底物，搖勻并立即倒入比色皿中，放入測試通道，按儀器“對照”鍵測試3分鐘的吸光度變化值ΔA。樣品測試，在專用反應瓶中加入3毫升樣品提取緩沖液，再加入50微升顯色劑和50微升酶液，混勻，37℃下放置30分鐘后加入50微升底物，搖勻并立即倒入比色皿中，放入測試通道，按儀器“對照”鍵測試3分鐘的吸光度變化值ΔA。

檢測結果：在410納米波長下測試吸光度的變化，計算出抑制率就可判斷農藥的殘留情況。

試驗檢測結果依據主要以添加酶制劑下酶被抑制的程度來表示。

上式中：ΔA表示對照組下緩沖液反應3分鐘吸光度下的變化值；ΔA表示試驗樣品溶液反應3分鐘后酶吸光度的變化值。當檢測結果得出提取液對添加酶的抑制率≥70%時，即代表檢測樣品蔬菜中存在含有高劑量的有機磷或者氨基甲酸酯類的農藥殘留超標。對首次檢測結果出現陽性的蔬菜進行重檢，以保證檢測蔬菜得出結果的真實性，兩次檢測仍呈陽性需用氣相色譜法進一步檢測分析。

2 結果與分析

2.1 不同品種蔬菜的農藥殘留檢測試驗結果

在本試驗蔬菜農藥殘留檢測樣品中，共檢測出農藥殘留份數為226份，總超標率為5.9%，詳細檢測結果如表l所示。

從上表1中檢測數據結果的整體上看，可以得出以豆類蔬菜農藥殘留超標率最多，超標份數可以達到總樣品份數的2.8%；以根莖類蔬菜農藥殘留份數最少，超標份數僅占檢測份數的0.2%。從檢測樣品整體角度上看，樣品中豇豆、荷蘭豆、四季豆、辣椒的農藥殘留超標率相對較高，其余試驗檢測樣品農藥殘留偏低。

表1 不同品種蔬菜農藥殘留檢測結果

2.2 不同檢測類型蔬菜農藥殘留超標率比較

由表2中數據可知，蔬菜檢測樣品中農藥殘留超標率從高到低排序為，豆類＞葉菜類＞蕓薹屬類＞茄果類＞瓜類＞根莖類。造成該現象的主要原因在于蔬菜本身的生長環境與抗蟲害的能力。以豆類蔬菜為例，生長環境耐熱性強，不耐低溫。在少雨干旱高溫的季節，很容易受到地面蟲害的侵蝕，主要以銹病、病毒病、莢螟、紅蜘蛛、蚜蟲等為主的病蟲害比較嚴重。一方面，農戶為保障蔬菜不遭到破壞，會經常噴灑農藥來殺死害蟲或阻止害蟲產卵等，另一方面，用藥多憑習慣和經驗，缺乏科學的使用方法。在用量上有可能超量使用，沒有遵循超過農藥安全間隔期之后采摘，從而導致蔬菜農藥超標現象偏高。

表2 不同種類蔬菜農藥殘留超標率的統計結果

3 結論與討論

經上述試驗數據能夠得出，現階段蔬菜流通環節中售賣的蔬菜仍有一部分蔬菜存在農藥殘留超標的現象，特別是豆類蔬菜農藥殘留超標率最高。因此在當地相關部門加強監管的同時，商戶應了解蔬菜產地及生產用藥情況，加強采購蔬菜的安全食用性，以降低殘留農藥對人自身的傷害。

同時，經上述所提試驗及其數據，本文將出現該現象的主要原因進行總結并得出一下幾點結論。

第一，經上述試驗結果可以得出，市場中農藥殘留超標的蔬菜均以豆類、葉菜類蔬菜為主。其常見侵蝕昆蟲有黃曲條跳甲、夜蛾科、小菜蛾以及煙粉虱等。為消滅上述害蟲農戶們會通過使用過量用藥和多次施藥的方式，進行消殺害蟲的操作，而超標準、超范圍的使用農藥會影響蔬菜農藥消解，如農戶在使用如氧樂果和克百威等殺蟲劑之后，蔬菜未超過農藥的安全間隔期就采摘上市，就會導致上市蔬菜出現農藥殘留超標的現象。

第二，經上述試驗結果證明，上市蔬菜中殘留較低的蔬菜有，番茄、黃瓜。生長環境下存在的害蟲較少且害蟲只會以這些植物的葉片為食，噴灑農藥時也會著重噴灑蔬菜的葉片而不是果實部分，因此上市的茄果類蔬菜和瓜類蔬菜農藥殘留較低。

第三，上述蔬菜葉菜類含有天然色素，需要延長靜置時間，減少干擾。因此在上述檢測中檢測結果會容易出現假陽性（檢測結果為農藥殘留超標），對此在處理上述蔬菜樣品時應當采取浸泡法來獲得蔬菜上的農藥殘留，延長提取靜置時間。從而降低次生物質和葉綠素對酶制劑檢測的（干擾。另外，需要重點注意若檢測試劑存放到冰箱中，在取出使用時需要解凍至規定操作溫度及添加酶制劑中酶的最佳活性溫度，而且酶液不易反復進行解凍操作，否則會直接影響酶的活性降低，影響試驗的精準性。