長期抗病毒治療的慢性乙型肝炎患者血清TIMP-1和M-CSF水平變化

張磊 黃育紅 羅凌 汪麗萍 方春華 冉斌 李應

慢性乙型肝炎(CHB)是由乙型肝炎病毒(HBV)持續感染時間所導致的一種慢性傳染性疾病，全球約有2.53億HBV感染者[1-2]。長期抑制病毒復制是臨床治療CHB的主要目標，但有一部分患者仍會進展至終末期肝臟疾病[3-4]。病理組織活檢為有創檢查，在臨床應用中存在一定的局限。有研究表明，組織基質金屬蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)水平變化均與肝硬化的發生、發展密切相關[5-6]。本研究觀察長期抗病毒治療的CHB患者血清TIMP-1和M-CSF水平變化，旨在探討其對CHB患者肝硬化發生的預測效能。

資料與方法

一、臨床資料

納入2017年4月—2019年2月合肥市第三人民醫院收治的CHB患者148例為研究對象(男101例、女47例)。患者診斷符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)》標準[7]，且入組前未合并肝硬化，近1個月未接受抗病毒治療，年齡>18歲。

二、方法

患者均給予恩替卡韋0.5 mg/d口服，連續治療2年。血清TIMP-1、M-CSF檢測方法：治療前和治療后6個月采集所有研究對象空腹靜脈血5 mL，離心后分離血清測定TIMP-1、M-CSF水平；并計算血清TIMP-1和M-CSF治療前1 d與治療后6個月差值，分別記為ΔTIMP-1、ΔM-CSF。

三、肝硬化發生判斷

治療2年后，依據《肝病診療指南》[8]對CHB患者肝硬化的發生進行診斷，并經肝臟病理活檢確診；根據是否發生肝硬化分為發生組和未發生組。

四、臨床資料收集

收集并歸納可能影響CHB患者肝硬化發生的相關資料，主要包括性別、年齡、體質指數(BMI)等。

五、統計學分析

應用SPSS 24.0軟件進行統計學分析。對正態分布的計量資料以均數±標準差表示，組間比較采用獨立t檢驗。計數資料以例數(%)表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

一、治療前后血清TIMP-1和M-CSF水平變化

與治療前1 d相比，治療6個月后CHB患者血清TIMP-1和M-CSF均降低(t=13.565、22.715，P<0.05)，ΔTIMP-1、ΔM-CSF分別為(56.6±8.3)μg/L、(62.5±9.2)ng/L。見表1。

表1 血清TIMP-1和M-CSF水平治療前后變化

二、統計CHB患者肝硬化發生情況

本研究148例CHB患者，治療2年后共有36例發生肝硬化，肝硬化發生率為24.32%。

三、對比發生組和未發生組患者的臨床資料

發生組ALT、肝門靜脈內徑、LSM、TIMP-1，治療6個月后TIMP-1、M-CSF均高于未發生組(P<0.05)，ΔTIMP-1、ΔM-CSF則低于未發生組(P<0.05)。見表2。

四、影響CHB患者肝硬化發生的多因素分析

以ALT、肝門靜脈內徑、LSM、TIMP-1，治療6個月后TIMP-1、M-CSF，ΔTIMP-1及ΔM-CSF為自變量(均為連續變量)，CHB患者是否發生肝硬化為因變量，發生=1，未發生=0，進行logistic回歸分析，多因素分析結果顯示，LSM、ΔTIMP-1及ΔM-CSF均為影響CHB患者肝硬化發生的危險因素(OR=2.732、3.040、3.330，P<0.05)，見表2。

表2 發生組和未發生組患者的臨床資料對比

表3 影響CHB患者肝硬化發生的Logistic回歸分析

五、血清TIMP-1、M-CSF變化對CHB患者肝硬化發生的預測效能

ROC分析顯示，血清ΔTIMP-1、ΔM-CSF預測CHB患者肝硬化發生的最佳截斷點分別為50.9 μg/L、61.4 ng/L，靈敏度分別為80.6%、72.2%；特異度分別為75.9%、80.4%，AUC分別為0.848、0.809。見圖1、表4。

圖1 血清TIMP-1、M-CSF變化對CHB患者肝硬化發生預測的ROC圖

表4 血清TIMP-1、M-CSF變化對CHB患者肝硬化發生預測的ROC分析

討 論

CHB疾病的進展可累及多個系統，可使肝臟變形、變硬，最終進展為肝硬化[9-10]。目前臨床中多采用肝臟瞬時彈性成像技術等對肝硬化進行預測，但其易受多種炎癥反應等多種混雜因素的影響，對肝硬化發生的預測效能較低[11-13]，急需進行尋找一種對長期抗病毒治療的CHB肝硬化發生進行預測的血清學指標。通過對長期抗病毒治療的CHB患者血清TIMP-1和M-CSF水平變化進行探討，對早期發現肝硬化具有一定的臨床參考價值。

本研究結果顯示，治療6個月后CHB患者血清TIMP-1和M-CSF均降低。TIMP-1為基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)天然活性抑制因子，有研究表明[14-16]，TIMP-1水平能夠反映肝臟纖維化的程度，且不易受肝臟炎癥分級的影響，當機體中TIMP-1水平升高時，MMP-9活性下降，使組織細胞外基質(ECM)積聚，從而導致肝臟纖維化的發生。巨噬細胞為肝臟炎性反應的主效應細胞，具有聚集、調節、激活肝星狀細胞的作用[17]。M-CSF可介導免疫反應、炎性反應，同時還參與肝硬化的病理發展[18-29]。本研究中，治療2年后肝硬化發生率為24.32%，提示CHB患者進展為肝硬化的發生率較高，應引起臨床醫務人員、患者及家屬的高度重視。近年來醫療體系中已引入“治未病”的理念，對于任何疾病，都應認識到“預防大于治療”[20]。本研究結果顯示，肝硬化發生組ALT、肝門靜脈內徑、LSM、TIMP-1，治療6個月后TIMP-1、M-CSF均高于未發生組，ΔTIMP-1、ΔM-CSF則低于未發生組，多因素分析表明，LSM、ΔTIMP-1及ΔM-CSF均為影響CHB患者肝硬化發生的危險因素，提示以上因素均為影響CHB患者肝硬化發生的危險因素。TIMP-1過度表達是致使腎間質纖維化的主要原因之一，其水平變化與肝纖維化分期存在一定的相關性，可通過檢測血清TIMP-1水平來評估慢性肝病患者纖維化的程度，以更好地判斷CHB患者疾病的發展趨勢。血清M-CSF在高度肝纖維化患者中的表達持續增強，其可通過多種路徑促進肝硬化的進程。ROC分析顯示，血清ΔTIMP-1、ΔM-CSF預測CHB患者肝硬化發生的AUC分別為0.848、0.809，提示血清ΔTIMP-1、ΔM-CSF預測CHB患者肝硬化發生的預測效能較高，可作為臨床評估CHB患者是否發生肝硬化的重要參考指標。