酶聯(lián)免疫技術(shù)應(yīng)用在艾滋病初篩中的準(zhǔn)確性分析

文/王雪蓮

艾滋病又被稱作獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immune deficiency syndrome)，即AIDS。此疾病屬于一種具有極高危害性的傳染病，主要是由于受到艾滋病毒——HIV（human immunodeficiency virus)傳染所致。一直以來(lái)，在全球各地，艾滋病均具有較為嚴(yán)重的流行趨勢(shì)，在我國(guó)也明顯表現(xiàn)出高感染率、高增長(zhǎng)速度的特點(diǎn)。其主要是通過性接觸、血液和母嬰傳播，將會(huì)對(duì)受感染者的CD4+T淋巴細(xì)胞造成嚴(yán)重侵犯和危害，損傷機(jī)體免疫細(xì)胞和功能，甚至可能導(dǎo)致缺陷，進(jìn)而可能合并更多嚴(yán)重性感染或者惡化成腫瘤，具有迅速傳播、病程緩慢和病死率極高的特點(diǎn)。HIV抗體篩查是防治該疾病的關(guān)鍵所在，臨床上具有較多的檢測(cè)方法，此次探究將以酶聯(lián)免疫法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）與膠體金法的比較展開分析，特取2019年3月至2020年4月期間內(nèi)進(jìn)行艾滋病初篩的檢測(cè)者260例為對(duì)象進(jìn)行，現(xiàn)就所得分析結(jié)果詳細(xì)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 基礎(chǔ)資料

從近年來(lái)（介于2019年3月至2020年4月之間）在我疾控中心進(jìn)行篩查的具有高感染風(fēng)險(xiǎn)的艾滋病初篩者中有效納入260例檢測(cè)對(duì)象為該次分析對(duì)象，納入對(duì)象中，男性160例、女性100例，年齡范圍以17～76歲為區(qū)間，平均年齡為（45.18±3.50）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）參與者樣本符合送檢相關(guān)要求。（2）因各種因素被判定為具有較高艾滋病感染風(fēng)險(xiǎn)者。（3）臨床相關(guān)資料顯示完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）檢查者自身存在有血液系統(tǒng)疾病等。（2）同時(shí)合并有其他傳染性疾病者。（3）年齡不符合該次取樣區(qū)間者。

1.2 方法

對(duì)所參與分析的檢查者的血清標(biāo)本進(jìn)行準(zhǔn)確收集，基于《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)展開檢測(cè)工作，整個(gè)操作過程需嚴(yán)格遵照相關(guān)儀器、試劑等說(shuō)明要求進(jìn)行操作和判斷。針對(duì)已初篩為陽(yáng)性的標(biāo)本需交送至確證實(shí)驗(yàn)室加以復(fù)檢和抗體確證實(shí)驗(yàn)，保證所有涉及的試劑均經(jīng)藥品管理局批準(zhǔn)、符合試劑盒規(guī)定、處于有效期內(nèi)。將所有血液樣本進(jìn)行及時(shí)的離心處理，大約8-10 min后吸出其上層清液留作待檢標(biāo)本，應(yīng)特別注意在進(jìn)行血清吸取時(shí)不可吸入纖維蛋白。通過酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，主要是在固相載體（聚苯乙烯微量反應(yīng)板）表面將已知的抗原或抗體加以吸附，使得經(jīng)酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)可在固相反應(yīng)板表面順利進(jìn)行，隨后再用洗滌法洗除液相中的游離成分，加入底物溶液，以其顏色變化來(lái)判定有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng)，標(biāo)本中抗體或抗原的量與顏色反應(yīng)的深淺呈正相關(guān)，最后再遵照有關(guān)使用說(shuō)明進(jìn)行后續(xù)的加樣、溫育、洗滌和顯色等操作。在采用膠體金法對(duì)HIV抗體進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，同樣應(yīng)依據(jù)相關(guān)操作說(shuō)明進(jìn)行嚴(yán)格操作，按照說(shuō)明書要求吸取規(guī)定量的待測(cè)血清，加入試劑條檢測(cè)孔中，需要滴加稀釋液的隨即加入稀釋液1滴，并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)判讀結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

計(jì)算比較經(jīng)酶聯(lián)免疫法和膠體金法對(duì)260例高危艾滋病感染檢查者的抗體篩查結(jié)果、靈敏性、特異性、約登指數(shù)、假陽(yáng)性率及假陰性率結(jié)果。計(jì)算方式如下：（1）靈敏性=真陽(yáng)性檢出例數(shù)/（真陽(yáng)性檢出例數(shù)+假陰性檢出例數(shù)）×100%。（2）特異性=真陰性檢出例數(shù)/（真陰性檢出例數(shù)+假陽(yáng)性檢出例數(shù)）×100%。（3）約登指數(shù)=（靈敏度+特異度）-1。（4）假陽(yáng)性率=假陽(yáng)性檢出例數(shù)/（真陰性檢出例數(shù)+假陽(yáng)性檢出例數(shù)）×100%，假陰性率=假陰性檢出例數(shù)/（真陽(yáng)性檢出例數(shù)+假陰性檢出例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)本次分析中涉及的有關(guān)數(shù)據(jù)資料均在系統(tǒng)軟件SPSS21.0版本中展開處理，其中的計(jì)數(shù)資料將以(%)呈現(xiàn)，同時(shí)采用x對(duì)其展開檢驗(yàn)，其中的計(jì)量資料則將以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差呈現(xiàn)，同時(shí)采用t對(duì)其展開檢驗(yàn)，若最終結(jié)果顯示P<0.05，則表示所得數(shù)據(jù)結(jié)果之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 酶聯(lián)免疫法和膠體金法的艾滋病抗體篩查結(jié)果比較

在該次所納入的260例高危艾滋病篩查者中，通過酶聯(lián)免疫法檢查結(jié)果顯示149例為抗體陽(yáng)性，其余111例為抗體陰性。基于膠體金法的檢查結(jié)果顯示抗體陽(yáng)性共計(jì)139例，抗體陰性共計(jì)121例。酶聯(lián)免疫法下的陽(yáng)性檢出率稍高于膠體金法，但兩組數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05）。詳如表1所示。

表1 兩種檢測(cè)方式下的艾滋病抗體篩查結(jié)果比較[n(%)]

2.2 酶聯(lián)免疫法和膠體金法的靈敏性和特異性結(jié)果對(duì)比

酶聯(lián)免疫法與膠體金法相比，其靈敏性和特異性結(jié)果均明顯呈更高顯示，靈敏性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05），特異性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05），詳如表2所示。

表2 酶聯(lián)免疫法和膠體金法的靈敏度和特異度結(jié)果對(duì)比[n(%)]

2.3 酶聯(lián)免疫法和膠體金法的約登指數(shù)結(jié)果比較

酶聯(lián)免疫法檢查的約登指數(shù)為0.92，明顯高于膠體金法檢查的0.76（P＜0.05）。

2.4 酶聯(lián)免疫法和膠體金法檢查的假陽(yáng)性率和假陰性率結(jié)果對(duì)比

酶聯(lián)免疫法下的假陽(yáng)性率和假陰性率結(jié)果均明顯低于膠體金法檢測(cè)結(jié)果，但兩組數(shù)據(jù)假陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05），假陰性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05），具體見表3。

表3 酶聯(lián)免疫法和膠體金法檢查的假陽(yáng)性率和假陰性率結(jié)果對(duì)比[n(%)]

3 討論

艾滋病的發(fā)生主要是由HIV感染所致，是一種獲得性免疫缺陷綜合征，亦屬于常見的傳染疾病，并且具有較高的病死率。因此，世界衛(wèi)生組織曾在1988年開始將每年的12月1日定為世界艾滋病日，以此來(lái)加強(qiáng)人們對(duì)該疾病的重視，并呼吁國(guó)際組織于這一天進(jìn)行艾滋病知識(shí)的宣傳和普及，同時(shí)還以紅絲帶作為其標(biāo)志，象征廣大群眾對(duì)艾滋病病人和被感染人群的支持和關(guān)心。一旦染上艾滋病后，將會(huì)導(dǎo)致人體的免疫系統(tǒng)受到嚴(yán)重破壞，進(jìn)而累及多個(gè)相關(guān)系統(tǒng)和組織，極大增加了相關(guān)病原生物的入侵風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重威脅著患者的生命健康安全。HIV的傳播途徑尤為廣泛，常見的有血液傳播、體液傳播、共用針具傳播等，此外，有性生活不潔、男男性行為和吸毒史等人群具有更高的感染性。因此，為了能更好地加強(qiáng)相關(guān)人群的艾滋病防治工作，該領(lǐng)域研究人士提議應(yīng)及時(shí)對(duì)高危感染人群加以HIV抗體篩查，以便能盡早對(duì)確認(rèn)對(duì)象做好相應(yīng)的處理措施。血清檢測(cè)是當(dāng)前針對(duì)HIV抗體篩查的重要方式，WHO指出，對(duì)于HIV抗體的篩查方法應(yīng)至少具有便捷、快速、靈敏性高的特點(diǎn)。而酶聯(lián)免疫法主要是通過在聚苯乙烯等固相載體上將可溶性的抗原或抗體結(jié)合一起，結(jié)合抗原體結(jié)合專一性進(jìn)行檢測(cè)的方法，具有較好的定性和定量特點(diǎn)，此外，該方法還具有較為簡(jiǎn)單的操作流程，能直接對(duì)所送檢樣本中的HIV抗體加以檢測(cè)，具有較高的靈敏性；膠體金法也是臨床中常用的檢測(cè)方法，具有檢測(cè)快速、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。但是，目前臨床中關(guān)于膠體金法和酶聯(lián)免疫法的優(yōu)劣勢(shì)仍然存在一定的爭(zhēng)議，雖然兩者均具有較快的檢測(cè)速度和操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)，但在實(shí)際運(yùn)用中，酶聯(lián)免疫檢測(cè)的靈敏度、準(zhǔn)確性稍高于膠體金法，因此，可在對(duì)HIV抗體的初篩中加以推廣運(yùn)用。在該次分析結(jié)果中：酶聯(lián)免疫法的抗體陽(yáng)性檢出率雖然明顯高于膠體金法，但兩組數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。就檢測(cè)特異性和靈敏性結(jié)果比較亦顯示酶聯(lián)免疫法高于膠體金法，靈敏性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），特異性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。此外，約登指數(shù)結(jié)果顯示膠體金法低于酶聯(lián)免疫檢測(cè)法（P＜0.05）。酶聯(lián)免疫檢測(cè)法的假陽(yáng)性率和假陰性率均明顯低于膠體金法的檢測(cè)結(jié)果，假陰性率數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，將酶聯(lián)免疫技術(shù)運(yùn)用于艾滋病臨床檢測(cè)中，實(shí)際診斷價(jià)值滿意，其在靈敏性、陽(yáng)性檢出率等方面均較膠體金法更高，降低陽(yáng)性漏檢率，對(duì)臨床艾滋病的防治工作具有重要的參考作用。