寧寧,唐啟勝,楊愉晨,趙衛合,楊龍飛
1.西北婦女兒童醫院病理科,陜西 西安 710061;2.空軍軍醫大學附屬唐都醫院泌尿外科,陜西 西安 710038;3.西安市精神衛生中心檢驗科,陜西 西安 710061;4.空軍軍醫大學附屬唐都醫院放療科,陜西 西安 710038;5.空軍軍醫大學附屬唐都醫院中心實驗室,陜西 西安 710038
乳腺癌是最常見的女性腫瘤之一,是發生于乳腺的上皮性惡性腫瘤。放射治療是乳腺癌治療的主要手段之一,有研究認為乳腺癌對低劑量放射線不敏感,其中具體機制不明[1]。長鏈非編碼RNA(lncRNA)對人類基因的表達具有重要的調控作用,能夠影響腫瘤的發生、發展以及轉移,對腫瘤診斷與治療具有潛在價值。有研究發現乳腺癌組織中長鏈非編碼RNA GATA6反義RNA 1(GATA6-AS1)表達降低,且與預后不良有關[2]。GATA6-AS1與腫瘤細胞放射敏感性間的關系尚不明確。為了研究乳腺癌更合理的放療方式,為臨床放療選擇提供依據,本研究擬探討X線不同分割劑量放療方案對乳腺癌MCF-7細胞增殖、細胞凋亡以及GATA6-AS1基因及其鄰近基因表達產物GATA6表達的影響。
1.1 材料與試劑 細胞培養試劑DMEM培養基、0.25%胰蛋白酶與新生牛血清購自Gibco公司,CCK-8細胞增殖檢測試劑盒購自翌圣公司。RNA提取試劑Trizol、反轉錄試劑盒與SYBR green PCR mix購自Invitrogen公司。兔抗人GATA6單克隆抗體、HRP標記山羊抗兔二抗購自CST公司。
1.2 細胞與處理 人乳腺癌MCF-7細胞來源于ATCC菌種庫,使用含10%新生牛血清的DMEM培養。實驗分為小分割組(每次0.5 Gy,共8次)、大分割組(每次2 Gy,共2次)和對照組(無照射)。小分割組每天給予4次X線照射,每次0.5 Gy,間隔3 h照射,共8次;……