芡實(shí)的炮制沿革及現(xiàn)代研究進(jìn)展Δ

鄧秋童，齊英，王秋紅，2#（.廣東藥科大學(xué)中藥學(xué)院，廣州 50006；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)教育部北藥基礎(chǔ)與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/黑龍江省中藥及天然藥物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱 50040）

芡實(shí)為睡蓮科植物芡EuryaleferoxSalisb.的干燥成熟種仁，味甘、澀，性平，歸脾、腎經(jīng)，具有益腎固精、補(bǔ)脾止瀉、祛濕止帶的功能，常用于遺精滑精、遺尿尿頻、帶下、白濁、小便不禁兼有腥濁者。生芡實(shí)的功效以澀精止帶為主，而炒芡實(shí)的功效則以補(bǔ)脾健胃為主，由此可知，炮制對(duì)芡實(shí)的功效具有重要影響。另外，由于芡實(shí)分布區(qū)域廣泛，各地的氣候環(huán)境、生產(chǎn)條件及用藥習(xí)慣等不同，造成芡實(shí)炮制工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參差不齊，因而難以保證其臨床應(yīng)用的有效性。基于此，本文對(duì)芡實(shí)的炮制沿革、化學(xué)成分、藥理作用及質(zhì)量控制等方面進(jìn)行歸納總結(jié)，以期為芡實(shí)的炮制工藝傳承、炮制標(biāo)準(zhǔn)制定及臨床應(yīng)用提供參考。

1 芡實(shí)炮制沿革

1.1 名稱(chēng)考證

芡實(shí)以“雞頭實(shí)”之名始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品[1]。芡實(shí)的別名、異名較多，如“卵菱”“雞癕”“雞頭”“雁頭”“烏頭”“芰”等[1－4]。“雞頭”“雞頭實(shí)”等別稱(chēng)可能緣自芡實(shí)果實(shí)上花萼退化的部分形如雞喙。

1.2 芡實(shí)炮制方法在歷代文獻(xiàn)中的記載情況

芡實(shí)的炮制最初記載為蒸制，在唐代《食療本草》中描述為“可取蒸之，于烈日中曝之，其皮殼自開(kāi)，挼去皮，取仁”，由此可知蒸制的目的是除去外殼，兼為熟用。芡實(shí)從宋代開(kāi)始出現(xiàn)了多種炮制方法，如凈制、藥汁制及炒制。其中，明代的炮制方法最多，包括蒸制、炒制、舂粉以及防風(fēng)湯浸制等。其中，芡實(shí)的炒制方法已沿用至今，而防風(fēng)湯浸制則已不用。芡實(shí)炮制方法在歷代文獻(xiàn)中的記載情況見(jiàn)表1。

1.3 芡實(shí)在藥典和各地炮制規(guī)范中的收載情況

對(duì)《中國(guó)藥典》《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》及21個(gè)省市炮制規(guī)范中收載的芡實(shí)炮制工藝進(jìn)行整理及歸納，具體見(jiàn)表2。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，《中國(guó)藥典》（2020年版）、《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》和其他14個(gè)省市的炮制規(guī)范均收載了芡實(shí)的凈制方法。《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》和其他11個(gè)省市的炮制規(guī)范記載了芡實(shí)的清炒方法，清炒程度多記載為“炒至微黃色”，也有記載為“黃色”“顯火色”“炒至棕黃色”“炒至表面黃褐色至棕褐色”等。《中國(guó)藥典》（2020年版）、《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》及北京、江西、湖南等7個(gè)省市的炮制規(guī)范收載了麩炒芡實(shí)的炮制方法，但其具體炮制方法略有不同，例如山東規(guī)定用武火加熱，而廣西等地則規(guī)定用中火加熱。《福建省中藥飲片炮制規(guī)范》還收錄了蒸制芡實(shí)及鹽炙芡實(shí)的炮制方法。

表2 芡實(shí)現(xiàn)代炮制方法及其各地炮制規(guī)范

綜合對(duì)比《中國(guó)藥典》（2020年版）、《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》和21個(gè)省市的地方炮制規(guī)范可看出，除了古法的凈制、蒸制以及清炒外，近代還發(fā)展了麩炒，個(gè)別地區(qū)還有鹽炙的方法。但目前芡實(shí)的炮制方法主要為凈制和炒制，其中炒制可分為清炒與麩炒。芡實(shí)的蒸制方法僅在《福建省中藥飲片炮制規(guī)范》中仍有記載。另外，不同地區(qū)對(duì)芡實(shí)同一炮制方法的具體工藝也略有不同。

2 芡實(shí)的化學(xué)成分研究

芡實(shí)主要含有多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)、甾醇類(lèi)、木脂素類(lèi)、腦苷脂類(lèi)、生育酚類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)等100多種化合物。芡實(shí)多酚類(lèi)成分主要包括鞣花酸、柯里拉京、老鸛草素、阿魏酸、沒(méi)食子酸等；黃酮類(lèi)成分主要包括柚皮素、5，7，3，4，5′-五羥基二氫黃酮、（－）-表兒茶素-3-O-沒(méi)食子酸酯等；甾醇類(lèi)成分主要包括菜油甾醇、β-谷甾醇等；環(huán)肽類(lèi)成分主要包括環(huán)（苯丙氨酸-絲氨酸）二肽、環(huán)（丙氨酸-脯氨酸）二肽、環(huán)（苯丙氨酸-丙氨酸）二肽等；木脂素類(lèi)成分主要包括euryalins A、euryalins B、euryalins C等；腦苷脂類(lèi)成分主要包括（2S，3R，4E，8E，2′R）-1-O-（β-吡喃葡糖基）-N-（2′-羥基二十二碳酰基）-4，8-sphingadiene、（2S，3R，4E，8E，2′R）-1-O-（β-吡喃葡糖基）-N-（2′-羥基四糖基）-4，8-sphingadiene等；生育酚類(lèi)成分主要包括α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚等；揮發(fā)油類(lèi)成分主要包括水芹烯、十三酸、十五醛等[16－32]。

3 芡實(shí)的藥理作用研究

3.1 抗氧化作用

林棟等[33]采用 2，2′-聯(lián)氮雙-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽[2，2′-azino-bis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid，ABTS]法和芬頓（Fenton）反應(yīng)法評(píng)價(jià)芡實(shí)多肽的抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)芡實(shí)多肽具有較強(qiáng)的清除ABTS自由基和羥基自由基的能力，且其清除能力與劑量呈正相關(guān)。有研究者研究芡實(shí)多糖清除羥基自由基、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基、超氧陰離子和亞硝酸鹽的能力，結(jié)果表明，芡實(shí)多糖具有較好的體外抗氧化活性[34]。

3.2 抗菌作用

李成良[35]研究表明，從芡實(shí)籽中提取的類(lèi)黃酮成分對(duì)大腸埃希菌、沙門(mén)氏菌和根霉均表現(xiàn)出一定抑制作用；芡實(shí)95%醇提物對(duì)枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、酵母菌及弧菌的抑制作用較強(qiáng)。此外，另有研究表明，芡實(shí)種殼提取物對(duì)多種常見(jiàn)致病菌（如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、李斯特菌、阪崎腸桿菌等）均具有一定抑制作用[36]。

3.3 降糖作用

芡實(shí)多糖可通過(guò)激活人肝癌HepG2細(xì)胞胰島素抵抗模型中磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）信號(hào)通路的活性，上調(diào)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4的表達(dá)來(lái)增加葡萄糖消耗以改善胰島素抵抗[37]。Ahmed等[38]從芡實(shí)中分離出的2β-羥基樺木酸3β-油酸酯可顯著降低鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的2型糖尿病模型大鼠的血糖和血脂水平。朱煜冬[39]使用芡實(shí)超微粉對(duì)2型糖尿病模型小鼠進(jìn)行灌胃，結(jié)果顯示，芡實(shí)超微粉能降低模型小鼠的血糖和血脂，并減輕其炎癥反應(yīng)，其作用機(jī)制可能是通過(guò)抑制PI3K/Akt/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路活性，從而治療小鼠糖尿病。

3.4 抗腫瘤作用

芡實(shí)提取物可通過(guò)抑制Akt和激活p53蛋白誘導(dǎo)人肺癌細(xì)胞A549凋亡[40]。芡實(shí)殼提取物對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞和人胃癌SGC7901細(xì)胞的增殖具有明顯的抑制作用[41]。芡實(shí)殼中提取的柯里拉京、老鸛草素對(duì)人卵巢癌A2780細(xì)胞具有顯著的抑制作用[16]。

3.5 降血脂

王歲歲等[42]用芡實(shí)超微粉灌胃高脂血癥模型小鼠，結(jié)果顯示，芡實(shí)超微粉可降低模型小鼠的血脂水平，改善其肝臟脂肪堆積和動(dòng)脈粥樣硬化，并對(duì)高脂血癥引起的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷具有防護(hù)作用。

3.6 其他

芡實(shí)石油醚部位提取物可通過(guò)調(diào)節(jié)腺苷單磷酸活化蛋白激酶-UNC-51樣激酶1途徑激活自噬，起到抗抑郁作用[43]；其還能保護(hù)腦缺血再灌注損傷[44]。芡實(shí)超微粉能顯著降低小鼠體內(nèi)丙二醛和一氧化氮含量，提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性和總抗氧化能力水平，顯著提高端粒酶含量，從而發(fā)揮抗衰老作用[45]。另外，從芡實(shí)殼中提取出來(lái)的柯里拉京具有顯著的抗炎作用[46]。

4 芡實(shí)的質(zhì)量控制研究

2020年版《中國(guó)藥典》中芡實(shí)的質(zhì)量控制方法僅為性狀鑒別、顯微鑒定和薄層色譜鑒別，對(duì)其主要成分及含量并未作要求。隨著對(duì)芡實(shí)的研究不斷深入，多種質(zhì)量控制方法已被應(yīng)用在芡實(shí)的質(zhì)量分析中，使得芡實(shí)藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更為科學(xué)。

由于中藥材的化學(xué)成分復(fù)雜，單一有效成分的含量測(cè)定并不能全面地評(píng)價(jià)中藥材的質(zhì)量，現(xiàn)代學(xué)者多運(yùn)用指紋圖譜等方法來(lái)對(duì)中藥材進(jìn)行更全面的質(zhì)量控制。如，陳蓉等[47]建立了基于近紅外光譜指紋圖譜、紅外光譜指紋圖譜的芡實(shí)藥材分析方法；又采用高效液相色譜法對(duì)其中所含的柚皮素進(jìn)行了定量分析，并結(jié)合主成分分析法和聚類(lèi)分析法，比較了不同產(chǎn)地芡實(shí)的質(zhì)量；同時(shí)以柚皮素、總氨基酸、水溶性蛋白含量為指標(biāo)，建立了芡實(shí)的灰色關(guān)聯(lián)度質(zhì)量評(píng)價(jià)模型，并對(duì)12個(gè)產(chǎn)地的芡實(shí)進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)芡實(shí)中柚皮素含量與產(chǎn)地、氣溫呈正相關(guān)，總氨基酸含量與日照時(shí)間呈正相關(guān)。宋晶等[48]建立了芡實(shí)粉末X射線衍射傅里葉圖譜分析方法，可以通過(guò)此法計(jì)算芡實(shí)的結(jié)晶度，從而分析芡實(shí)中直鏈淀粉、支鏈淀粉含量的差異。

李冬琴等[49]根據(jù)芡實(shí)的化學(xué)成分、傳統(tǒng)功效、傳統(tǒng)藥性等預(yù)測(cè)了芡實(shí)的質(zhì)量標(biāo)志物可能屬于生育酚類(lèi)、多酚類(lèi)、木脂素類(lèi)物質(zhì)。另有學(xué)者通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜法發(fā)現(xiàn)α-生育酚是芡實(shí)中含量最高的生育酚類(lèi)化合物，沒(méi)食子酸是芡實(shí)中含量較高的多酚類(lèi)化合物，且具有較好的抗氧化活性[16]，由此推測(cè)這2種成分可能是芡實(shí)的潛在質(zhì)量標(biāo)志物。

張志超等[50]應(yīng)用等離子體質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地22批次芡實(shí)藥材中鉛、鎘、鉻、銅、汞和砷等6種重金屬的含量，結(jié)果顯示，部分產(chǎn)地的芡實(shí)存在鎘、鉻、砷、汞含量超標(biāo)的現(xiàn)象。金小花等[51]測(cè)定了28個(gè)不同產(chǎn)地芡實(shí)中二氧化硫的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)芡實(shí)不合格率為10.7%。重金屬和二氧化硫含量對(duì)于中藥的安全性和有效性都有一定的影響，因此增加芡實(shí)重金屬及二氧化硫含量檢查項(xiàng)目非常有必要。

5 結(jié)語(yǔ)

本文對(duì)芡實(shí)炮制方法進(jìn)行了歸納梳理，發(fā)現(xiàn)芡實(shí)的炮制方法有凈制、切制、清炒、麩炒、蒸制等，且不同地區(qū)同一炮制方法在炮制工藝上也存在一定差異。古籍中多有記載的防風(fēng)湯浸制芡實(shí)現(xiàn)在也未見(jiàn)沿用，其作用還需進(jìn)一步論證。據(jù)《本草綱目》記載，芡實(shí)“入澀精藥，連殼用亦可”[11]，但現(xiàn)在少見(jiàn)連殼用，后續(xù)可深入研究芡實(shí)連殼用是否具有獨(dú)特功效。

芡實(shí)主要化學(xué)成分為多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)、甾醇類(lèi)、木脂素類(lèi)、腦苷脂類(lèi)、生育酚類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)等，具有抗氧化、抗菌、抗腫瘤、降糖、降血脂等藥理作用。目前關(guān)于芡實(shí)炮制前后化學(xué)成分變化及炮制品藥理活性等相關(guān)研究較少，僅有少數(shù)研究表明芡實(shí)炒制后總黃酮含量升高、多糖含量降低[52]。中醫(yī)認(rèn)為芡實(shí)經(jīng)炒制后性偏溫，其補(bǔ)脾和固澀作用增強(qiáng)，但具體物質(zhì)基礎(chǔ)尚未明確，因而可能出現(xiàn)調(diào)劑配方“以生代熟”的狀況，不利于臨床的規(guī)范用藥。目前，芡實(shí)已建立多種指紋圖譜對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行控制，其中柚皮素、總氨基酸等成分可能是影響芡實(shí)質(zhì)量的差異性成分，重金屬、二氧化硫含量則是影響芡實(shí)安全性的重要指標(biāo)，α-生育酚、沒(méi)食子酸等可能是芡實(shí)的質(zhì)量標(biāo)志物。

后續(xù)可根據(jù)芡實(shí)生、熟炮制品的基本屬性，利用藥學(xué)分析方法全面考察芡實(shí)炮制前后化學(xué)成分的差異及變化規(guī)律，應(yīng)用體內(nèi)、體外模型評(píng)價(jià)芡實(shí)炮制前后的藥效作用，從而為芡實(shí)的炮制工藝傳承、炮制標(biāo)準(zhǔn)制定及臨床應(yīng)用提供參考。