高遷移率族蛋白B1 PCT TGF-β1在新生兒肺炎中的表達水平及意義

王 芳， 彭湘蓮， 王玲華， 楊玉香， 郭映林， 劉銀燕

(湖南省婦幼保健院新生兒一科， 湖南 長沙 410008)

肺炎作為新生兒中常見疾病，可發生與宮內、分娩過程中以及分娩成功后，在臨床上成為產前、產時、產后感染性肺炎，可由多種病原體感染導致，包括病毒、細菌、真菌以及支原體等，是新生兒致死的重要因素之一[1]。臨床研究發現[2]，新生兒肺炎發生后臨床癥狀并不明顯，且目前對于新生兒肺炎的致病機制尚不完全明確，缺乏特異性診斷指標。且目前臨床上多采用廣譜抗生素對新生兒肺炎患兒進行治療，較易出現抗菌藥物使用不規范等現象，因而引發菌株耐藥，因此導致患兒預后恢復不良[3]。因此早期診斷尤為重要，尋找有效診斷新生兒肺炎的敏感指標對肺炎患者預后具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1材料:研究對象：選取2020年1月至2021年1月我院收治的新生兒肺炎患兒80例作為新生兒肺炎組，男45例，女35例，平均日齡(9.53±1.52)d，平均體重(4.56±0.68)kg，根據細菌學培養、血清學檢測分為非細菌性感染組46例、細菌性感染組34例；重癥組21例患兒：腋溫≥38.5℃，除哭鬧、發熱等因素外，呼吸頻率≥70次/分[4]；中癥組25例患兒：腋溫≥38℃，除哭鬧、發熱等因素外，呼吸頻率≥60次/分；輕癥組34例患兒：腋溫≥37.5℃，除哭鬧、發熱等因素外，呼吸頻率≥50次/分[5]；三組患兒均存在不同程度的拒食、呼吸呻吟、間歇性呼吸暫停、發紺、鼻扇、胸壁吸氣性凹陷等癥狀。根據患兒疾病恢復情況分為恢復期組30例、急性期組50例。另外同期選取我院新生兒科足月新生兒80例作為健康對照組，男42例，女38例，平均日齡(9.56±1.60)d，平均體重(5.12±0.72)kg。所有患兒一般資料比較，無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。納入標準：新生兒肺炎患兒符合《實用新生兒學》[4]中新生兒肺炎診斷標準。健康對照組新生兒無肺部疾病，身體健康。排除標準：合并其他肺部疾病者；合并呼吸道疾病者；合并先天肺功能障礙者；合并消化系統、泌尿系統疾病者；糖皮質激素類藥物濫用史者；心、肝、腎功能不全者。

1.2方 法

1.2.1HMGB1、TGF-β1表達水平檢測:采集所有患兒空腹外周靜脈血5mL，常溫靜置，高速離心(轉速：3000r/min，半徑：12cm)10min，分離上清，采用雙抗體夾心ELISA法測定HMGB1、TGF-β1水平，設置酶標板為空白孔、標準孔、待測樣品孔，每孔內均加入50μL稀釋液，空白孔、標準孔、待測樣品孔內依次加入樣品稀釋液、標準品、待測樣片各50μL，輕晃均勻，酶標板覆膜，室溫孵育2h。棄孔內液體，甩干，清洗反應板。加入HMGB1、TGF-β1檢測液100μL/孔，覆膜，常溫孵育60min，棄液體，甩干、洗滌反應板，加入100μL/孔底物溶液，遮光顯色0.5h，加入終止液，輕彈酶標板終止反應。根據酶標儀(型號iMark，Bio-RAD公司)450nm處標準品和樣品于吸光值，計算樣品含量，嚴格按照儀器說明進行操作。

1.2.2PCT測定:采用飛測免疫熒光檢測儀(廣州萬孚生物技術股份有限公司)及配套試劑盒測定PCT水平，嚴格按照儀器說明進行操作。

2 結 果

2.1健康對照組、新生兒肺炎組血清HMGB1、PCT、TGF-β1的表達水平比較:新生兒肺炎組血清HMGB1、PCT、TGF-β1表達水平均高于健康對照組，具有統計學差異(P<0.05)，見表1。

表1 健康對照組新生兒肺炎組血清HMGB1 PCT TGF-β1的表達水平比較

2.2非細菌性感染組、細菌性感染組患兒血清HMGB1、PCT、TGF-β1表達水平比較:細菌性感染組患兒血清HMGB1、PCT、TGF-β1表達水平均高于非細菌性感染組，具有統計學差異(P<0.05)，見表2。

表2 非細菌性感染組細菌性感染組患兒血清HMGB1 PCT TGF-β1表達水平比較

2.3輕癥組、重癥組患兒血清HMGB1、PCT、TGF-β1表達水平比較:重癥組患兒血清HMGB1、PCT、TGF-β1表達水平均高于輕癥組，具有統計學差異(P<0.05)，見表3。

表3 輕癥組重癥組患兒血清HMGB1 PCT TGF-β1表達水平比較

2.4急性期組、恢復期組患兒血清HMGB1、PCT、TGF-β1表達水平比較:急性期組患兒血清HMGB1、PCT、TGF-β1表達水平均高于恢復期組，具有統計學差異(P<0.05)，見表4。

表4 急性期組恢復期組患兒血清HMGB1 PCT TGF-β1表達水平比較

2.5HMGB1、PCT、TGF-β1之間相關性分析:HMGB1、PCT、TGF-β1之間Pearson相關性分析，結果顯示，HMGB1與PCT正相關(r=0.261，P=0.019)；HMGB1與TGF-β1正相關(r=0.245，P=0.027)；PCT與TGF-β1正相關(r=0.479，P=0.001)，見圖1。

圖1 HMGB1、PCT、TGF-β1之間相關性分析

3 討 論

新生兒肺炎在新生兒呼吸道系統疾病中較為常見，以吐沫、呼吸困難、咳嗽、發熱等為臨床表現。臨床中新生兒肺炎被分為感染性肺炎、吸入性肺炎，此病的發生與患兒呼吸道功能發育不完善、機體免疫功能障礙相關，若不對新生兒肺炎患兒進行及時有效的治療，嚴重者可導致新生兒死亡，因此早期診斷對新生兒肺炎患兒預后恢復具有重要的意義[5]。

HMGB1作為晚期炎性介質之一，當細胞發生壞死后被釋放入血呈異常高表達，在炎癥反應進展、機體組織損傷中具有重要的意義[6]。臨床有研究發現[7]，HMGB1可有活化的巨噬細胞、單核細胞所分泌并釋放，在細胞外炎性疾病過程中發揮促炎癥反應作用，為肺炎晚期的炎性反應介質，與致死性炎性反應相關。李佳等[8]在其研究中發現，重癥肺炎患兒支氣管肺泡灌洗液中HMGB1呈異常高表達。本文研究結果顯示，新生兒肺炎患兒血清HMGB1水平高于健康新生兒，在細菌性感染、重癥、急性期患兒血清中表達水平升高，此結果說明，HMGB1在新生兒肺炎中高表達，且與新生兒肺炎患兒是否為細菌性感染、疾病嚴重程度、疾病轉歸情況相關。

PCT作為無激素活性降鈣素前肽物質，其穩定性較好，在機體處于正常生理狀態下，甲狀腺素細胞會產生PCT，可在細胞中經特異性蛋白水解過程中生成降鈣素[9]。臨床研究發現[10]，在機體處于感染性病理狀態下，PCT會由肝臟巨噬細胞、單核細胞、內分泌細胞、肺、腸道組織的淋巴細胞等除甲狀腺器官、組織所分泌，表現為異常高表達。在細菌感染時血漿PCT含量顯著上升，在局部炎癥反應、病毒感染等疾病發生時，保持于低水平狀態，PCT含量變化穩定且迅速，可用于細菌感染、病毒感染類疾病[11]。本文研究結果顯示，與健康新生兒相比，新生兒肺炎患兒血清PCT水平顯著升高，在細菌性感染、重癥、急性期患兒血清中表達水平升高，此結果說明，PCT在新生兒肺炎中高表達，且與新生兒肺炎患兒是否為細菌性感染、疾病嚴重程度、疾病轉歸情況相關。

TGF-β1功能較多，屬于一種細胞因子，具有較強的免疫調節功能和復雜的生物學功能，目前有研究顯示[12]，局部TGF-β1可激活炎癥反應，具有激活和招募白細胞，促進炎癥反應的發生發展，而初始T細胞可分化全身系統TGF-β1為Th1/Th2，抑制其作用過程，維持機體免疫功能。另外有研究發現[13]，TGF-β1作為促纖維化細胞因子，可經自身或者自身外所分泌的方式對成纖維細胞進行刺激，促進纖維細胞生成細胞基質蛋白，作用于膠原翻譯、轉錄過程，最終促進肺纖維化。彭敏等[14]在其研究中發現，肺炎支原體肺炎患兒血清TGF-β1表現為異常高表達，另外Muhammet Furkan Korkmaz等[15]同樣證實，肺炎的發生與TGF-β1高表達相關。本文研究結果顯示，TGF-β1在新生兒肺炎患兒外周血中呈異常高表達，在細菌性感染、重癥、急性期患兒血清中表達水平升高，此結果說明，TGF-β1在新生兒肺炎中高表達，且與新生兒肺炎患兒是否為細菌性感染、疾病嚴重程度、疾病轉歸情況相關。

另外在本文研究中分析HMGB1、PCT、TGF-β1三者之間相關性，結果發現，三者之間呈現為正相關，此結果說明三者可能共同參與新生兒肺炎的發生發展。

綜上所述，HMGB1、PCT、TGF-β1在新生兒肺炎中高表達，與患兒細菌性感染、嚴重程度、疾病轉歸相關，且三者呈現為正相關，共同參與此病的發生發展。