滴眼液使用過程中的微生物檢測分析

謝美娜，于丹丹，吳真祎

滴眼液是一種眼科最常使用的直接作用于眼表并發(fā)揮治療效果的眼科制劑，其療效及安全性一直受到公眾及臨床關(guān)注[1-4]。滴眼液若主藥本身不具備較強抗菌活性，存在較高污染風險，需要添加適宜防腐劑，預(yù)防使用過程中的微生物污染，繼而損害眼部健康。但長期應(yīng)用含防腐劑的滴眼液也會對眼表造成一定程度的損傷，此外除了滴眼液本身成分外，滴眼液還會受到環(huán)境保存、操作者等因素的影響，出現(xiàn)微生物污染風險極高。因此，臨床認為需要加強滴眼液微生物污染控制，確保眼病患者可以獲得更好效果[5-6]。而實施微生物檢測有利于篩查微生物感染的滴眼液患者，及時更換滴眼液，降低患者感染風險。但目前臨床對滴眼液使用過程中的污染因素研究較多，而對于使用過程中的微生物檢測研究報道相對較少[7-8]。本研究對滴眼液使用過程中的微生物檢測進行研究分析，旨在為滴眼液合理使用期限提供參考數(shù)據(jù)。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2018年9月至2020年12月中國人民武裝警察部隊海警總隊醫(yī)院收治的應(yīng)用滴眼液治療的80例患者，將其使用的80 瓶滴眼液納入研究，并根據(jù)滴眼液種類分為兩組，A 組（左氧氟沙星滴眼液）42例，B組（玻璃酸鈉滴眼液）38例。A 組男29例，女13例；年齡20 ～64歲，平均（42.4±5.7）歲；原發(fā)疾病：白內(nèi)障32例，青光眼10例。B組男27例，女11例；年齡21 ～65歲，平均（42.4±5.2）歲；原發(fā)疾病：白內(nèi)障30例，青光眼8例。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學意義（P ＞0.05）。

A 組使用左氧氟沙星滴眼液[參天制藥（中國）有限公司，規(guī)格：5 ml，國藥準字：J20150106]，1 滴/次，3 次/d。B 組使用玻璃酸鈉滴眼液[生產(chǎn)廠家：參天制藥（中國）有限公司，規(guī)格：5 ml，國藥準字：H20173249]，1 滴/次，3 次/d。納入標準：（1）滴眼液距離有效期時間均≥21 d；（2）每種滴眼液均為同一廠商且外包裝完整；（3）患者簽署治療知情同意書。排除標準：（1）眼周原發(fā)性感染性病灶及影響滴眼液污染因素者；（2）長期服用免疫抑制劑及其他影響眼部菌群分布的藥物。

1.2 方法 兩組患者的滴眼時間和次數(shù)相同，完成之后蓋緊瓶蓋，使用后的滴眼液均常溫放置在患者床頭保存，患者用藥3 ～7 d后出院帶藥回家繼續(xù)用藥。樣本采集方法：參照《感染性眼病細菌學檢查操作專家共識》進行相關(guān)操作。每組均在滴眼液開啟后第1、7、21天，于每天下午3 點進行采樣，均由經(jīng)過培訓的護士采樣操作并記錄，并且將標本送檢。瓶口取樣：采用棉簽蘸取少量0.9%氯化鈉注射液，對滴眼液瓶口全周進行輕輕擦拭，完成操作后將棉簽放置于血平板中進行涂抹操作，并放置于恒溫培養(yǎng)箱中（溫度設(shè)置37 ℃）進行微生物培養(yǎng)。瓶內(nèi)取樣：采集1 滴滴眼液放置于培養(yǎng)皿中，應(yīng)用定量環(huán)進行涂抹，并放置于恒溫培養(yǎng)箱中（溫度設(shè)置37 ℃）進行微生物培養(yǎng)。滴眼液質(zhì)量要求：開啟時瓶口及瓶內(nèi)滴眼液微生物檢測均為陰性。若呈現(xiàn)陽性者需要繼續(xù)微生物菌種鑒定，并為患者提供新滴眼液，而新滴眼液不納入本研究。

1.3 觀察指標 對比兩組治療后各時間點瓶口污染及瓶內(nèi)污染情況，鑒定微生物菌種情況。（1）瓶口污染及瓶內(nèi)污染情況：記錄治療后第1、7、21天瓶口污染率及瓶內(nèi)污染率。采集好的樣本進行24 h培養(yǎng)（血平板內(nèi)），并用肉眼觀察，若出現(xiàn)顏色灰白且半透明或不透明，形狀為凸起或扁平的菌落生長則呈陽性，記為污染；培養(yǎng)48 h 后仍未見任何細菌生長則呈陰性，記為無污染。統(tǒng)計瓶口污染及瓶內(nèi)污染數(shù)及其占比。（2）污染微生物的種類：將瓶口及瓶內(nèi)呈現(xiàn)陽性的滴眼液篩選出來，對其血平板上細菌進行微生物培養(yǎng)，對單個菌落進行分純涂片及革蘭染色操作，并根據(jù)染色結(jié)果，應(yīng)用鑒定卡對菌種類型進行分辨、記錄。

1.4 統(tǒng)計方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計軟件進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，采用t檢驗；計數(shù)資料采用2檢驗（理想頻數(shù)＜5 采用連續(xù)性校正2檢驗）。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療后各時間點瓶口污染情況比較 兩組治療后第1天瓶口均無污染，A組治療后第7、21天瓶口污染率均低于B 組（均P ＜0.05），見表1。

表1 兩組治療后各時間點瓶口污染情況比較 例（%）

2.2 兩組治療后各時間點瓶內(nèi)污染情況比較 兩組治療后第1、7天瓶內(nèi)均無污染，治療后第21天B 組出現(xiàn)污染5例，A組瓶內(nèi)無污染，A組瓶內(nèi)污染率低于B 組（13.16%）（2=3.863，P ＜0.05）。

2.3 治療后各時間點菌種分布情況 按照瓶口微生物菌種分布數(shù)量由高到低依次為金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性的葡萄球菌、毛霉菌、芽孢桿菌，瓶口污染微生物最常見均為金黃色葡萄球菌；瓶內(nèi)主要為毛霉菌。且A 組金黃色葡萄球菌發(fā)生率低于B 組（P ＜0.05）。見表2 ～3。

表2 兩組瓶口污染微生物菌種分布情況 例（%）

3 討論

滴眼液包裝主要為多劑量包裝，開啟后始終處于不封口狀態(tài)，經(jīng)空氣與外界接觸，出現(xiàn)瓶口或瓶內(nèi)感染風險較高。一旦出現(xiàn)瓶內(nèi)或瓶口微生物污染，將會增加眼病患者眼部感染或眼內(nèi)感染的風險，繼而損傷到眼部組織。而加強滴眼液使用過程中的微生物檢測工作是保障患者治療安全的關(guān)鍵，也是醫(yī)院感染預(yù)防的重要管理環(huán)節(jié)[9-10]。

本研究結(jié)果顯示治療后第7、21天兩組均出現(xiàn)瓶口污染，且A 組瓶口污染率均低于B 組（均P ＜0.05）。其原因在于瓶口可能與眼瞼皮膚、睫毛、結(jié)膜、手部組織進行接觸，繼而增加瓶口污染風險[11]。筆者認為有必要加強醫(yī)務(wù)人員及患者的感染意識，嚴格按照消毒隔離、手衛(wèi)生及操作方法進行治療，尤其是對于做好手部組織消毒工作，避免直接眼瞼皮膚、睫毛、結(jié)膜觸碰；同時加強對患者消毒隔離的安全意識，對其操作行為進行培訓。B 組治療后第21天出現(xiàn)污染，且A 組瓶內(nèi)污染率低于B 組（P ＜0.05）。其原因在于瓶內(nèi)感染主要與滴眼液成分、環(huán)境等因素有關(guān)。因此，臨床需要定時開窗通風及空氣消毒，尤其是在冬季病區(qū)內(nèi)中央空調(diào)集中供暖時期，更需要定時通風及消毒。而不同滴眼液種類出現(xiàn)瓶口、瓶內(nèi)污染風險存在一定差異，可能與左氧氟沙星滴眼液為抗菌素類滴眼液代表，0.3%玻璃酸鈉滴眼液為非抗菌素類滴眼液代表，左氧氟沙星滴眼液具有抗菌作用，且抑菌功能較強，繼而降低微生物污染風險。而瓶口污染風險更高可能與滴眼液包裝瓶設(shè)計有關(guān)，能預(yù)防滴出滴眼液逆流進入瓶內(nèi)[12-13]。因此，臨床選擇滴眼液品種時，在患者對用藥耐受情況下，需盡量選擇可預(yù)防逆流的包裝瓶設(shè)計及具有較強抗菌作用的滴眼液。

表3 治療后各時間點菌種分布情況 例（%）

按照瓶口微生物菌種分布數(shù)量由高到低依次為金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性的葡萄球菌、毛霉菌、芽孢桿菌，瓶口污染微生物最常見的均為金黃色葡萄球菌；瓶內(nèi)主要為毛霉菌。且A 組金黃色葡萄球菌發(fā)生率低于B 組（P ＜0.05）。金黃色葡萄球菌屬于革蘭陽性菌代表，主要分布于人體皮膚、鼻腔、咽喉、空氣等環(huán)境中，37 ℃環(huán)境下生長良好，有很強的感染能力，也是醫(yī)院內(nèi)交叉感染的重要傳染源。毛霉菌屬于腐生性真菌，主要分布于土壤、糞便或腐爛食物、環(huán)境中，在高溫、高濕度或通風不良環(huán)境下更有利于生長；該類型檢出率主要集中于冬季，可能與季節(jié)環(huán)境有著密切關(guān)聯(lián)性，冬季室內(nèi)通風不良且空氣質(zhì)量不佳，促進毛霉菌增長[14-15]。因此，要根據(jù)滴眼液常見微生物發(fā)生原因加強管理，包括定時開窗通風、定時消毒，保持室內(nèi)溫度適宜等；同時對于已感染患者可根據(jù)微生物菌種檢測結(jié)果實施對癥治療。

綜上所述，非抗菌素滴眼液瓶口更易發(fā)生污染，且隨著使用時間的延長污染率升高。滴眼液使用過程中發(fā)生瓶口污染率較高，而瓶內(nèi)污染率較低；且瓶口感染微生物主要為革蘭陽性球菌，瓶內(nèi)污染微生物主要為真菌。